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 카테고리: 전체 > Microbiology > Bacteria
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Q. 항균 시험 희석배수에 대해 궁금한것이 있습니다.
항균 실험을 진행하려합니다. E.coli 균 배양액을 용량 크게 만들어 배양중인데, 실험에 앞서 궁금한것이 있어 여쭈어봅니다. 1. 1X10^6 CFU/ml 이상 플레이트를 찾고자 10배로 희석 후 도말하였습니다.  몇일 전에는 10^-5플레이트에서 적절한 양이 나왔었는데 어제 똑같이 도말하니 10^-9희석배수까지도 균이 흐를정도로 많더군요.. 몇 일 사이에 균이 자라서 이런 현상이 보이는건가요?   2. 균의 colony를 따서 신선한 배양액을 만든 후 진행하는게 정석인것같던데 저는 계속 배양해오던 용액으로 하고있습니다. 상관은 없는지요?? 적절한 희석배수만 찾으면 되지않나요???   3. colony를 따서 새로운 균배양액을 만들던 키우고 있던 배양배지로 바로 실험을 하던, 균 실험 하기전에는 항상 10배 희석도말을 해봐야되는거지요??   4. 유리로 된 media bottle 있잖아요.. 거기에 균을 키워도 상관없는지요??   5. 항균시험 할 때 중화버퍼를 사용하던데, 이것은 샘플과 접촉 후 사용하는 것인가요...? 언제사용하는건가요?? 그리고 중화버퍼가 없는데,, 대체로 하는 방법이 있으실까요??   감사합니다 ㅠㅠ
회원작성글 마징가도리  |  2022.07.19
Q. 균 실험 전에 항상 CFU/ml를 산정하기위해 희석을 해야하나요??
항균 실험을 진행하려합니다. E.coli 균 배양액을 용량 크게 만들어 배양중인데, 실험에 앞서 궁금한것이 있어 여쭈어봅니다. 1. 1X10^6 CFU/ml 이상 플레이트를 찾고자 10배로 희석 후 도말하였습니다.  몇일 전에는 10^-5플레이트에서 적절한 양이 나왔었는데 어제 똑같이 도말하니 10^-9희석배수까지도 균이 흐를정도로 많더군요.. 몇 일 사이에 균이 자라서 이런 현상이 보이는건가요?   2. 균의 colony를 따서 신선한 배양액을 만든 후 진행하는게 정석인것같던데 저는 계속 배양해오던 용액으로 하고있습니다. 상관은 없는지요?? 적절한 희석배수만 찾으면 되지않나요???   3. colony를 따서 새로운 균배양액을 만들던 키우고 있던 배양배지로 바로 실험을 하던, 균 실험 하기전에는 항상 10배 희석도말을 해봐야되는거지요??   4. 유리로 된 media bottle 있잖아요.. 거기에 균을 키워도 상관없는지요??
회원작성글 마징가도리  |  2022.07.19
Q. agar plate 사진 촬영시 빛이 반사되어 알아보기 어렵습니다
현재 직무상 미생물을 평판에 배양한 것을  사진으로 기록해야 하는 경우가 많은 데요   자꾸 평판에 조명이 반사되어 사진을 찍었을 때 알아보기가 힘들게 됩니다   혹 선생님들 께서는 이런경우 빛이 반사되지 않도록 하는 좋은 방법을 알고 계신가요?
회원작성글 촉촉한촉수  |  2022.07.15
Q. 뮤탄스균에 가루 형태의 자일리톨 첨가
안녕하세요, 자일리톨의 뮤탄스균 활성 감소 효과에 대해 실험하고자 하는 고등학생입니다.   뮤탄스균이 이용가능한 당이 없을 때 자일리톨을 섭취하면 활성이 낮아진다는 성질을 이용해 실험을 진행하고자 하는데, 자일리톨을 첨가하는 방법을 잘 모르겠습니다.   현재까지는 UV-vis로 뮤탄스균의 활성 정도를 파악하려고 생각 중인데, 그렇다면 그냥 뮤탄스균이 있는 액체 배지에 가루 형태의 자일리톨 분말을 첨가하는 것만으로도 유의미한 실험 결과가 나오나요?   아니면 다른 방법이 있는지 궁금합니다.
