제 경우, sample을 준비할 때 딱 한번 loading하는 분량을 준비하지 않습니다.
가령 10ug을 10ul로 loading해야 하는 경우라면 100ug을 100ul가 되도록 준비하고 끓인 후 이중 10ul만 loading을 합니다.
이리하는 이유는 크게 두가지 입니다.
저는 개인적으로 reprobing한 후의 data를 믿지 않기 때문에 여러개의 단백질을 동시에 봐야 하는 경우를 위해 또 다른 blot을 준비하기 위한 것이고 또 한가지 이유는 적은 volume의 sample보다는 많은 volume의 sample을 준비하는 것이 sample간 차이를 최소화할 수 있기 때문입니다.
30ul를 준비해서 20ul를 loading하는 것이 sample이 한정적이기 때문이 아니라면 그 보다 많은 volume으로 준비하는 것보다 더 정확할 겁니다.