[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
실험 테크니션 설문결과
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Laboratory Animals > Blood
조회 4137  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Blood에서 RNA 추출 시 lysis.. 도와주세요 ㅠㅠ
merry  | 2012.02.06 16:04
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)

whole blood에서 RNA 추출을 하려고 합니다.
RNA는 50 ng 정도만 필요해서, Blood 50 ul (micro-liter) 를 사용했습니다.
blood 전용 kit 사용하지 않고, Qiagen의 일반 RNA 추출 용 Mini kit를 사용했습니다.

Lysis 할 때 Qiagen kit의 RLT buffer 350 ul 에다가 Blood 50 ul 를 넣고 vortex 했습니다.
충분히 vortex 했다고 생각하고 추출을 진행했는데,
RNA가 거의 나오지 않았네요 ㅠ_ㅠ (50 pg 정도?;;;)
fresh 한 blood 였고, RNA 실험 계속 해 오고 있었는데 blood sample은 처음입니다.

homogenize를 안 해서 lysis가 잘 안 된 것일까요?
RLT buffer 만으로 blood sample lysis가 불가능한가요? ㅠㅠ

#blood
 
#rna
 
#qiagen
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
나그네  |  2012.02.06    
샘플 volume이 부족해서 그런거 아닐까요??? Trizol방식에 Column방식의 제품을
써보시는 건 어떨까요?
Geneall Hybrid-R blood RNA제품을 추천해드립니다. 샘플도 제공하고 있으니깐 검토해보세요
www.geneall.com
입니다.
merry  |  2012.02.07    
ㅠㅠ.. 지금 연구실에서 이 실험만을 위해서 새로 키트를 장만하기는 힘들 것 같아요..
시간적 여유도 없구요..

sample을 좀 더 충분히 넣고(750 ul),
주사기 바늘에 통과시켜서 homogenize 해 보면 좀 더 lysis가 잘 될까요?
RLT buffer가 lysis 효율에 문제는 없나요?

처음 시작했던 sample 양이 적었다고 생각하긴 하는데요,
그래도 fresh 한 sample인데 RNA가 1ng도 안 나오는건 좀 심한 것 같아서요.. ㅠㅠ
답변하기
할인행사 광고 검색광고
바이오디 바이오디
Wet 방식의 장점에 속도와 편리함까지 지닌 eBlot & eStain 파격 할인 (8.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 할인 행사 (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString & COVID-19 / 다양한 Cloning application에 적용 가능한 com... (8.27까지)
케이비티 케이비티
[KBT] Thermo Shaker, Sonicator, Mixer, Heating Block, Rotato.. (8.16까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
qPCR/PCR 셋업을 자동분주기로 개선해보세요. : epMotion5070PCR (8.8까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
4/6  좌우
739,000702,100
17,000
370,000
93,20088,600
49,000
52,60050,000
109,000
79,50075,600
6,000
23,000
468,000
143,800136,700
130,500124,000
47,20044,900
482,000
92,30087,700
66,50063,200
136,000129,200
773,000734,400
339,400322,500
493,000
482,000
125,500119,300
139,000132,100
최근등록   더보기 >
genomic DNA extraction 과정 중에   08.04
11,000 bp와 12,000 bp의 vector를 전기영동으로 구분할수 있을까요 ?   08.03
cell seeding시 swirl 과 deposition 이라는 표현   08.03
3T3-L1과 RAW 264.7 cell의 GAPDH primer   08.03
용액 온도를 동시에 잴 수 있는 hot plate가 있을까요?   08.03
RNA sequence 에서 프라이머 제작 시, 인트론 사이의 엑손을 선택하면 안되는 이유...   08.03
스킴밀크에 스탁해 놓은거 어떻게 쓰나요??   08.03
4-6개월 냉장보관해 놓은 액체배지를 autoclave 멸균시켜서 재사용해도 될까요?   08.03
SDS, NP-40, Sodium deoxycholate 관련해서   08.03
HUVEC 배양, 배지 관련해서 질문드립니다.   08.03
라이카코리아
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크