회원작성글 만원짜리내기  |  2022.07.14
Q. 곰팡이 및 균 스톡 보관시 초저온냉동고 온도관련 질문입니다.
초저온냉동고 온도 -60도 짜리도 괜찮나요   기존에 -80도 제품을 사용중인데 고장이나서.. -80도 제품을 쓸때도 최저온도로는 안맞춘거같은데
회원작성글 켐테알  |  2022.07.13
Q. 곰팡이와 균을 스톡으로 보관하는데 초저온냉동고가 고장이났습니다.
이 균과 곰팡이는 사용 못하겠죠?   30도로 내부온도 찍혀잇더군요...
회원작성글 켐테알  |  2022.07.13
Q. 세균 SEM 촬영할 때 전처리 과정이 궁금합니다.
bacteriocin 추출 후에 세균에 처리하고 SEM으로 관찰해서 전후에 세균의 세포벽에 어떤 차이가 있는지 알아보려고 합니다.   세균 전처리 과정을 찾아보니 glutaraldehyde in PBS에 고정한 다음 PBS로 2~3회 세척하고 OsO4로 2차 고정한 뒤 ethylalchol 농도를 점점 높여가면서 탈수 과정을 거친 뒤 건조하여 사용한다고 하더라고요   세균 전처리 과정에서는 colony를 따서 사용하는 건가요 아니면 배지에 배양된 부분을 agar까지 잘라내서 같이 전처리해야하나요? 만약 colony만 처리하는 거라면 어떻게 진행해야 하는지 잘 모르겠네요   그리고 세척 과정은 PBS에 담가서 10분 뒤에 빼는 것인지 헹궈내는 과정인지도 알려주세요
회원작성글 ._.  |  2022.07.11
Q. 항생제 내성 평가 microdilution 시 96well plate
선생님들 안녕하세요,   항생제 내성 평가를 위해 microdilution 셋팅중인 대학원생입니다.   혹시 선생님들께서는 microdilution용 96well 어디 제품 사용하시나요?   SPL 사 제품 많이 사용하시는 것 같은데 Product list에  96well 도 종류가 많아서 잘 모르겠어서 질문 드립니다 !!   답변 미리 감사드립니다. 오늘도 좋은 하루 보내세요 
회원작성글 애칟  |  2022.07.11
Q. 점착성 높은 박테리아 종류
혹시 점착성이 높은 장내 미생물이나 박테리아 종류 아시는분 있나요 병원성이 없으면 더더욱 좋구요!! 
회원작성글 해성이  |  2022.07.11
Q. Transformation시 자꾸 문제가 생깁니다...
안녕하세요 현재 bacteria 관련해서 실험중인 대학원생입니다. Plasmid에 gene을 insert하고 transformation시, gene이 통째로 날아가는 문제가 계속 생겨서 문의 드립니다.... Insert gene은 3kb정도고, vector gene은 2kb정도 됩니다. Transformation후, gel을 통해 sequence를 확인했을 때, 3kb정도의 insert gene이 500bp가 뜨거나 1kb가 뜨거나 어떨때는 통째로 날아가 버리기도 합니다. 문제가 무엇일까요....
