어떠한 처리도 하지 않은 화분에 식물이 심어져 있습니다. 이 식물에서 gene을 cloning하기 위해서 total RNA을 추출하였습니다. cDNA합성을 거친 후 이 cDNA를 template로 하여 RT-PCR을 하여 band가 형성되었고 sequencing결과를 토대로 3`-RACE를 진행하여 단편을 얻는데 성공하였습니다. 첫 번째 cloning에서 얻어진 sequence와 3`-RACE로 얻어진 sequence를 비교하여 기지서열이 100%로 일치하는 것을 확인하였습니다. 5`-RACE를 실행하려는데 cDNA sample이 부족하여 새로이 같은 식물에서 total RNA를 추출하여 이전 sequencing을 토대로 5`-RACE용 primer를 제작해서 진행해도 될까요? 질문을 하는 목적이 지금 5`-RACE가 너무도 안되고 있네요.. 아무리 원인을 찾을라 해도 찾을 수 없어 고민고민 한 끝에 브릭에 도움을 청합니다. cDNA를 template로 cloning을 하고 있기에.. 동일한 식물에서 total RNA를 추출하였지만 한달전에 추출한 total RNA와 오늘 추출한 total RNA가 같을까요? ㅜㅜ 답답합니다.. 5`-RACE를 쉽게 끝낼 생각은 추호도 하지 않았지만 이렇게 까지 안될줄은 ... 현재 takara 5`-Full Race Core set를 사용하고 있습니다. Total RNA ratio는 260/230 : 1.6정도면 RACE하는데 문제 없을 것으로 보이는데 ㅜㅜ 고수님들의 답변 기다릴꼐요 !!