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무슨 cell의 primary culture 인지요?
count를 trypan blue 로 하시나요?
이는 cell membrane을 염색하므로 모든 cell을 염색하죠.
viability가 필요없고 counting 만 하신다면 wright''s stain solution을
하나 장만하시죠.
이는 핵을 염색하므로 RBC는 count 되지 않습니다.
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따라쟁이
(비회원)
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05.12.23 00:00
RBC는 세포배양중에 자연스럽게 제거가 됩니다. 2-3일정도 지나면요
근데 프라이머리 컬쳐하면 님께서 말씀하신데로 카운팅하기도 힘들고 지저분하죠
상품명이 정확히 기억이 안나는데요 lympho-prep 같은 gradient를 걸어주는 시약을
사용하세요. 원심돌리면 RBC와 primary culture cell이 분리됩니다.
lympho-prep은 가격이 좀 있으니 다른걸 쓰셔도 되구요. 상품명이 정확히 기억이
안나네요.
제일 중요한건 처음부터 RBC 혼입을 줄이는 겁니다. 정확히 어떤 실험인지는 모르겠지만
컬쳐하시기 전에 PBS등으로 perfusion 하시고 장기등을 적출하세요.
도움되시길 빌겠습니다. 제일 중요한것은 RBC 혼입보다 박테리아 오염이죠..
아니면 윗 분 말씀대로 장기를 떼어내기전에 perfusion 해도 좋구요~ ^^