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BioLab 박소정 교수
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 카테고리: 전체 > Buffer/Reagent
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Q. ELISA 간섭물질( SDS-PAGE sample buffer)
안녕하세요, 이번에 맡은 프로젝트를 진행하던중 문제가 생겨 질문 남깁니다. 제가 monomer로 dimer를 합성하여 ELISA에 쓰려고 하는데요, 한번 합성한 후 page에서 band를 확인해보니 monomer가 monomer상태가 아닙니다. 뭉쳐져있는것처럼 보였어요. 당연히 dimer도 제대로 합성되지 않았습니다. 그래서 뭉쳐진 monomer를 풀어주려고 하는데 sds, DTT가 ELISA에 간섭하는 물질이기에 다른 물질이 있는지 알고싶습니다. 1. ELISA에 간섭을 주지 않는 oligomer, dimer를 monomer로 풀어주는 성분이 있나요?   2. mercaptoethanol은 ELISA에 영향을 미치는지 알고싶습니다. 감mercaptoethanolmercaptoethanolmercaptoethanol  
회원작성글 dhwl9191  |  04.08
Q. Bleomycin solution 보관 기한
안녕하십니까 실험실에서 Bleomycin(Sigma, B2434)을 normal saline에 Bleomycin 1.5U/100ul 로 제조하여 사용합니다. (https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/product/sigma/b2434) Sigma의 제조 메모에서는 Saline에 녹일 경우 3U/ml의 농도라면 3달간 activation이 유지된다고 써있습니다만, 제 경우에는 약 5배 가량의 농도이기에 powder의 보관방법인 4°C에 용액을 보관하는데, 어느 정도까지 보관이 가능할까요? 실험을 하고 다음 반복 실험을 할때까지 약 1~2달정도의 기간입니다만 이 기간동안 activation이 유지 가능할지 모르겠습니다. Bleomycin이 가격이 꽤 되다 보니 여분을 더 쓸 수 있을 것 같아 보관이 될지 찾아보려 하였지만 어떤 농도로 실험에 사용하였는지만 파악할 수 있었습니다. 알려주신다면 감사하겠습니다.
회원작성글 Bleo  |  04.08
Q. 트레프탈산 (Trephthalic Acid) stock 용액 제조 도와주세요..
Trephthalic Acid 1mM stock 용액을 만드려고 합니다. 용해도를 인터넷에 찾아보는데 위키백과에서는 물에서 0.0019 (g/100g 용매) 라고 하고, 시약 구매했던 사이트에서는 water: ~0.017 g/L  다른 사이트에서는  물에 대한 용해도 , 20°C에서 g/100ml: 0.28   이라고 나옵니다.. 또 물에서는 잘 안녹는다고 나오면서도 위 사이트대로라면 잘 녹는편 아닌가요..?   잘 몰라서 여기에 질문드려요..! 어떤 사이트를 참고해서 용액을 만들어야 하나요??
회원작성글 qlzj  |  04.05
Q. buffer만들때 imidazole
buffer만들때 imidazloe들어가는데 이때 fresh한 imidazole을 사용해야하나요? 이유가 뭔가요? 정제하기 일주일 전에 만들어 놓으면 안좋을까요?
회원작성글 폴트  |  03.31
Q. 제한효소 반응 끝내는 방법
제한효소(EcoR1) 2시간 반응 시키는 중인데 at RT 2시간 뒤에 반응 끝낼려면 ice에 박아두면 되나요??
회원작성글 앨  |  03.30
Q. 10X PBS
안녕하세요, pH 7.4 10 mM PBS를 만들어야 해서 우선 10X PBS를 만들고, 1X로 희석하여 사용하려고 합니다.   10X PBS 만들 때 조성들을 각 몰수에 맞게 녹인 뒤 1 L에 정용만 하면 되나요?   찾아보니 보통 10X PBS를 조성대로 혼합하여 녹이면 pH 6.8 정도 되고, 1X로 희석했을 때 pH 7.4 정도가 된다고 하던데, 그럼 10X PBS를 만들 때 각 조성대로 혼합 후 HCl이나 NaOH로 pH 6.8을 맞춘 뒤 정용하면 되는건가요?
