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레벨5
animanga
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12.02.10 15:58
antibiotics resistance gene이 cell내의 다른 곳으로 들어갔을 수도 있고, 아니면 mutant가 생겨서 resistance를 얻고 살아남은 것일 수도 있습니다. 적어도 PCR결과를 보면 원하는 recombination은 일어나지 않은 것 같군요..최대한 많은 콜로니를 확인해보시기 바랍니다.
single crossover인가요? double cross over인가요?
어느 반응인가에 따라서 답이 좀 다릅니다.
single C/O인 경우라면 원하는 유전자 이외의 부위에 들어가 있을 수 있습니다.
double C/O로 계획하신 거라면 아마도 spontaneous mutation일겁니다.
또는 PCR error일수도 있으니 positive control과 negative control을 함께 해보셔야 합니다.
대장균인가요?
animanga 님 // 더 많은 콜로니를 얻어 확인해 봐야겠습니다 답변감사합니다^^
강시 님 // double cross over로 하고 있고, 사용 균주는 Klebsiella pneumoniae 입니다.
혹시나 하고 BLAST를 통해 knock 하고자 하는 gene이랑 유사한 gene이 있나 확인해보았는데
유사한 gene이 K.pnuemoniae 내에 있었습니다..
일단은 유사한 gene에 Apramycin gene이 들어갔다라고 생각하고있는데
PCR오류도 있을 수 있으니 positive, negative control도 알아보아야겠습니다
답변감사합니다^^