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Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
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Q. [질문] 생명체에 L형 단백질만이 존재하는 이유에 관하여
안녕하세요 고3 학생입니다 지구과학 공부를 하다가 의문이 생겨 남깁니다. 중성자별이 편광된 전자기파를 방사하여 아미노산 합성 확률이 변화되고 우연히 중성자별의 위쪽을 통과한 운석이 지구에 집중되어 L형이 더 많이 존재하게 되었다는 내용에 대해 알 수 있었습니다. 그런데 이 사실과 RNA의 입체 선택성은 무슨 연간이 있길래 L형 단백질만 존재하는데 영향을 미친 것인가요? 지구에 L형이 D형보다 많을 이유가 없이 존재하기만 했었어도 RNA의 입체선택성에 의해 생물체에 L형 단백질만 존재할 수 있다고 생각하는데, 왜 초기의 중성자별에 관한 내용이 전제되어야하는지 모르겠습니다 짧은 지식 죄송합니다 ㅠㅠ 답변 부탁드립니다!!
회원작성글 라그랑지안  |  07.03
Q. 계산 질문 첨부파일
여기서 0.223mM 이랑 mg/l 이랑 같다고 표시한 이유가 궁금합니다…
회원작성글 Roui  |  07.02
Q. 제가 분주하는 방법이 잘못된건가요?
일반적인 피펫 사용할때(피펫을 1회만 사용)는 '1 step 흡입 → 2 step 배출' 식으로 진행하고 같은 용액을 여러 tube에 분주할 때나 한 tube에 여러번 넣어줄 때 용액오차를 줄이고자 '2 step 흡입 → 1 step 배출 → 1 step 흡입 → 1 step 배출' 이런식으로 진행했었는데 이런 피펫팅 방법이 잘못된 방법인가요? 피펫 내부를 항상 2 step으로 딴 용액이 적셔놔서? 1 step 분량이 문제없이 들어왔다 나간다라고 배웠었거든요.. real-time PCR을 할때 Ct값을 보면 항상 일정 범위내에 수치가 들어와서 문제없다고 느끼고 있었는데 항원항체 실험을 하는데 이게 잘못된 방법이라고 들어서 고치려고 합니다. 잘못되었다면 예를 들어, 500ul 용량을 20번 옮긴다고 했을때 1 step 흡입, 1 step 배출을 19번 해주고 나머지 1번은 1 step 흡입하고 2 step 배출로 빼줘야할까요? 아니면 무조건 1 step 흡입, 2 step 배출일까요?? 그리고, 피펫팅 오차를 줄일려고 용액을 저울로 확인할때 CV값의 기준이 어느정도 일까요?
회원작성글 JHG22  |  07.02
Q. 제약 미생물 관련서류
안녕하세요 미생물 담당으로입사했는데 아무것도 안되있는거같아서..서류좀 챙겨볼려구요 꼭작성보관해야하는 일지나기록서좀 알고계신대로 알려주세요 예를들면 배지성능시험, 멸균기사용일지, 배양기 온도기록서등등 부탁드려요
회원작성글 빠다  |  07.02
Q. co-IP시 넣는 antibody의 양 첨부파일
안녕하세요, co-IP 실험을 한지 얼마 되지 않은 대학원생입니다. 질문드리려는 내용이 너무 기초적인 내용인 것 같아 스스로도 부끄럽지만 protocol을 봐도 혼란스러워 질문 드립니다... co-IP 시 넣어야 하는 normal IgG의 양과 IP에 사용하는 antibody의 양은 동일해야 하나요, 아니면 protein 양에 대한 비율만 맞으면 되나요? 저는 cell lysate를 600ug으로 잡는데 이를 만약 2:1의 비율로 나누어 400ug에는 IP할 antibody 2ug을, 200ug에는 IgG antibody를 넣고 싶다면 이 때 들어가는 IgG의 양은 1ug이 맞을까요? 그리고 이렇게 2:1로 실험해도... 되나요? 만약 heavy chain이 detection 된다면 두께도 2:1이 되니 이렇게 해서는 안되는 건가요? 그렇다면 cell lysate를 1:1로 나누어 진행하면 될텐데 300ug의 protein에 대해 IP antibody와 IgG antibody에 각각 2ug 정도로 같은 양의 antibody를 넣어야 하나요?   답변 부탁드립니다....
회원작성글 릴미  |  07.01
Q. bEnd.3 cell culture시 cell이 잘 안떨어져요
bEnd.3 cell을 계대하는중인데 0.25% T/E 처리 후 incubator에 5분정도 두어도 잘 떨어지지 않아서 pipetting으로 떨어뜨린 후 확인해보면 cell이 70%는 터져있더라고요 ..    이런 경우에는 어떻게 해야 cell이 잘 떨어지나요?? T/E 처리량을 늘려도 괜찮은지 아니면 incubation 시간은 몇분까지 늘려도 될까요 ??
