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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 real time PCR melt curve 2개 ?ㅜㅜ
허정  | 2012.08.29 10:00
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
첨부파일 파일첨부: 1.bmp (1.78 MB)

PCR 왕초보입니다 ㅜㅜ
real time PCR melt curve가 2개로 나왔어요..... iNOS 중에 군데군데 ㅜㅜ
이거 data 쓸수 있을까요???
melt curve가 무엇을 의미하는건가요?

#PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리식스센스  |  2012.08.29   

real time PCR에서 melting curve를 그려주는 것은 (SYBR method에서 주로 사용하죠) PCR product가 non-specific product가 생겼는지를 확인해주는 것입니다. 즉, doublet 혹은 multiple peak가 나온다면 그것은 실험결과로 사용할 수 없다고 보면 됩니다. 그림상으로 보았을 때 디자인한 primer가 iNOS이외의 다른 부위와도 아주 강력하게 결합하여 증폭을 하는 것으로 판단이 됩니다. 아마 전기영동을 하면 두개의 진한 band가 보이지 않을까 생각이 됩니다(전기영동으로 한번 확인해보세요). 따라서 melting curve의 결과만 보았을 때 iNOS primer를 다시 design을 하든지 annealing 및 amplification 조건을 수정해보시기 바랍니다.

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