실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
insert와 vector의 크기가 비슷한 경우의 cloning
레벨5 sean
insert와 vector의 크기가 비슷한 경우 insert를 vector에 넣을 때는 문제 없겠는데,
그 insert를 제한효소로 떼서 다시 다른 vector에 cloning 해야할 때요.
gel purification을 해야 될텐데 밴드가 구분 안 될 정도로 크기가 비슷하면 gel 상에서 겹쳐 보이므로 insert만 purify 못 하잖아요.
그럼 이런 경우 애초에 (insert랑 크기가 비슷한) 그 vector가 아닌 다른 vector에 cloning 했어야 하는 건가요?
2.9kb의 insert를 2.7kb의 vector에 넣었는데 gel purify 하다보니 밴드가 겹치는 건 아니었는데
insert를 자르려다 보니 밑의 vector에 해당하는 밴드도 약간 자르게 되더라구요.
다행히 purify 결과물을 전기영동해보니 단일 밴드가 나왔지만요.
그래서 위의 의문이 들었습니다.
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