회원작성글 xx_a.21  |  03.30
Q. western blot gel running 문제 ㅜㅜ
이게 머선 일이쥬ㅜㅜㅜㅜㅜ 75volt로 했는데 stacking이 안되는 것 처럼 보입니다.
회원작성글 청파3동  |  03.30
Q. 투여농도 계산 급해요 ㅠ
안녕하세요 mouse 실험을 하는 예비 석사생입니다 농도 계산이 헷갈려서 질문하려고 합니다. 시약의 농도는 1.5mg/kg 이고, 마우스 무게는 20g 투여 볼륨은 200마이크로 리터 입니다. 또 5마리씩 4일 투여를 할 예정입니다 제가 시약에 필요한 농도를 계산했을때. 마우스 20g당 0.03mg이 필요하므로 총 5 * 4 = 20 마리 치를 만들기 위해 dw 4ml에 0.6mg을 녹임 0.6mg이 너무 양이 적어서 정확도 높이기 위해 40ml에 6mg을 녹이고 1/10으로 희석하려하는데 이땐 몇ml씩 분주를 해놔야하는건가요..? 하루에 1.2ml씩 필요하니 매번 120마이크로리터 용액에 1880마이크로리터 dw를 넣으먼 되는건가요?
회원작성글 똑똑해지자  |  03.30
Q. 마우스 희생시 사용하는 항응고제 sodium citrate 제조
마우스 희생시에 사용할 Sodium Citrate 제조를 해야하는데  몇mol짜리를 만들어야 하고 그에 대한 제조방법은 어떻게 달라지는지 궁금합니다
회원작성글 daisy98  |  03.28
Q. 시약보관
제가 실수로 proteinase inhibitor cocktail 과 phosphatase inhibitor cocktail 보관을 반대로 했는데 괜찮을까요.. 2일 지난 후에 알게 되었습니다..
회원작성글 kngj2642  |  03.27
Q. Dialysis 로 buffer change 할 때 30% glycerol buffer 를 사용해도 되나요
elution solution에 들어있는 단백질 샘플을 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 100mM NaCl, 30% glycerin (glycerol) buffer 로 Dialysis 를 통해 buffer change를 하려고 합니다 그런데 glycerol을 5%~10%로 포함시키는건 봤는데 ... 30% glycerol 이 좀 많은 양 같아서 전례가 있나 구글링 해보고 있는데 잘 안나오네요 .. ㅠ glycerol은 안정화하는 목적으로 쓰는걸로 알고 있는데, 차라리 Dialysis buffer에는 glycerol을 포함시키지 않고 Dialysis 완료 후 단백질 샘플에 direct하게 30% glycerol을 추가해주는 방법이 나을까요? 그리고 30% glycerol이 Dialysis tube 통과를 잘하나요? 통과를 잘하는지 확인할 수 있는 방법이 있나요? 답변 해주시면 감사하겠습니다
회원작성글 wpqkfcnldj..  |  03.25
Q. HPLC 역상 Retention time 1분대 Peak 분석
안녕하세요  hplc 왕초보 입니다.   C18 컬럼에서 물: ACN = 90 : 10 로 분석 시 RT 1분대에 나오는, 머무름이 없는 분석물의 경우   RT를 뒤로 미는 방법이 물을 95로 올리는 방법 밖에 없을까요? (컬럼 변경하지 않고)   저는 역상에서 물 비율 늘리면 RT 늘어난다는 생각밖에 안했는데, 저번에 선임분이 오히려 ACN 비율을 30으로 늘리시더라구요. 극성이 오히려 너무 커서 컬럼에 머무르지 않는 물질의 경우, 이동상의 극성도를 낮춰서 분석물과 고정상이 상호작용을 더 할 수 있게 하는 방법인가요? 아니면 잘못된 방법인가요?  
회원작성글 B둘B둘  |  03.23
Q. 효능평가 기초,, 질문 드립니다.
총 플라보노이드 protocol을 잡는중인데 STD는 퀘르세틴이고 용매는 EtOH / sample 용매는 D.W인데   STD와 Sample의 용매가 달라도 되는건가요?  그리고 STD인 퀘르세틴을 EtOH에 용해시키고 희석은 D.W로 해도 상관없나요?   EtOH로 희석 했을때와 D.W로 희석 했을때 큰 차이가 있는지 ELISA로 측정해봤는데 별 차이가 없었습니다 
회원작성글 애리닝  |  03.22
Q. Elisa capture antibody희석 방법??
용액 다른 두가지 101ug+2.5mg을 희석후 원심분리해 1.01ml의 멸균수에 100ug/ml 농도로 희석하려면 어떻게 하나요?
