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레벨5
당근시른토끼
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11.12.21 23:32
colony 보관이라.. 정확하게 어떤 의미인지 모르겠네요 ㅎㅎ
colony 자체를 보관 // colonization된 균주를 보관 // 균주안에 있는 vector보관... 머 다 같은 개념이지만 설명드릴꼐요 ㅎㅎ
colony자체를 보관하는 방법은 오래가지 못합니다. master plate를 제조하여 4도시 보관한다고 해도 균은 조금씩이라도 자라기 때문에 그리 좋지 못한 방법입니다. 2~3개월 정도는 괜찮다고 보여집니다. 그리고 colony에서 일부는 쓰고 일부는 보관한다는 것은 colony 1개에서 조금 쓰고 나머지를 보관한다는 건지 여러개의 colony중에 1개 쓰고 나머지 보관한다는 건지 잘 모르겠습니다. 한 plate에 자란 colony라고 다 같은 것은 아닙니다.
균주를 보관하는 방법이 3가지 방법중 가장 좋은방법 같습니다. plate에서 colony를 찍어 2ml정도의 media에 키운 후, 50% glycerol과 1:1비율로 섞으신 후 -80도에 보관하면 장기간 사용하실 수 있습니다. 오늘이나 내일 당장 할 수 있는 방법이겠죠.
균에서 vector를 꺼내어 보관하는 것은 kit가 와야 한다니 당장할 수 없겠지요. 하지만 조금만 서적을 뒤져보시면 kit따위 안쓰고 plasmid DNA를 추출할 수 있는 방법은 금방 찾으실 겁니다. vector는 주로 -20도에서 보관하고 장기간 보관시에는 -80도가 좋습니다.
플레이트 자체로 보관할 수도 있지만 시간이 지날 수록 셀이 죽어가기때문에..
장기간 보관하려면, 콜로니 하나를 따서 4~5ml정도 media에 O/N해서 액체 배양?을 한다음에.. 500ul정도 덜어내서 DMSO를 final 7%가 되게끔 넣어주고 볼텍스 한번 해서 -80 freezer에 얼리면 되요. 그럼 다음에 필요할 때는 다시 녹히지 말고.. dry ice같은데에 튜브 꽂아놓고.. 일회용 루프? (백금이 같이 생긴..) 아님 뭐 적당한 것들로..... 일부를 긁어내서 plate 에 배양하면 다시.. 콜로니를 얻으실 수 있습니다. 혹시 모르니까 2..3개 정도 스탁을 만들어놓으시면 아마 오래오래 쓰실 수 있을것 같네요...~
miniprep kit 주문해서 오는데 2-3주 씩이나 걸리나요?
외산제품은 쓰시나 보군요...
국산제품에도 좋은 제품들 많이 있습니다...1-2일이면 물건을 받을수 있는데
2-3주나 기다리는것은 현명하지 못한 방법이라 생각합니다...