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질문 pcr시 band가 너무 끌려요
막내  | 2011.08.31 11:34
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
annealing 온도를 58도에서 했을때 band가 너무 많이떠
60도로 바꿔 봤습니다. band는 없어졌는데 target band 의 amplify가 잘 일어나지 않은 것 같습니다. 너무 얇게 떠서요 그리고 위에 끌리는 현상이 보여
64도로 높여봤습니다. target band가 amplify된 것을 확인 했지만 여전히 위에 끌리는 현상이 있습니다. amplify하고자 하는 band size는 3kb로 annealing 온도를 3분 정도 했습니다.
무슨 방법이 없을 까요?
#1
 
#2
 
#3
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이송골송골  |  2011.08.31   

band 두께가 얇을경우 농도를 조금 높여보세요.

아니면 vol을 두배로 높여보세요.

끌리는 현상은 EP시 버퍼양이 충분하도록 하게 하구서

움직이지 않은 상태로 EP시간은 10여분 정도 더 늘려보세요.

수고하세요.

막내  |  2011.09.01    
annealing을 30초정도로 짧게하고, extention을 3분정도 해보세요 cycle도 늘리고
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