실험 Q&A Laboratory Animals > Histology/Pathology
Safranin O staining 질문드립니다.
레벨1 내맘속호수
현재 bovine cartilage sample 직접 채취해서 PFA 4% 고정후 paraffin section해서
sample slide로 보유하고 있습니다.
xylene - 100% EtOH - 95% EtOH - 90% EtOH - 75% EtOH - DW 거치며 Deparaffination 한뒤
FCF 3min - 1% 아세트산 - Safranin O (Polyscience) 5min 염색 뒤
95% EtOH - 100% EtOH - xylene으로 클리어 한 뒤 invitrogen clearmount로 고정했습니다.
그런데 mount 전에는 색이 괜찮은데 mount하고 나면 색이 붉은색에서 오렌지 색으로 바뀌네요..
뭔가 색이 빠지는 듯한 느낌이 드는데..
staining protocol의 문제인지.. mounting sol.의 문제인지..
현재 staining 시간도 늘려보고, mount 전에 완전히 말려보고 mount 하기도 하는데 결과는 계속 색이 빠지네요.. 저희가 처음 시작하는 실험실이라.. 세팅중에 있는데 도움 부탁드립니다!
감사합니다.
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