실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
제 생각은 스크래퍼 사용에 문제가 있는 것 같습니다
물론 사용해서 안될 것을 사용했다라는 것이 아니고요
지나치게 물리적으로 셀을 떼내다 보면 셀자체가 무너지더라고요
저 같은 경우 부드러운 고무가 달린 스크랩퍼(빗자루모양)를 이용하거나 아니면 귀찮더라도 트립신을 이용해요 근데 트립신 같은 경우도 다른 사람들은 Raw cell 을 activation시킨다니 다 관점의 차이인것 같네요...
-
나도그랬음
(비회원)
-
09.12.30 12:53
저는 PBS로 두번 washing을 했구요..
물로 스크래퍼로 뗐습니다. 그렇게 힘이 들어가지 않는 한은 스크래퍼 문제는 아닐 것 같구요
매우 작고 검은 debris들이 떠 다닌다고 하셨는데...
제 생각엔 셀 잔해라고 보기보다는 다른 오염 원인이 아닐지요.
혹시 현미경 보실때 다른 거에 비해서 시야가 어둡진 않던가요??
전 그런거에 오염됐을때 좀 그런 느낌을 받았는데....
그 debris들을 확대해서 한번 봐 보세요..
우선 답변 감사드립니다.
시야가 좀 어두워지기는 했는데요
처음 계대했을 때 cell의 모양은 동글동글한 모양이었다가
어느정도 plate에 찼을때 계대를 하면
바닥에 붙어자라기는 하는데 먼가에 영향을 받았는지
가지가 쳐지고 분화된 모습으로 변하면서
debris들이 떠다니고요
이 상태에서 한번 더 cell을 띁어서 계대배양하면
대부분이 붙지 못하고 떠있는 상태에요 ㅠㅠ
scraper로 엄청 조심스럽게 긁어서 cell을 띁어내도 마찬가지고요..
incubator에 있는 다른 plate에 cell line들은 전혀 문제가 없는데
유독 제 raw cell만 이러니....왜이럴까요 ㅠㅠ
새 stock을 깨서 다시 시작하면 되지만
몇번을 이렇게 반복하다 보니
cell만 버릴것 같아서 쉽게 하지도 못하겠구요 ㅠㅠ
먼가 해결책이 없을까요??????
실험이 진행이 안되서 많이 답답하네요 ㅠㅠ
저도 지금 님과 같은 상황입니다ㅜㅜ culture가 제대로 안되다보니, 실험을 진행할 수조차없네요..혹시 어떻게 해결하셨는지 여쭤봐도 될까요?