실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Southern Blot
세포에 대한 어떤 물질의 cytotoxicity를 알아보려고하는데요
이지영 (비회원)
정말 갑갑합니다.. 제가 사용하는 cell은 suspension cell인 U937 cell과 adherent cell인 MDA-MB231 cell 입니다. test하고자 하는 sample은 particle로서 자체 색을 띄고있습니다. 가만히 놔두면 침전이 되는 흑갈색에 가까운 색을 띄고 있는 particle입니다. (Fe3O4, MnFe2O4) 이 물질의 세포독성을 알아보기 위해.... 제가 CCK-8이라는 cell counting kits-8을 사용하는데요 제가 너무 갑갑해하고 있는 문제는 물질을 처리하고 48hr incubation을 한 뒤 cck-8 solution을 처리하고 적절한 incubation time을 둔 뒤 OD값을 측정하면 고농도로 물질을 처리한 well에서의 OD값이...한없이 솓구쳐올라간다는 거죠... 제 생각엔 고농도로 물질을 처리했을 때 그 물질의 자체의 색때문에 그런거 같은데요 그래서 어떻게 해서든지..cck를 처리한 뒤 그 물질의 영향을 좀 줄인 후에 OD값을 측정해야 할 거같은데.. 그게 만만치가 않네요... 1M NaCl(물질만들어주는 화학과에서 particle을 제거할 때 사용한다고 하더라구요)을 처리한 뒤 원심분리하여 particle을 가라앉힌 후 OD값을 측정하면 문제는 물질을 처리하지 않고 cell만 넣은 positive control의 OD값도 약 1/4로 감소한다는 거죠... 너무 정신없이 내용을 쓴거 같은데요.. 암튼 세포독성을 알아보기 위한 실험에서 처리하는 물질이 그자체에 색이 있을때 어떻게 해야하는지... 조금이라도 아시는 분이 계시다면 관심을 가지고 좀 알려주세요... 너무 갑갑해서 눈물이 날 지경이예요.....ㅠㅠ
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