실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
BL21(DE3)이 깨지지 않아요..ㅠ.ㅠ
BL21 (비회원)
BL21(DE3)에 단백질을 3~4시간 발현시킨 후, 정제하려고 buffer+lysozyme 용액을 넣습니다.
그러면, 일반적으로 cell이 누렇고 걸쭉해 지면서 끈끈하게 변하잖아요.
그런데 언젠가부터 그렇게 되질 않고, 우유같이 하얗게되며 끈끈한 성질도 없어요.
그런 cell을 sonication하면 깨지지를 않고요.
sonication 후 centrifuge하면 바닥에 하얗게 그대로 가라앉아있습니다.
젤 내려보면 발현은 잘 되는것으로 보아 BL21(DE3)가 맞는 것 같은데 contamination이 된건지 뭔지 도저히 모르겠습니다. ㅜ.ㅜ
발현할 것이 한두개가 아닌데 깰 때 이러면 쓸 수가 없어요..
그 하얀 쌜이 꿈에나올까 두렵습니다..ㅠㅠ
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