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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 IP를 통해서 Interaction protein.. 고수님 실험조언부탁합니다.
궁큼  | 2010.05.03 00:31
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)

안녕하세요 날씨가 많이 더워졌네요.

IP를 통해서 Interaction protein을 찾으려고 합니다.

SDS-Page를 걸어서 실버 Staining을 통해

Control band와 차이가 나는 band를 Maldi등으로 확인하려고 합니다.

한 lane당 4mg을 걸어도 잘보이지 않고  보이는것은 Control과 동일한

Band만 보이네요..

이런 방법으로 Interaction protein을 찾을수 있을까요?

band로 보려면 엄청난 양의 Interaction protein이 필요할꺼 같은데 말이죠..

실험적 조언 부탁드립니다. 

#Interaction
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
꽃개구리모비딕  |  2010.05.03   
혹시 타겟 단백질은 밴드가 보이는지요.
IP가 되고 있는지를 확인하는 확실한 방법입니다.
이 밴드가 보이지 않는다면 다른 단백질이 딸려 나온들 믿을 수 없겠지요.
타겟은 뚜렷히 보이는데 다른 coIP된 단백질은 없는거 같다면 워낙 미끄덩 한 단백질이라서
interaction하는 단백질을 찾기 쉽지 않을겁니다만..
cross linker 시약을 처리하여 결합을 안정적으로 유지시켜 IP를 하는 방법들도 있습니다.
glutaraldehyde나 DSP를 처리하여 IP를 하는 방식인데 프로토콜은 논문들에 많이 있습니다.
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