회원작성글 영구씌  |  07.01
Q. PBMC를 RBC lysis하고싶은데 비율을 모르겠어요
현재 Sigma사 RBC lysis buffer가 있습니다. Whole blood에서 PBMC 분리 후 섞여있는 RBC를 제거하고 싶어서 쓰려는건데요. (유난히 용혈이 많이 되어 rbc가 많이 섞임)  프로토콜에는 whole blood 기준만 써져있어서 PBMC에 쓰려면 얼마를 써야하는지를 모르겠어요. 답변부탁드립니다.
회원작성글 윤버찌  |  07.01
Q. Realtime PCR 할때 DNA purity가 좋으면 무조건 증폭이 잘되나요?
Realtime PCR 할때 Control은 잘 나오는데 실험대상 DNA purity는 괜찮았는데 증폭결과가 안좋게 나올수가 있나요?  
회원작성글 으노짱  |  07.01
Q. 미생물 배양 관련 책 추천
  미생물 배양 관련 책 추천 부탁드립니다. 정말 기초적인 실험법부터 나와있는 책이 있을까요? 실험실에서 유산균이나 바실러스 배양할 때 어떤 실험기구를 쓰는지, 통상적으로 몇 도에서 얼마나 배양하는지, 균주의 특성부터 포자형성방법, 보관법 등 기초적인 내용이 자세하게 나와있는 책이 없을까요? 논문이나 이런걸 찾아봐도 정작 기초적인 부분은 찾기 힘든 것 같아서요. 제가 하고 있는 방법이 맞는건지, 잘 하고있는건지 확인을 좀 해보고 싶은데 물어볼 사람도 없고 정확한 내용을 아는 사람도 없고 너무 답답해서요..ㅠㅠ 답변 부탁드립니다..!!!!!!  
회원작성글 므므므므므  |  07.01
Q. Nucleolin 단백질 농도 문제!
안녕하세요! 제가 Abcam 회사에서 Nucleolin(0.5ug/ul) (Ab241527)을 주문하고 사용해봤습니다! 저는 평소에 단백질 gel을 내릴 때 (bis-tris 4-12% gel) 500ng정도의 protein을 내리고 coomassie blue staining G250 (4h정도&washing)을 합니다. 평소처럼 0.5ug/ul 농도 1ul Nucleolin을 내렸는데 사진과 같이 Nucleolin의 band intensity가 너무 작아서, 농도를 직접 측정해보니(E1%, spectrophotometer이용) 오히려 측정된 농도가 5ug/ul의 값이 나오더군요. 이상해서 다른 reference protein sample로 농도를 측정해보니 잘 맞았습니다..   저는 아무리 생각해도 이해가 잘 안되는데, 혹시 어디서 문제가 생길 수 있는지 선생님들의 의견을 여쭤보고 싶습니다.  
회원작성글 공부하자공부  |  07.01
Q. 헬라 셀에 뭔가 떠다니는데 정체가 뭘까요?
안녕하세요. 헬라 셀에 트랜스펙션 후 미디어 교체한 상태로 하루 지난 상태인데 빨간 덩어리랑 길쭉하고 꼬불거리는 것이 보입니다. 배지는 15% FBS (헬라셀이 너무 느리게 자라서), DMEM이고 0.22 um filter로 걸러서 사용 중입니다. 필터까지 했는데도 저러면 항생제를 추가해야할까요? 트랜스펙션할때는 항생제 없는 배지 쓰라고 해서 없이 진행했는데, 트랜스펙션 후 처음 갈아줄때부터 항생제 넣어도 될까요?  
회원작성글 컬쳐룸도비  |  07.01
Q. HPLC-RID 분석
시료를 기계로 분석하여 나온 glycerol, glucose, ethanol pick의 값들을 g/L로 정량수치로 바꾸고 싶은데 공식이라던가 계산법이 있을까요?
회원작성글 인턴임다  |  07.01
Q. RepeatMakser를 실행하고난 결과인데 simple repeats와 low complexity가 0으로 나옵니다. 첨부파일
안녕하세요! 제가 RepeatMasker 예제파일 (test.fasta)을 가동시켰는데   예제에서는 Simple reprats와 Low complexity가 24210(1.84%), 4140(0.41%)로 측정이 되는데 제가 RepeatMasker 실행시켰을 때는 다른 것은 정상적으로 검 출이 되는데 simple repeats와 Low complexity가 0으로 나옵니다.   혹시 어떤 것 때문에 이러한 문제가 발생하는지 아시는 분 계실까요?