회원작성글 dhfldl  |  03.22
Q. PDA coating on membrane 에 관한 질문입니다.
Polyethersulfone membrane 위에 polydopamine 코팅을 하고자 하는데 명확한 논문을 찾기 힘들어 질문 올립니다.  L-DOPA 는 약알칼리( 약 ph 8.5) 에서 self-polymerization을 통해서 협착력이 생기고 organic 이나 inorganic membrane에 가리지않고 binding 한다고 많은 논문에서 봤습니다. self-polymerization 은 색이 갈색으로 변함으로 확인 할수 있다고 나옵니다. 도파민을 녹이는 과정에 궁금증이 생겨 질문 올립니다. ph 8.5 tris-hcl에서 녹는다 나와있는 도파민이 잘 녹지 않습니다. L-DOPA을 Tris-Hcl에 넣고 약 2시간 가량이 지나야 갈색을 띄는 솔루션으로 녹아있습니다.   논문상에는 L-DOPA이 솔루션 내에서 녹은(dissolved)된 다음에 그 솔루션에 코팅하고자 하는 맴브래인을 담그라고 나오는데 그렇다면 갈색으로 갈변된 솔루션을 이용하여 멤브레인을 코팅하는것인가요? 아님 맑은 솔루션에서 멤브레인을 넣고 갈변을 시켜가며 바인딩을 시키는 것인가요? 후자에 경우라면 도파민을 갈변되기 전에 녹이는 방법을 알고싶습니다. 도파민을 이용한 코팅 실험을 하셨거나 답을 알고계신 분이 계시면 답 부탁드리겠습니다. 감사합니다. 
회원작성글 toktok  |  03.22
Q. LB 배지가 어떤건가요?
LB배지가 어떤건가요?   LB배지는 자연배지로 분류되나요 !?
회원작성글 궁금해요!!  |  03.21
Q. stock solution 관련해서 궁금한게 생겨서 질문 드립니다!
안녕하세요  실험을 하는도중 궁금한게 생겨서 질문드립니다! 전해질 30ml Cu(NO3)2 100mM을 만들었습니다. 근데 여기에 CTAC을 전해질과 함께 넣어 CTAC가 1mM이 되게 만들어야 됩니다.  그래서 stock solution을 만들어 할때마다 넣고 싶어서 1mM의 stock solution을 만들려고 합니다. 근데 이 stock solution을 working solution으로서 사용할때 몇 ml을 넣어야 되는지 모르겠어서 질문드립니다.  얼마를 넣든 전해질 30ml랑 만나기 때문에 몰농도가 바뀔거 같은데  stock solution 농도를 더 크게 만들어야 될까요..?  도움 부탁드립니다ㅠㅠ
회원작성글 UZOO  |  03.21
Q. 뷰렛
뷰렛실험 할때 1.계란흰자 용액, 2. 계란흰자 용액+펩신 을 60도 아래에서 10분간 중탕하고 뷰렛 시약을 넣었더니 2번 용액에반 보랗게 변했는데 왜 그런지 아시나요?? 원리가 궁금해요
회원작성글 소희랑  |  03.20
Q. ph 미터 측정 오류
ph 미터기로 buffer 4,7,10 순서로 측정하는데 자꾸 4를 측정하면 4.6이 나오고 7를 하면 7.6 이런식으로 버퍼 용액이 0.6정도 높게 측정됩니다,,,,,, 오늘 꼭 해결해야하는데 방법이 없을까요,,?ㅜㅜ
회원작성글 wooooo  |  03.17
Q. 클로로포름이 96well을 녹이네요... 답이 있을까요?
SPL 제품 사용중인데요. 이게 PS재질로 만든 것이더라구요.   찾아보니 PP로 만든 제품을 쓰면 된다고 하는데... SPL에 전화해보니 PS재질 밖에 없다고 하네요... 혹시 추천하는 제품이 있을까요?? 비살균에 플랫타입으로 희망합니다.    
회원작성글 볼음도  |  03.16
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