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지나아빠
(비회원)
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05.10.26 00:00
ligation이 문제라면 ligase test를 먼저 해보세요.
vector와 insert를 넣고 ligation한뒤 Gel run을 하여 vector와 insert band가 사라지고 10kb이상의 큰 크기로 DNA가 끌리던가 ladder 형식이 되던가하면 ligation이 잘된것입니다.만약 그렇지 않다면 ligase의 문제이고요..
glycerol 때문에 ligation이 방해를 받을정도는 아닙니다. 그리고 ligase를 많이 넣는다고해서 ligation이 잘되는것도 아닙니다. 뭐든지 적정량을 넣어서 해주시는것이 좋은 결과를 얻을수 있는 길입니다.
만약 ligase 문제가 아니라면 제한효소의 문제일 가능성이 큽니다.
제한효소도 확인해보시는 것이 필요할 것으로 생각되는군요.