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 전체 > Chemical biology > Analysis
조회 7742  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Peptide의 FITC labeling
실험자  | 2009.10.07 12:19
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
안녕하세요,

Peptide의 FITC labeling 실험을 하려고 합니다.

Protein에 FITC 붙이는 건 해본 적이 있지만 peptide는 처음이라서요.

Peptide labeling은 protocol이 다른지 질문 드립니다.

그리고 protein의 경우 desalting column으로 정제를 했는데 peptide의 경우는 reaction 후 정제 과정이 어떤지 궁금합니다.

혹시 HPLC를 써야 한다면 다른 방법은 없을까요?

그럼 답변 부탁드립니다.
#peptide
 
#FITC
 
#labeling
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리엘피스  |  2009.10.08   
Protein을 polypeptide라고 합니다. 따라서 peptide나 protein이나 방법은 같습니다.
실험자  |  2009.10.08    
네, 그건 저도 아는데요.

reaction이 문제가 없다면 peptide의 경우 size가 1kDa 정도이기 때문에 reaction 후 buffer change는 어떻게 해야 할까요

Desalting column을 이용한 정제나 dialysis 등이 안 될 것 같은데 HPLC로 정제를 해야 하는 것인지 해서요.
대왕개구리엘피스  |  2009.10.08   
1kDa 정도라면 아주 작은 크기인데.... 그런 뜻도 모르고 죄송합니다.

FITC의 분자량이 400정도되고 conjugated peptide가 1000+400정도되므로 sephadex G10 정도의 bead로 gel filtration을 하면 분리가 가능할 겁니다. HPLC가 아닌 그냥 일반적인 column을 사용하더라도 portable UV 를 사용하시면 column에서 쉽게 free dye와 conjugated peptide의 band를 확인하면 정제를 할 수 있을 겁니다. Buffer chage를 할 수 있는 방법이 없으므로 mobile phase의 solution을 최종 storage buffer로 생각하시고 실험을 하셔야 할 듯 합니다. 
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