회원작성글 JJUUHH  |  07.01
Q. 0.5% amyloglucosidase
고수님들. 제가 Amyloglucosidase from Rhizopus sp.를 사용하여 amyloglucosidase 수용액을 만들었는데 이것이 남아서 냉동고에 보관을 하였습니다. 원래 Amyloglucosidase from Rhizopus sp.는 냉동 보관입니다. 그렇다면 남은 수용액을 어떻게 녹여 다시 사용할 수 있을까요? 얼음에 넣어두었다 녹기를 기다려야대나요? 아니면 냉장고에 넣어서 해동시켜야 하나요?
회원작성글 applebanan..  |  07.01
Q. HepG2 산화적 스트레스 처리중 질문이 있습니다.
안녕하세요, HepG2 cell에서 산화적 스트레스를 보기위해 porotocol을 setting중에 있습니다. 혹시 방법이 맞는지 확인하기위해서는 positive control을 뭘로 진행해봐야 믿을수 있을까요?(논문 검색했을 때는 나오지 않아서요.,)    * 참고로 protocol은 논문들을 참고해서 아래의 순서대로 진행했습니다.     1. 24well에 5X104 seeding 48hr     2. 시료처리 24hr     3. 2.5mM SNP(sodium nitroprusside) 처리       (농도별로 진행 후 농도를 선택) 24hr     4. MTT assay(생존율을 측정)  * ascorbic acid로 세포독성 진행 후 독성이 없는 농도로 진행했었는데..     결과가 SNP만처리한군과 SNP+시료 처리군과 별반 차이를 보이지 않아서요.. 이제는 방법, SNP 농도, 처리시간 등 모든것이 의심스럽습니다ㅠ. 도와주세요ㅠ.
회원작성글 뭉뭉ㅋㅋ  |  07.01
Q. 탱크에 액체속 미생물 분포
몇톤짜리 탱크에 음료를 배합하고 그 배합액으로 음료를 생산을 합니다 1분당 몇만개의 제품이 나오는데 2시간에 1개씩 음료 100ml를 여과실험을 합니다.  의문인 것은 일정하게 균이 뜨는게 아니라 산발적으로 1시에 떴으면 6시에 뜨고 다음엔 12시에 뜨고 이런식입니다.  이런이유는 탱크에 균이 산발적으로 어느부분은 있고 없고 해서 그런건가요??
회원작성글 시데  |  07.01
Q. TLC 조건
안녕하세요 TLC를 처음 해보는데요 무슨 조건들이 있는지 알수있을까요?
회원작성글 인턴임다  |  07.01
Q. Cell cycle에 관한 질문이 있습니다 ㅎㅎ 첨부파일
안녕하세요 7월의 첫 글이네요 질문이 있어 들렀습니다!!   어제 Cell stock를 만들던 도중 든 생각인데 1. Stock은 cell cycle중 어느 phase일 때 만들어야 하는건가요? log phase인가요 stationary phase인가요??.. 2. 만약 어느 bacteria가 16시간이 지나면 death phase에 진입한다고 알려져 있다면 한다면 10ml liquid medium에 single colony를 접종하고 1L liquid medium에 single colony를 접종했다면 전자가 영양성분들이 더 빨리 소실될테니 후자보다 훨씬 빨리 death phase에 진입할 것 이라는 제 생각이 맞을까요?? (쓰다가 생각해보니 이건 제가 직접 실험해봐도 재밌을 것 같네요!! OD600값을 재서 cell cycle중 어느 단계인지 알 수 있겠군요) 3. 만약 훨씬 많은 volume의 media에서 incubation하여 영양성분들이 소실 될 걱정이 없다면 death phase에 진입하는데 막 며칠이 걸리고 그럴 수 있는 건가요..?? 간단하고 어이없을 질문일거 같은데 ㅜㅜ 아직 정말 많이 부족한 석사 1학기 생이라서,, 너무 궁금해서 못 참고 질문을 올려봅니다 ㅜㅜ  
회원작성글 하남시보안관  |  07.01
Q. 논문에 관한 질문 입니다.
산사의 항균활성에 대한 논문을 찾아보던 중 물질 준비에 대한 의문을 갖게 되어 여러 번 서치해보다 질문 남깁니다. 산사과 추출물을 실험에 사용 시 왜 농축 조추출물 그대로 사용하지 않고, 동결건조 과정을 한 번 더 거치는지 궁금합니다. 
회원작성글 jjyaman  |  06.30
Q. Phosphate buffer solution 제조 궁금합니다! 도와주세요!
Phosphate buffer solution pH 8.0을 만들어야 합니다!   그런데 KH2PO4와 K2HPO4를 섞어도 Phosphate buffer가 되고 KH2PO4와 Na2HPO4를 섞어도 Phosphate buffer가 되는건가요??? 궁금합니다!!
회원작성글 요호레이  |  06.30
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