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Transformation 할 때 vector DNA를 1ug 사용하셨다는거 보니까 제한효소 처리할 때도 DNA를 엄청 많이 때려 넣으셨을 것 같은 생각이 드네요. 위에 뜬 밴드는 안 잘린 DNA 같아요. DNA양을 줄이시던지 제한효소 양을 늘려서 다시 반응시켜 보세요. 짤릴 겁니다. 아마도.
Gel 사진을 보면 좋겠는데 안잘린 밴드는 아래에 나오는게 정상이지 않을까요? 위에있는거면 Prep할때 Cell 상태가 안좋았다는걸로 여겨지네요. DNA Cut하고 왠만하면 젤 잘라서 extraction합니다. 프렙이 깔끔하고 실험하기 귀찮으면 mini prep kit으로 그냥 내려버려도 되긴하지만..
Vector불리는것 치고는 양이 많네요. 10ng에 컴셀 50ul에 LB는 400ul정도하시고 SOC말고 그냥 LB로 해도 되긴합니다. 어차피 콜로니만 뜨면 되니까요. pET 시리즈가 DH5a에서 양이 좀 적게 나오니 불릴때 미디나 맥시로 하시던지요.
Calli님// 아래에 나오는게 맞네요. super coil form은 보통 원사이즈의 1/2보다 약간 윗쪽에 뜨니까.. 제가 착각 했어요~