실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Pull-down Assays
Biotin-antibody와 streptavidin resin에 대해서 여쭤봅니다_정말 급한 질문이라 좋은 답변 부탁드립니다.
윤지혜 (비회원)
abcam 사의 ab1227 biotin-primary antibody를 사용하고 있습니다.
streptavidin resin을 이용하여 biotinylated peptide를 붙이고, 새로 구입한 biotin-primary antibody가 제 peptide를 잘 detect 하는지 확인하기 위해 WB을 해보았습니다.
WB후하나의 밴드는 확인하였는데. size가 정확하지 않아 내가 원하던 peptide가 잘 detect이 된것인지 의심스럽습니다.
pull down시 elution을 하지 않고 그냥 resin채로 끓여서 PAGE 에 loading했는데. 혹시 이런경우 resin에 붙어있던 streptavidin이 떨어져 나와 biotin -primary antibody가 WB 상에서 이를detect할수있는걸까요??
biotin-antibody가 specific하게 biotin만 인식을 하는거라면 저의 peptide를 잘 인식한거라 사료되지만.. 만약 streptavidin과 binding 하여 signal이 detect이 될 가능성은 없는걸까요??
실험을 해놓고도 원리를 잘 몰라서....헷갈리고...걱정되고 그렇습니다.
제발 알려주세요
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