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질문 흡광도의 standard curve에서 농도가 짙어질 수록 흡광도가 낮아지는 이유가 뭐죠?
블루리  | 2012.10.02 15:11
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
흡광도를 재서 standard curve를 그리면

높은 R2값을 갖는 standard curve에서도 농도가 짙어질 수록 흡광도가 낮아지는 걸로 알고있는데,

이게 시료의 농도가 짙어질 수록 결국 흡광도는 1에 가까워 지기 때문인가요?



근데 그러면 흡광도는 왜 1을 넘으면 안 되는 거죠?

궁금합니다!
#흡광도
 
#curve
 
#농도
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
알비됴  |  2012.10.04   
흡광도를 측정해서 농도를 구하는 작업은 Beer의 법칙에 근간을 두고 이루어 집니다.

Beer의 법칙 : '기체 또는 액체에 의한 빛의 흡수는 그 속의 분자수에 의해서만 결정되며,
희석에 의해서 분자수가 변화하지 않는 한, 희석도(稀釋度)에는 관계가 없다는 법칙이다.
Lambert-Beer의 법칙이라고도 한다.' - 네이버 지식사전

낮은 농도에서는 이 Beer의 법칙이 잘 적용되지만, 농도가 높아지면 굴절률이 변하게 되고 결국 '희석도에는 관계가 없다.'가 맞지 않게 됩니다.

시료의 농도가 짙어질 수록 농도와 흡광도가 비례관계가 아니라 log 그래프와 같이
포화되는 형태의 곡선을 보이게 됩니다.
일반적인 spectrophotometer에서 흡광도는 1을 넘어 3~4 이상까지도 측정됩니다.

즉, 흡광도가 1을 넘으면 안되는 이유는 일반적인 spectrophotometer에서는
흡광도 1 이하까지만 농도도 VS 흡광도 곡선이 직선형이기 때문에
흡광도 1 을 넘어가면 직선형 표준곡선이 맞지않기 때문입니다.

또한 너무 낮은 농도에서의 흡광도인 0.0 ~ 0.2 를 표준곡선에 포함시키는 것도 조심해야 합니다.
기기의 검출한계에 근접한 낮은 농도의 흡과도 수치 또한 정확한 값이 아닐 수 있기 때문입니다.















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