실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
Thawing-Freezing으로 세포를 깬후 fractionation 해보신분?
레벨3 yongdol
제가 수행하는 mammalian cell fractionation은 아주 고전적인 centrifugation법이고요.. 처음에 핵을 600g에서 걸러내고, 세포질과 세포막은 ultracentrifugation으로 분리하는 방법을 쓰고 있습니다.. 그리고 세포막을 부수는 작업을 원래 Duall20과 같은 dounce homogenizer로 수행하였었으나, 그 homogenizer가 분실된 상태에서 thawing-freezing으로 같은 실험을 수행하면 어떨지 궁금해서 질문을 드립니다. 제가 제일 염려되는 점은 혹시 dounce homogenizer에 비해, thawing-freezing법이 세포막에 훨씬 많은 손상을 주어서 막단백질이 세포질 fraction으로 오염되지 않을까 하는 점입니다. 혹시 thawing-freezing법으로 세포를 깬 후 fractionation을 수행해본 분이 계시다면 답변을 부탁드립니다. ^^
Bio마켓 프리미엄