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인포데믹이 질병 연구에 미치는 영향
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Q. 유산균 MRS 액체배양 결과 이게 무엇인지 모르겠어요 ㅠㅠ 첨부파일
자일리톨 5% 용액 3ml와 MRS 27ml를 넣고 2일정도 배양했는데, 밑에 가라앉은 세균이 있고 위에 이상하게 떠 있는 무언가가 있어요... 이게 뭔지 모르겠어요 ㅠㅠ 몸에 해로운 건 아닐까 걱정돼요. 이건 왜 들어온 걸까요?
회원작성글 계절  |  05.21
Q. EGFP랑 antibiotics resistance gene이 같은 promoter에 있어도 되나요?
박사과정으로 현재 ipsc에 electropolation 해서 gene editing 중입니다. 그런데 제가 가지고 있는 plasmid dna에 EGFP와 antibiotics resistance gene이 PGK promoter 하나로 묶여있는데 transfection 할 때마다 EGFP가 너무 약하게 나옵니다. 그래서 혹시 같은 promoter에 있어서 그런데 아닐까 싶은데 선배님들은 어떻게 생각하시나요?
회원작성글 기웃기웃  |  05.21
Q. Agilent HPLC pressure 문제 질문드려요
안녕하세요. 현재 랩에서 쓰는 HPLC 장비가 Agilent 사의 1260 infinity 11 LC system 인데요, 랩이 한번 셧다운되서 3달 정도 운용을 안하다가 장비를 켰는데, 아무리 퍼지를 해도 pump pressure가 0.1bar 이상 올라가지 않습니다. (Ripple 은 -99~20%를 왔다갔다해요. 근데 이게 어떤걸 의미하는지 잘 모르겠습니다.) 컬럼은 제거한 상태구요, 혹시나 해서 용매(클로로포름) 새로 갈아주고, 퍼지 밸브 교체하고, 펌프 내부의 피스톤 관련 소모품도 새거로 갈아주면서 펌프 세척도 다 했구요. 그렇게 3ml/min 으로 하루 이상 퍼지 했는데도 펌프의 outlet이나 waste라인으로 아무것도 나오지 않아요. 제 생각으로는 펌프 내에 용매가 비어있는 것 같은데.. 이 경우 어떻게 해야할까요..? 정말 골치아픕니다...도와주세요 ..  
회원작성글 레졸루션  |  05.21
Q. Primer design 관련 질문 부탁드립니다. 첨부파일
안녕하세요 이번에 gene work 새로 시작하려고, primer design을 하게 되었는데요 제가 사용하려는 벡터(pSEVA321)의 MCS에 promoter가 없어서 클로닝 할 때 forward primer의 앞부분에 Promoter sequence(tac promoter, 29bp)까지 넣어주고자 하였습니다.   추가로 restriction enzyme site, meaningless sequence 등등을 감안하니 약 70bp정도의 forward primer가 나오게 되었습니다. 보통 primer 사용할 때 30bp 미만만 사용해봤는데, 이렇게 긴 primer도 사용할 때 문제가 되지 않으려나요...? 추가로, reverse primer의 길이는 약 30bp 나올듯 한데 forward, reverse 간의 길이 차 또한 걱정되는 부분입니다. 일단 제가 짠 프라이머의 gene 부분 서열은 Forward 5'-gtaaacggcggtaaggcgt-3' Reverse 5'-ctactcttccatcgcctggc-3' 이고 GC contents는 각각 58, 61% 및 Tm은 61도씨로 동일합니다. 관련하여 파일까지 추가로 첨부하였습니다. 경험 많으신 선배 연구원님들의 조언 부탁드립니다. 감사합니다.
회원작성글 호기심천국1  |  05.21
Q. Plate 배양중 파라필름 찢어짐
Agar plate 에 균 접종하고 파라필름으로 실링해서 배양기 안에 넣어둿는데 , 이틀 지나서 확인하니 실링한 부분이 찢어져서 틈이 생겼어요 ㅠ 컨탐 났을까요..? 아니면 괜찮을까요 ㅠㅠ?
