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TA 벡터와 pGEX 벡터는 같은 암피실린 마커를 가지고 있습니다.
그냥 ligation하면 TA 벡터와 pGEX 벡터가 다 나올 수 있습니다.
TA 벡터 클론을 두 효소로 자르고 insert만 분리해서 pGEX에 ligation하는게 맞습니다.
pGEX는 Tac promoter가 있어서 DH5a나 BL21(DE3) 등 아무데나 넣어서 IPTG induction해도 됩니다.
하지만 보통은 BL21(DE3)를 추천합니다.
왜냐하면 BL21(DE3)는 protease mutant라서 발현된 단백의 원치않는 분해를 최소화할 수 있게 디자인된 균주입니다.
하지만 recA positive여서 클로닝 호스트로는 적당하지 않습니다.
클로닝은 DH5a, DH10B, XL1-Blue로,
발현은 BL21(DE3), Rossetta 로.