회원작성글 넙넙  |  2022.07.08
Q. E.coli 뭉침? 컨탐? 첨부파일
안녕하세요   Plasmid preparation을 위해 transformation한 E.coli를 LB에 오버나잇으로 키웠습니다. 그런데 다음날 와서 확인해보니 사진처럼 뭔지 모를 무언가가 크게 자라있었습니다. 자세히 보면 LB는 투명하고 긴 실 같은것이 빽빽하게 뭉쳐있습니다. 흔들어서 풀어봐도 잘 풀리지 않고 길게 이어져있습니다. LB를 오토클레이브하고 ampicillin도 추가 했습니다.   두번 연속으로 진행했는데 두번 다 같은 현상이 일어났습니다. Shaker가 있는 방의 온도가 높기도 했고, shaker에 설정된 온도는 37도인데 확인한 날 기계에 표시된 온도는 42도 정도로 나와있었습니다. 원인을 잘 모르겠습니다. 도움주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 화  |  2022.07.08
Q. EBM 배지색 변화??? 첨부파일
DCLA 배지에서 의심균을 EMB배지로 계대배양을 했는데 사진처럼 검정색 콜로니 가 집락한 주위에는 배지가 좀더 밝은 보라색으로 변했는데 이걸 양성이라고 봐야할까요??  그리고 왜 배지색이 변한걸까요??ㅜㅜ
회원작성글 으므르  |  2022.07.06
Q. e.coli / s.aureus / k.pneumoniae 를 스톡에서 배양하려고하는데
1. PCA 배지 NBA 배지를 이용하면되나요?  e.coli 와 s.aureus 는 pca 배지에서 배양해되 되는걸로아는데   2.  해당 배지에 배양할때   3개정도 플레이트에 배지를 굳힌 뒤 스톡을 스트레킹 하는것과     스톡을 나눠 분주한다음 배지를 부어 굳히는것 어느방법이 좋나요   
회원작성글 켐테알  |  2022.07.06
Q. Desoxycholate Lactose Agar 멸균 시
안녕하세요. 배지 관련 질문이 있습니다. Desoxycholate Lactose Agar의 경우 고압멸균하지 않고 1분간 가열하라고 하는데, 살짝 끓어오를 정도로만 가열하면 될까요? 그리고 이 배지를 멸균했을 때 파괴되는 성분이 무엇인지 어떤 영향이 있는지 궁금합니다. ---------------------------------------------------------------- 데스옥시콜레이트유당한천배지(Desoxycholate Lactose Agar) Peptone 10.0 g Lactose 10.0 g Sodium Chloride 5.0 g Sodium Citrate 2.0 g Sodium Desoxycholate 0.5 g Neutral Red 0.03 g Agar 15.0 g -----------------------------------------------------------------   * 추가질문있습니다. 배지를 멸균하지 못한다면 삼각플라스크나 마그네틱바는 어떻게 하나요? 미리 멸균을 해놓고 제조하나요? 아님 그냥.. 하는 건지 궁금합니다.
회원작성글 yeasting  |  2022.07.04
Q. essential gene deletion할때 질문 있습니다.ㅜ
3개월된 학부 연구생인데요 먼저 essential gene(e.coli) 에 kan 내성유전자가 포함되어있는 frt를 transformation시켜서 deletion시키는 실험을 진행하고 있습니다.  먼저 사용하는 gene은 pkd46을 넣은 상태입니다. 그렇다면 transformation 후 regeneration시킬때 람다red recombinase를 발현시키기 위해서 arabinose를 넣은 후 30에서 배양해야 하나요? 또한 regeneration 후 spreading하고 나서는 pkd46이 날아 갔으니 이 plate는 37도, arabinose가 없는 배지에서 배양하는 것이 맞나요?   그리고 essential gene deletion시키는 일이 원래 잘 안되나요..? 몇개월째 같은 실험 반복중이어서 잘못된게 있나 싶습니다. 도와 주시면 감사하겠습니다.    
