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효소반응에 대한 질문입니다.
mecha (비회원)
안녕하세요, 수고많으십니다. 효소 억제 실험 중에 궁금한 것이 있어서 이렇게 조언 구합니다. 수행하는 실험은 ATPase(조직에서 분리 정제한 것)에 대한 억제물질을 찾는 실험을 하고 있습니다. 간단히 실험을 설명하면, 기존 확립된 반응조건(적정기질농도, 반응시간, 효소농도)에 검색하고자 하는 물질(가역적 억제제)을 넣고 약 30분간 반응을 합니다. 특이적 효소 활성도는 음성,양성 대조군의 차로서 구하고, 억제 물질 처리군의 억제력은 OD값을 기준으로 % 억제력을 측정합니다. IC50값은 여러농도 조건에서 % 억제력을 근거로 산출하였구요 문제는 시간별 약물의 억제력을 측정하기 위해 동일 반응조건에서 IC50농도의 약물을 처리한 후 시간별(5, 15, 30, 45분) %억제력을 측정해보니, 시간 의존적으로 현저하게 감소하더군요. 제 생각엔 반응시간 증가에 따라 억제력이 일정하거나 혹은 증가되어야 하지 않을까 생각했는데, 영 효소학에 공부가 부족해서요 그럼..고수님들의 조언 부탁드립니다.
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