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질문 enzyme 2cut
enzyme 2cut  | 2006.12.12 10:30
 답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
라이게이션하려구 벡터와 인설트 enzyme 2cut하려구요

EcoR1->EcoR1 buffer, 1.2.3.4.모두 100%
Sal 1->3+BSA

이렇게 나와있네요.이럴경우
1.이 두 엔자임 함께 넣어 자를때와 EcoR1 먼저 넣어 2시간 자른 뒤 Sal 1add 한 뒤
두시간 더 두는 경우 어떤게 더 좋은지요?
2.두 엔자임 자를 때 EcoR1 buffer+BSA 와 3번 버퍼+BSA 중 어떤게 더 적당한지

부디조언부탁드립니다^^;;
#enzyme 2cut
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리얕은지식  |  2006.12.12   
버퍼가 틀릴 경우는 염도가 낮은 효소먼저 처리한후에
바로 다음 효소를 처리하시는 것이 낫지요.
아니면 BSA는 첨가되어도 그리 영향은 없으니
2가지 효소와 3번 버퍼+BSA 로 하시는것도
괜찮을듯 싶습니다.
Sal 1의 경우는 자르는것이 꽤 힘들더군요.(시간걸립니다)
개구리김승훈  |  2006.12.13   
BSA는 carrier protein 이라고 해서 넣으면 SalI이 작동을 잘 하도록 도와주는 일종의 조효소라고나 할까? 그렇다고 효소라고는 볼 수 없습니다. 말이 그렇다는거지...
여튼...
BSA는 넣어도 되고 안넣어도 되지만, 잘 안잘리는 효소의 경우에는 넣는것이 도움이 됩니다.
저라도 2번에 3번버퍼 + BSA를 추천합니다.
O.V.N으로 자르세요.
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