회원작성글 김세은1  |  2022.06.29
Q. probiotics 관련 논문
안녕하세요?  프로바이오틱스 균주 Lactobacillus, Bifidobacterium 관련 논문을 읽고 있는데,, 이 균들이 유익균이라는 것은 많은 연구결과 통해서 메커니즘이나 질환에 이익을 주는 균이라고 나와있잖아요~~ 근데 비피도박테리움:락토바실러스의 이상적인 균의 비율이 있나요?? 혹시 관련 논문 참고할 만한 내용이 있음 추천해주세요.... 또,, 유해균 유익균 비율도 8:2, 7:3 이 좋다라는 마케팅 문구도 많이 보았는데 증거가 될만한 논문이 있을까요? 키워드를 잘못 쳐서 그러는지 잘 나오질 않네요;;  이쪽 분야 공부하시는 분들 좀 도와주세요!....    
회원작성글 방울  |  2022.06.26
Q. Biological Indicator 균주 규명 관련하여 질문드립니다.
안녕하세요, 멸균 의료기기 제조업체 종사자입니다. 매번 멸균기를 가동할 때마다 B.I를 배양하고 있는데, 최근 B.I에서 양성반응이 도출되는 횟수가 드물게 발견되어 고민이 많습니다. 현재 Steam 멸균을 위한 3M 1292-S Geobacillus stearothermophilus를 사용하고 있습니다. 해당 B.I가 양성이 뜬 이유가 실제로 G.stearothermophilus가 사멸되지 않아 그런 것인지, 혹은 기타 다른 균주로 인해 양성 반응이 도출된 것인지를 확인하기 위해서는 어떤 시험법을 이용하면 좋을지 문의드립니다.
회원작성글 두부구름  |  2022.06.24
Q. 국내에서 S.aureus USA300 LAC strain (BAA-1756) 구할 곳이 있을까요..?
 안녕하세요  서울 소재 대학원에 다니고 있는 학생입니다.    제가 Staphylococcus aureus 균을 이용하는 실험을 계획하고 있는데 거기에 'S.aureus USA300 LAC'라고도 불리는 'BAA-1756, PFGE type: USA300-0114' 균주가 필요합니다. 해당 strain은 ATCC에서 취급을 하긴 하지만 가격도 상당하고 워낙 시간이 오래걸려서 이를 통해서 얻기는 쉽지가 않아보이더군요... 또한 KCTC, KCCM 같은 국내 분양업체를 통해서는 균주 자체를 취급을 안 해서 불가능했습니다.   혹시 국내에서 이 균을 다루는 랩 등 이 strain을 얻을 방법이 있을까요...?  읽어주셔서 감사합니다.
회원작성글 에라  |  2022.06.21
Q. 흉수채취를 통해 microbiome 을 확인하려고 하는데, DNA storage kit 좀 알 수 있을까요?
흉수채취를 통해 microbiome 을 확인하려고 하는데, DNA storage kit 좀 알 수 있을까요?    흉수채취를 하고 바로 DNA 채취를 할 수 없어서  혹시 저장 키트 같은 건 어떻게 해야 할까요?    oral 이나 stool같은 건 저장 키트가 있던데 체액은 따로 없을 까요?  아시는 분 있다면 고견 부탁드립니다.   
회원작성글 오지미  |  2022.06.21
Q. 항균실험 growth curve 항균 판단 기준
어떤 물질의 항균력을 확인하는 실험 중에 있습니다.   박테리아를 키우고 거기에 물질별로 처리하여 성장 곡선을 확인하였습니다. 다음과 같이 그래프가 나왔고, *로 제일 위에 있는 선이 박테리아만 키운 곡선입니다. 그런데 궁금한 점이 어느 정도까지 간격 차이가 있어야 항균 효과가 있다고 하는지요,, 논문을 확인해보면 절반 정도 간격이면 항균효과가 있다고 적고, 거의 붙어있으면 항균력이 없다고 하는데 이 그래프 상 0.5 정도까지만 자란 것도 항균효과가 있다고 할 수 있는지, 회색 네모 박스 도형도 negative control과 약간 떨어져있는데, 이것도 항균력이 있다고 보는지 궁금합니다.  
회원작성글 선사  |  2022.06.20
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