실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > DNA Modification
dam methylation block이 있는 enzyme 사용 cloning 시
레벨1 Enzyme
제가 가진 plasmid에 BclI을 이용해 cut을 하려고 합니다.
plasmid는 이미 dam methylation이 되어있고
BclI은 dam methylation에 의해 block 당하는 enzyme입니다.
dam negative strain은 가지고 있지 않고 이 plasmid와 enzyme을 이용해서 cut을 하고 싶은데
지금 가진 것만을 이용해서 자를 수 있는 방법이 없을까요
BclI은 T"GATCA 이고 reaction temp.는 50도 입니다.
아 그리고 2cut이 가능한 enzyme site 간의 최소 bp가 얼마 인지 간격이 20bp정도면 2 cut이 가능한지도
알고 싶습니다.
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