실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
Cell thawing후 viability (2차 질문)
실험자 (비회원)
제가 어제 cell을 thawing후 culture하게 되면 죽는다고 질문을 했는데 제가 몇가지 불분명하게
설명을 한 것 같아 다시 질문을 올립니다.
현재상황 :
1) 50% Media + 40% FBS + 10% DMSO가 포함된 CELL Stock vial을 thawing 후 cuture를 하게 되면 debris들이 생성되며 cell이 죽는 것이 관찰됩니다.
2) Cell을 녹인 뒤 Growth media를 이용하여 2회 washing후 trypan blue를 이용해 cell count를 진행하면 90%의 cell이 살아있는 것이 관찰됩니다.
3) 현재 THP-1 suspension cell이여서 adherent cell 처럼 중간에 media를 교체하는 것이 번거롭지만 다시 한번 media를 바꾸어 주어도 같은 현상이 나타납니다.
*이해가 되지 않는 부분*
1. 왜 thawing 후 90% 살아있는 cell이 불과 몇시간만에 다 죽는 걸까요? (완전궁금)
2. 현재 풀었던 cell이 불과 2~3주 전까지만 해도 thawing 후 이상없이 사용했다는 것입니다.
3. THP-1 CELL을 구매해서 passage별로 stock을 만들었는데 cell이 이상해서 같은 stock box에 있던 passage별로 하나씩 골라서 풀었는데 마찬가지 입니다.
4. Media 문제도 아닌것이 같은 media를 쓰는 다른 cell들은 잘 자랍니다.
도와주세요 ~~~
Bio마켓 프리미엄