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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
조회 4473  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 cell오염때문에..
cell...  |  2006.05.08 00:00
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
cell이 bacteria에 감염되었습니다..ㅠ.ㅠ
그것도 두달이 다 되어가는군요..
cell의 growth에는 별 영향을 미치는것 같진 않으나 cDNA microarray를 할예정이여서 그것때문에 다시 cell을 주문하여 실험을 수행했습니다.
그리고 clean bench의 오염여부를 particle counter로 측정하여 무균하다는것도 확인했구여..
그런데 오늘 cell을 다시 풀었는데 약간 이상해서...
또다시 오염이 된것 같기도 하고
혹시 어느정도의 bacteria오염여부를 무시해도 되는건지..
궁금합니다.
그리고 다른 lab에서는 bacteria에 오염되었을때 어떻게 대처했는지 궁금합시다.
이것때문에 거의 2달간을 실험을 중단했습니다.
꼭 가르쳐 주세요..ㅠ.ㅠ
#cell culture
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
gg  |  2006.05.08    
오염이라.. 어느정도의 오염이 아니라
오염이 된거 같으면, 걍 버리고 새로 하는 편이 빠르다고 생각합니다..

저도 여러번 버렸어요..
아이피  |  2006.05.08    
세포를 얼린거 다시 풀었더니만 문제가 있다면
당연 얼릴때 잘못 얼리신거겠죠.
Freezing media를 다시 한번 체크하시고
각종 PBS포함 media들도 체크하세요

24well같은데에 한 1ml씩정도를 넣어줍니다.
그런후 하루나 이틀후에 현미경으로 보면
그중 어떤것이 오염되었는지 확인할수 있습니다.

이렇게하시고 얼린거 다시 다 풀어서
오염안된거로 실험하시면 될겁니다.

다행히 박테리아는 그리 큰 문제는 없습니다.

간단히 설명할께요.
키우던 세포를 PBS로 두세번 정도 washing합니다.
그런다음 세포를 Trypsin 처리해서 떼고 새로운 dish로 옮겨줍니다.
10 cm dish에 culture media 한 6-7ml 넣어주고
이때 항생제 penicillin/streptomycin 100 X 짜리 를
희석시키지 말고 원액을 1ml정도 넣어주고
overnight합니다.
그런다음 다음날 washing하고 새배지로 갈아줍니다.

좀 상태가 양호해질겁니다.

이런 식으로 할수 밖에
일단은 이렇게 하고
새로운거 풀어서 상태확인하고

맨처음엔 어떤게 원인인지 원인파악을 먼저 하시고
그럼 헤어날수 있을 겁니다.

yeast에 오염되지 않은것만해도 다행이라고 생각하세요.
그럼


^^  |  2006.05.08    
제 생각에 안티바이오틱스(antibiotice)문제 인거 같은데요
배지에 첨가 할때 유통기한을 확인 하셨는지요??
한번 확인 해보세요
안티바이오틱스에 가라앉는 침전물이나 색이 이상할 시도 쓰시면 안되구요
그래도 셀이 오염되었다면 안티바이오틱스를 1% 를 더 첨가하여 써 보세요
그럼 박테리아가 보이지 않을 껍니다. 그리고 천천히 항생제 % 낮추시면 괜찮을꺼예요 ^^ 도움이 되셨길 바랍니다
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