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Q. 액체질소통에 스탁보관 질문드립니다
한 액체질소통 에 동물세포 스탁들과 박테리아 스탁들을 같이 보관해도 될까요? 의견 부탁드립니다
회원작성글 vincero78  |  09.27
Q. 악취 제거 방안으로 제시한, '수분활성도' 설명 부탁드립니다.
항상, 어른분들이 작성하신 수준 높은 글을 읽고만 있던 고등학생입니다.  다름이 아니라, 제가 궁금한 사실을 딱히 해결할 곳이 없어 이렇게 글을 써봅니다.. 음식물 쓰레기 악취의 주범이 음식물 쓰레기 속 수분이라는 사실을 바탕으로 악취가 수분으로 인한 부패 즉, 산화 과정에 의해서라는 것을 알게 되었습니다.  그렇다면, 저희가 요리에서 사용하는 '수분 활성도'라는 개념을 활용해서, 소금과 같은 가소제를 활용한다면, 음식물 속의 수분 함량이 줄어들어 부패가 줄어들 것이라는 아이디어를 생각해봤는데,, 과학적인 오류가 없을까요??  솔직히 수분은 쥐어 짜내는 시중 음식물 쓰레기 처리제가 물론 더 효과적이긴 하겠지만,, 그로 인한 전기 사용 등의 상황을 고려했을 때 가소제 사용도 효과적이지 않을까 싶다는 생각이 들었습니다.    혹 과학적인 오류 있으면 꼭 지적해주십시오! 항상 감사합니다   
회원작성글 양념쥐  |  09.27
Q. RNA extraction
안녕하세요. 석사 과정 진행 중인 대학원생입니다. 실험실에서 mouse lung을 채취하여 RNA extraction을 진행하는데 문제가 있어 문의를 남기게 되었습니다. 몇 달째 항상 RNA extraction할 때마다 pellet이 비특이적으로 관찰되지 않습니다. 군차이로 인해 pellet이 안보이는 것도 아니고, 어떤 샘플에서는 나타나고 어떤 샘플에서는 나타나지 않고 너무 비특이적입니다. 실험실에 있는 protocol대로 RNA extraction을 진행하였고, 실험방에 있는 모든 선생님들이 그 protocol대로 RNA를 뽑습니다. 따라서, protocol에는 문제가 없습니다. 시약 문제라기에는 실험방에 있는 모두가 같은 시약을 쓰고, aliquot해서 사용하는 것이라면 다 새로 aliquot하여 사용했습니다. 따라서, 시약에는 문제가 없는 것 같습니다. 여러 방안에서 많이 생각해보다가 RNA extraction하는 과정 중에 pellet이 안보이는 이유가 다음과 같은 이유들로 인해 문제가 될 수도 있는지 궁금한 것들을 나열해 보았습니다. 1. lung을 homogenizer로 가는 과정이 너무 세게 진행되면 안될까요? 2. chloroform을 넣고 inverting을 하는 과정에서 세게 혹은 약하게 하는 것이 문제가 될까요? 3. chloroform을 넣고 centrifuge를 돌린 다음, 상층액을 따는 과정에서 너무 바짝 따는 것이 문제일까요? 4. isopropanol을 넣고 inverting을 하는 과정에서 세게 혹은 약하게 하는 것이 문제가 될까요? 5. mouse lung에서 RNA extraction하는 것이 어려운 것인가요? 열심히 searching했는 데도 불구하고 왜 비특이적으로 나타나지 않는 것인지 알 수가 없어서 이곳에 문의를 남깁니다.. 선생님들께서도 이러한 문제를 겪으신 적이 있는지 궁금하고, 어떻게 해결하셨는지 궁금합니다.. 혹은 선생님들께서 RNA extraction 과정 중 주의하는 점들이 있다면 그것을 알려주신다면 감사하겠습니다.. 과정마다 제가 잘 주의하여 했는지 돌이켜 보고 싶습니다.
