실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
[급] PCR 질문입니다.
PCR 초보 (비회원)
PCR product를 gel extraction 하기 전 전기영동시켰을 때, 원하는 size는 나오지 않고 오히려 그보다 훨씬 더 큰 size의 밴드만 보이네요. PCR뜬 것은 rat의 STAT6이고, size는 359bp (northern probe용), primer는 upper 21mer, lower 19mer짜리를 사용했습니다. 처음에는 primer 부분 외에는 band가 보이지 않아서 annealing temp.를 계속 낮추어보았습니다. 대략 50도까지... 그러다 annealing temp를 50도로 설정하여 PCR을 수행한 결과 750bp 정도에서 band가 보이는데 그 이유를 도무지 알 수 없네요. 이럴 경우 어떤 원인이 있을 수 있으며, 해결 방법에는 어떤 것이 있을 수 있는지 조언 부탁드립니다.
Bio마켓 프리미엄