실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
어느 회사 제품이건 어떤 방법이건 protein 정량법에는 한계가 있습니다.
그 중 하나가 사용된 buffer의 성분에 영향을 받는다는 것입니다.
Buffer 성분에의해 dye가 영향을 받는 경우는 흡광도가 다르게 나오거나 전혀 측정을 할 수 없습니다.
BioRad사의 Protein Assay Manual을 찾아 보시면 영향을 주는 성분과 농도가 안내되어 있습니다.
0.1 mg/mL 의 오차라면 작다면 작다고 할수 있겠지만..이게 10% error rate 이라면 무시 못합니다;;;
그리고 같은 샘플이라면 원칙상 누가 재더라도 같은 농도가 나오는 것이 원칙이지요..사과 한박스가 100개 들어있는데 누가재면 99개 누가재면 101개..이건 말이 안되니까요.
그리고 궁금한게..Standard curve 의 R^2 값은 얼마가 나오는지요? R^2 값이 두분 다 0.99 이상 나오는데 농도가 다르다면..standard 제작이 잘못 된게 아닐까 합니다..
그리고 파이펫팅도 확인해보세요..보정이 틀려서 오차가 생길수도 있고..팁을 꽂고 나서 볼륨 체크를 안해서 생기는 오차도 크지요..팁을 꽂은 후에 볼륨을 셋팅하세요..팁꽂으면서 미세하게 틀어집니다..
그리고 온도는..물론 중요한 요소이기도 하지만 질문자님의 내용은 그렇게 크게 문제될 것 같은 부분은 아니군요..
같은 스탠다드를 사용하여 두분이 농도를 재보세요..그럼 답은 금방 나오겠지요..