실험 Q&A Laboratory Animals > Blood
PB MSC culture 질문
레벨1 심수창
저는 이번에 대학원 진학하는 초보 실험 연구원입니다.
현재 mobilized PBMC 에서 MSC culture를 하고 있습니다.
15% FBS, 1%penstrep, DMEM low glucose media를 이용하여 25T에 1 x 10^6/cm2 로 심었습니다. 그랬더니 둥그런 모양의 microphage 형태의 cell 과 fibroblast 형태의 길다란 cell이 자라고 있습니다. subculture 과정에서 microphage 형태는 제거되고 fibroblast 형태의 순수한 msc만
culture된다고 알고 있습니다. 그러나 passage 2 부터 cell 들이 힘 없이 죽어가고 있습니다.
0.25% tripsin EDTA 를 사용하고 있고 tripsin 처리의 문제는 아닌걸로 생각하고 있습니다.
이문제를 해결하기 위해 cell 농도를 낮추기도 해보고 높이기도하고, FBS 농도를 20%로 올려서 culture 하고 있습니다. 현재 이조건으로 배양한지 일주일 정도 지났는데 아직까지는 별 차이가 없어 보입니다. 좀더 지켜봐야 할것으로 보입니다.
PB에서 msc culture 해보신분들께서 어떤 방밥으로 culture 하셨는지 자세한 도움주셨으면 감사하겠습니다. ㅠ
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