회원작성글 마카롱_  |  09.26
Q. 식용유지 벤조피렌 메탄올 에탄올 추출법이랑 HPLC 이동상 궁급합니다
식용유지의 벤조피렌을 HPLC로 분석해 정량시험을 하려고 합니다 헥산이 없어서 식용유지는 메탄올 에탄올 등의 추출법으로도 대신 할 수 있다기에 찾아보고 있는데 도저히 못찾겠어서요 추출법에 관련된 논문 링크도 있으면 감사하겠습니다   HPLC UV로 돌리려고 하는데 이동상을 어떻게 맞춰야 할지 모르겠습니다 얘도 관련 논문 있으면 감사하겠습니다 ㅠㅠ
회원작성글 히힛헷  |  09.26
Q. IP시 sup 제거 방법
안녕하세요, 몇 달 째 IP로 헤매고 있는 대학원생입니다.   실험 테크닉?에 관한 질문입니다만, 혹시 IP할 때 bead 추가 -> rotation -> washing하고 난 후 마지막 washing이 끝나고 sup을 최대한 제거하여 bead의 target protein만 eluting하게 되는데 이 때 sup 최대한 제거할 때 어떤 방법으로 하시나요?   저는 현재 200ul pipette tip을 최대한 e-tube 벽에 밀착시켜 sup만 suction 되게끔하고 있는데 혹시 다른 좋은 방법이 있는지 궁금합니다.   감사합니다.
회원작성글 릴미  |  09.26
Q. 마우스 단백뇨 측정
마우스 단백뇨를 측정하려고 하는데 BCA측정법으로 측정이 될까요?? 대부분 어떻게 측정하시나요..?
회원작성글 짱짱  |  09.26
Q. E.coli K-12 MG1655에 사용 가능한 플라스미드 서칭..
안녕하세요,    E. coli K-12 MG1655에 돌연변이 단백질 서열을 과발현 시키는 실험을 하고 있습니다.    플라스미드에 서열을 삽입하여 inducible 한 형태로 만들어야 하는데, MG1655에 적합한 expression vector를 찾는 게 쉽지 않네요...  primer 종류, ori 종류 등을 다양하게 고려해서 찾아보았습니다만 적절한 발현 벡터를 못 찾았습니다. addgene에서 expression vector라고 소개하는 것들은 전부 다른 strain에서 사용 가능한 것 같이 보이고.. 사실 vector에 대한 설명을 읽어보아도 어떤 용도로 사용할 수 있는지, 왜 vector 내에 그러한 구성을 가지는 지에 대해 알기가 힘드네요  ㅜㅜ..  이런 실험 설계 시 플라스미드 선정/혹은 제작을 할 때, 어떤 방식으로 서칭을 하는 게 좋을 지 팁을 좀 알 수 있을까요? 
회원작성글 joceanil  |  09.26
Q. western blot reprobing 관련 membrane
western blot membrane을 교체하려고 고민중이라  관련된 질문 남기려고 합니다!   기존 PVDF를 사용하고 있었는데 strip이 전혀 되지 않아서 한번만 사용 후 매번transfer까지의 과정을 다시 진행했는데요 !   PVDF의 경우 Reprobing이라는 과정을 따로 진행하는 것으로 보이는데 이 과정이 Stripping과는 별개인가요 ?    현재 NC로 변경하여 stripping을 하여 사용하려고 찾아보던 중이였는데 reprobing 과 stripping의 차이점을 모르겠어서요 ㅠ  답변부탁드립니다. 