회원작성글 wowsparrow  |  05.20
Q. knockdown vector의 ftz intron 기능 문의
안녕하세요. 초파리 모델을 이용해 RNAi knockdown하기 위해 vector를 살펴보는 중인데요. knockdown vector들에 공통적으로 ftz intron이 포함되어 있고, silencing을 더 잘 되도록 하기 위해 포함시켰다고 하는데, 왜 ftz intron이 그런 기능을 하나요? 여러 논문을 찾아봤는데 splicing과 관련된듯 싶은데,,    정확히 이해가 되지 않습니다 ㅠㅠ
회원작성글 bioer  |  05.20
Q. 크리스탈 바이올렛 손에 묻었을때
학교에서 그람 염색을 진행하다 스포이드에서 크리스탈 바이올렛이 흘러 손에 묻었습니다. 30초정도 흐르는 물에 씻고 에탄올로 대충 닦았고, 뒷정리하느라 30분 정도 지나서야 비누랑 흐르는 물에 빡빡 씻었습니다.  지금 보니 묻자마자 문질러 닦았던 데는 색이 빠졌는데, 오늘 내내 틈날때마다 닦았는데도 다른 곳은 아직 파란색이 좀 남아 있네요. 찾아보니 크리스탈 바이올렛이 유해성이 있는거같은데... 괜찮을까요?ㅜㅜ 이런 염색약이 손에 묻었을 때는 어떻게 해야 하나요?
회원작성글 euns1216  |  05.20
Q. 항균실험에서 대장균 사용
고등학교 항균실험을 진행할때 대장균을 이용하여 항균실험을 진행하려고 하는데 대장균을 이용해 실험했을때 그 결과가 다른 균에 항균성을 증명해주는 지표로 볼수도 있는건지 궁금합니다.
회원작성글 훈훈한지  |  05.20
Q. PCR cycle의 기준이 뭘까요..
RT-PCR에 동일한 gene에 대해서 (실험과정상 꼭 나와야하는 gene임에도 밴드가 도무지 나오지 않아서) 동일한 프라이머를 몇개 더 짜서 돌렸습니다. 해봤더니 5가지 디자인의 프라이머 중에 둘 내지 셋 (밴드가 희미해서 확실하진 않음) 정도에서 아주 희미할 정도로 옅은 밴드가 각각의 product size에 정확하게 걸리네요. 우선은 동일한 Tm으로 진행했는데, Tm이 안맞을 수 있으니 그래디언트를 해봐야 알겠지만.. 여기서 더 사이클을 늘려보는 것은 무의미한지요?   보통은 30-35 cycle 정도를 돌리는 걸로 그저 그렇게만 배워서 알고 있는데, 35사이클이라면 이론적으로는 2^35배(=약 340억배)라는 어마어마한 배수가 나오잖아요. 좀 반골기질의 생각이긴 합니다만 문득 35사이클에서 나오는 건 의미가 있고, 40사이클째(약 1조배)에 나오는 건 의미가 없는 걸까 하는 생각이 들어서요. 5번 정도 더 돌리면 원하는 세기의 밴드야 나오겠지만.. 틀린 걸 맞다고 할 수 없는 법이니, 된다면 왜 되는지, 안된다면 왜 안되는지 기준이 궁금한지라 순수한 의문에서 질문을 올려봅니다. 고견 부탁드립니다.
회원작성글 Crufus  |  05.20
Q. NO production assay 전문가님 질문드립니다
할때마다 control 값이랑 lps친 값이랑 NO 생산량이 다르게 나오는데 이유를 아시는분 계실까요? 흡광도를 standard 대입하여 나온 NO농도 값이 어쩔때는 control이 1 uM 어쩔때는 4 uM 이렇게 나오고, lps 처리군도 어쩔땐 2배 어쩔땐 5배 이렇게 나와서요. 똑같이 2만 cell/well로 깔았고 lps는 100ng/ml 로 처리하였고 Raw cell은 passage 13으로 사용하였습니다.  
회원작성글 줄  |  05.20
Q. fibrinogen과 thrombin
fibrinogen과 thrombin을 섞어서 혈액 응고 실험을 진행 해도 될까요? 만약 실험을 진행할때 비율은 임의로 수정해도 될까요?
회원작성글 하느을  |  05.20
Q. image J intensity 측정
안녕하세요. image J 로 형광 intensity 측정하는 법 질문드립니다 brain 조직 IF stain 하여 같은 면적의 cell intensity를 측정하려고 합니다. 조언 부탁드려요 
회원작성글 초보자입니당  |  05.20
Q. 유기용매
유기용매로 물질 추출후 날려서 최종 resuspension용액을 50% meoh로 사용하는 논문을 많이 봤는데 혹시 100% meoh이 아닌 50%로 resuspension을하는 이유가 있는 걸까요..?
