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질문 세포 원심분리할때 물로 washing 해도 되나요?
알하늬  | 2006.09.25 08:21
yeast cell을 원심분리하려고 하는데요. 원심분리해서 pellet을 얻은 다음 media를 제거하기 위해 그냥 물로 washing했거든요. 괜찮을까요? 꼭 buffer로 해야하나요?
washing후에 다시 pellet얻어서 -80도에 보관했다가 나중에 buffer넣고 cell disruption할꺼거든요. 그런데 이미 물로 resuspension시켜서 원심분리를 해버렸어요. 지금은 -80도에 두었는데 cell을 다시 키워야 하는지 궁금해서요. 물에서 원심분리가 되는 정도로 단백질이 용출되고 그러나요?

단순한 질문 꼭 답변 부탁드립니다.
#원심분리
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리신두식  |  2006.09.25   
모든 washing과정은 생체 조건인 용액 또는 pH가 7.0-7.4 수준 이라면
무관 합니다.

물론 물도 멸균을 한물을 사용 하셨겠죠?
폐하가 크게 떨어지지 않은 물이 라면, 상관 없습니다.
회전수가 크지 않은 원심 분리에 의해서는 단백질이 용출 돼지 않습니다.
그러나 freezing과 thawing을 반복 하실 경우는, cell membrane이 터져 핵 이외에 있는 단백질들이 용출 될 가능성이 많습니다.
하늬  |  2006.09.25    
감사합니당..
deionized water(멸균된)를 사용했구요. 4도 원심분리에서 했습니다. 3500 g 정도니까 굉장히 mild한 조건에서 했구요.
cell disruption을 여러가지 방법으로 할거라서 물로했는데 하고나니 삼투압으로 인한 영향이 있을까봐 헷갈렸는데,, 이런 단순한 질문은 naver에도 없더군요..
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