회원작성글 랄리  |  09.26
Q. 실험데이터 이해가 안됩니다 제발 도와주세요...!
안녕하세요. 제목 그대로 실험 데이터가 이해가 안됩니다ㅠㅠㅠㅠ 지금 target siRNA로 cell에 KD을 시켜서 Real Time PCR결과를 보면 mRNA expression이 증가하는 반면 같은 cell을 KD시켜서   western blot 을 하면 protein level이 감소한걸 확인 할수 있습니다. 혹시 왜 이렇게 되는지 아시는 분 있으면 제발 도와주세요ㅜㅜㅜ 
회원작성글 살려주세요  |  09.26
Q. Miseq 타겟 프라이머 조건
Miseq 으로 해양환경시료의 Metagenome 을 분석하고자 합니다. 18S V3-V4 region 을 타겟으로 하며 Miseq분석회사에 custom primer 진행으로 타겟 시퀀스 프라이머 합성까지 맡길 예정인데   "해당 primer로 라이브러리를 제작하게 될 경우 제공해주셔야 할 정보는 Primer 서열, Target size(bp), PCR 조건(annealing 온도, pcr 사이클 수 등) 입니다." 라고 분석회사에서 요청한 것에 대해 질문이 있습니다.   18S V3-V4 region의 universal primer 서열과 그에 따른 타겟 사이즈는 알겠습니다만, ** 이때 PCR 조건은 무엇을 의미하나요?   타겟 시퀀스에 대한 프라이머에 대한 PCR 조건을 알더라도, 결국 library 제작 시에는 (overhang sequence + 타겟 프라이머) 조합으로 1차 PCR, 2차로 index PCR이 진행될텐데, 그렇다면 overhang sequence 까지 더해진 타겟 프라이머의 Annealing 온도는 달라지는 것 아닌가요?
회원작성글 사과농약  |  09.26
Q. western detection 문제 첨부파일
<사진첨부>   웨스턴 detection을 하였는데 왼쪽부분은 밝고 오른쪽 부분은 검게 배경이 나왔습니다... 혹시 이거 왜 그런걸까요ㅜㅜ 카메라 문젠가도 생각해 봤는데 같은 카메라로 다른 학생이 찍을 땐 안 그러는데 제것만 이렇게 뜨네요,,    그리고 전체적인 background도 까매서 밴드가 잘 안보이는데 이건 왜 그런걸까요,,,,,,, loading control이라서 잘 보여야 정상인데 ㅜㅜ
회원작성글 쿵쿠따리쿵쿠따  |  09.26
Q. 식품의 밀봉 여부 확인 방법
안녕하세요 혹시 식품의 밀봉 여부를 확인할 수 있는 방법이 있을까요? 식품공전을 보면 밀봉은 40)‘밀봉’이라 함은 용기 또는 포장 내외부의 공기유통을 막는 것을 말한다.라고 되어있던데 조금 애매한것 같아서요 ! 밀봉 여부를 확인하는 방법이 있을까 해서 문의드립니다~
회원작성글 지민쨩  |  09.26
Q. 총균수 측정
물시료에 대한 총균수가 헷갈려 질문드릴려합니다. PCA 배지에 미지의물시료를 (멸균수 9ml + 시료1ml)를 희석하여 5승까지 보려고합니다. 세균 곰팡이 할것없이 총균수를 보려구 합니다.   Q1.PCA 배지에 물시료를 깔아두 될까요.(다른배지도 추천해주십쇼) LB,NA,R2A 등등   Q2.희석한 시료를 10 5승까지 깔때 spreding 방식을 쓰면될까요. Q3.희석한 시료를 몇ml씩 spreding 하면될까요..?
회원작성글 쌍카  |  09.26
Q. 농도 기본적인질문ㅠㅠㅠ
기본적인 질문하나만 하겠습니다... 막 실험시작한 학생입니다.   20ug짜리 사이토카인을 구매하였습니다 protocol을 보니 1mg/1ml로 희석해서 사용하라고 되어있었습니다. 그럼 몇 50ml에 희석하면되는것 맞나요?   그리고 희석하고나서 400ng/ml로 사용하려고하는데 그럼 몇번사용할 수 있나요?