회원작성글 ziw  |  05.20
Q. 전기영동이 아에 안돼요...
전기영동을 하는데 아에 Ladder 조차도 안나와요.. well에 넣을때 뭔가 착 하고 들어가는 느낌이아니라 공중분해되는 느낌이 있는데 왜 그런거죠?   1% agarose 겔이고요 (안에 stain dye 넣었습니다.. 겔만들 때) x50 TAE buffer -> x1 TAE buffer 로 만들었구요.. (증류수 490ml에 TAE 10ml) 50v 로 했습니다..   아니 어제는 할 때는 됐는데 갑자기 오늘 하니까 안되네요.. 다 똑같은데.. 그냥 젤에 아무 것도 안나와요 그냥 젤이 깨끗해요   뭐가 문제일까요.... 
회원작성글 연딩이  |  05.20
Q. 그람음성균의 T3SS의 ExoT antibody 사용하시는 분이 계실까요?
안녕하세요. 제목과 같이 그람음성균의 Secretion system 중 type3를 통해 분비되는 ExotoxinT [ExoT]의 Antibody를 사용하시거나 구매를 하신 경험이 있다면 어디서 구매를 하셨는지 여쭤보고 싶어 글을 남기게 되었습니다.   또는 관련 정보를 아시는 부분이 있다면 알려주신다면 정말 감사드리겠습니다 ^^!  
회원작성글 도도형  |  05.20
Q. 배지 사용기간
PCA, PDA, DCLA배지를  petridish에 분주하여 굳힌 뒤 테프론시트지를 붙여 무균작업대에 보관하려고하는데 이렇게 보관하면 사용기간이 어느정도 될까요?? 냉장보관하면 오래사용한다고하는데 냉장고 자리가 여유가없고 배지에 수분이 생겨 오염이 있을것같아 냉장보관은 피하고싶습니다. 
회원작성글 시데  |  05.20
Q. Clsm 을 이용해서 세균을 관찰하려고 하는데요
저는 그냥 제조사 매뉴얼을 참고해서 미리 만들어둔 세균현탁액을 live/dead kit로 염색한 뒤, 염색한 현탁액 한 방울을 슬라이드 글라스에 떨어뜨려서 커버슬립으로 덮고 관찰하려고 했는데.. 혹시 세포 고정단계를 거치지않으면 이미지 획득하기가 어려울까요?ㅠ 고정용액이나 confocal dish를 급하게 구매하기가 쉽지않아서요..ㅠㅠ
회원작성글 세균맘  |  05.20
Q. Vivaspin 6 PES , 1,000,000 MWCO
안녕하세요, 서울시립대학원 석사과정 3학기 대학원생입니다.   제가 lipid based formulations의 emulsifier surface laode를 Vivaspin 6 PES , 1,000,000 MWCO 을 이용하여 측정하려고합니다. 시약상에 여쭤보았는데 국내 재고가 없다고하여 구할 수가 없습니다. 혹시 가지고 계신 선배님이나 실험실이 있다면 제게 판매하거나 보내주실 수 있으십니까? gktlskdh@naver.com으로 연락 부탁드립니다. 감사합니다. 
회원작성글 doxxx  |  05.20
Q. 개미산암모늄 용액(ammonium formate) 냉동해도 되나요?
안녕하세요 LC/MS  이동상에 쓰는 용액에 대해 질문드려요 1리터 증류수에 10M ammonium formate 용액 0.5ml 을 첨가해서 쓰고 있어요 오염이 걱정돼서  10M ammonium formate 를 여러개로 엘리컷해서 냉동보관하여 한개씩 빼쓰려고 하는데, 냉동보관하면 문제 되는게 없는지 여쭤봅니다.      
회원작성글 착한사람  |  05.20
Q. pro-prep 사용해서 protein extraction할 때 pellet
pro-prep을 이용해서 cell에서 protein extraction하고 있습니다.   cell pellet을 pro-prep에 resuspension 후 -20C에서 30분 인큐베이션하고, 13000rpm 4C 5min centrifuge 하고 sup만 따내서 냉동에 보관하면 된다고 알고있습니다.   그런데 마지막 단계에서 centrifuge 한 후 pellet이 따로 보이지않습니다. 그래서 그냥 etube 맨 아랫부분에 팁 안 닿게해서 sup만 따내는데... 괜찮은가요?   nano drop 찍어보면 protein 양도 괜찮고 260/280 값도 1.5 이하로 괜찮은 것 같습니다. centrifuge시간을 10분까지 늘려봤는데도 pellet이 분리되진않네요.. 괜찮은가요?
회원작성글 마리포사  |  05.20
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