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형질전환을 위해서, 먼저 하루전날 start culture 2ml을 500ml의 액체배지에 접종합니다.
당연히 항생제도 넣어줘야겠죠, 그리고, 12시간 후, harvest 한 cell을 형질전환에 사용하시면 됩니다.
일반적으로, LB배지를 많이쓰나, agrobacterium에는 YEP배지를 많이 추천하나, 제가 사용해 본 경험으로 둘의 별 차이는 없습니다. 자라는 속도나 정도면에서 큰 차이를 발견하지 못하였어요.
중요한 것은 start culture가 충분히 자랐을 때, 2ml을 사용하시는 것이 좋습니다.
물론, 500ml을 배양할 때에는 2L 삼각플라스크를 추천합니다. 더 큰것이 좋으나, incubator의 여건상 그 정도면 충분할겁니다.
아무래도 상황에 따라서 셀의 배양속도가 정도에 차이는 있을지 모르나, 36시간은 너무 오랜시간 배양을 하는 것입니다. 토양미생물이라고 할지라도, 플레이트에 자라는 속도랑 액체배지에서 자라는 속도는 분명히 틀리기 때문에 12시간을 추천합니다.