회원작성글 123456789  |  09.26
Q. FACS antibody 질문 드립니다.
안녕하세요    CXCR4 expression 을 확인하기 위해 FACS를 진행하려고 합니다. target cell line 은 mouse cell line 이고  1차 ab는 CXCR4 Polyclonal Antibody host:Rabbit / isotype: IgG  human,mouse,rat  2차 ab는 F(ab')2-Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, PE, eBioscience™    이렇게 사용하면 되나요?   negative ctrl 은 2차 ab만 붙이면 될까요?
회원작성글 민토링  |  09.26
Q. Native gel 양쪽으로만 세게 염색되는 현상 첨부파일
기존 bio-rad precast gel 4-15%을 사용하여 Native gel 단백질을 분석하는데 실험 비용을 줄이고자 동일한 스펙에 다른 회사 Precast gels을 사용했는데 밴드가 예쁘게 나오지 않고 저렇게 양쪽으로만 세게 염색이 됩니다. 혹시 무엇 때문인지 알 수 있을까요? 참고로 Marker는 동일하게 잘 내려갑니다.
회원작성글 외계인눈깔아왱  |  09.26
Q. L929 cell 성장 형상 문의 첨부파일
세포독성 시험 도중 용출물로 교체해주고 나서 2일 후 세포 계수를 위해 현미경으로 확인했을 때 L929 cell의 성장한 형태가 아무 규칙 없이 무작위로 빽빽하게 자라는 control과 다르게 약간 벌집처럼 모양을 잡고 뭉쳐 자라있어서 혹시 어떤 경우에 해당 모양처럼 자라는지 아시는 분이 있을까 해서 올립니다.
회원작성글 demiann  |  09.26
Q. 유산균 배양
안녕하세요, 현재 원하는 플라스미드를 넣기 위해 L.plantarum (유산균) competent cell을 만들고 있습니다. OD값을 바꾸거나, electroporation 조건을 바꾸거나 여러가지 시도를 해보았으나 콜로니가 안떠서 답답한 마음에 질문 올립니다. 대부분의 프로토콜 상에서 buffer에 KH2PO4가 들어가길래 주문해서 buffer 조성도 바꿔볼 예정입니다.   혹시 유산균 competent cell을 만들어보셨거나, L.plantarum 다뤄보신 분 있으시면 프로토콜 공유해주시면 감사하겠습니다.. +electroporation 조건도 함께 공유해주시면 계신 곳으로 절하겠습니다...
회원작성글 슴비  |  09.26
Q. 타액 내 포피린 농도 계산 법
현재 의공학과에 재학중인데 바이오센서 관련하여 실험을 하게 되었습니다. 알고 싶은것 : 사람의 타액 1ml당 포피린 여기서 포피린은 p.gingivalis의 대사산물입니다. 따라서 논문들을 찾아보았고 아래 2가지 사실을 알게되었는데 여기서 이제 어떻게 계산해야하는지 모르겠습니다. - 타액 1ml당 p.gingivalis 평균 = 10^5 CFU - p.gingivalis 내 포피린 214ng/g 이 정보만으로는 구하기 어렵다 판단하여, 몇마리의 p.gingivalis가 1g인가 알아야한다고 생각했는데, 이 정보를 찾기는 어렵더 군요.. 위의 두 정보 모두 다른 논문에서 찾았고 2번째 정보는 HPLC-ms/ms크로마토그램으로 실험한 것입니다.    어떻게 하면 될까요? 도와주세요!!
회원작성글 smart toil..  |  09.26
Q. gram-staining을 했는데 양성인지 음성인지 잘 모르겠네요 첨부파일
도말을 할때 좀 더 신경을 썼어야했는데 처음이라 잘 못했네요.. gram-staining을 했는데 양성인지 음성인지 잘 모르겠습니다. 보라색 같기도 한데 살짝 붉은기도 도는것 같고 모르겠네요.
회원작성글 빈가루  |  09.26
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