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[우당탕탕 석사 적응기] 석사 1학기 - 새로운 환경, 그리고 후회
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 카테고리: 전체 > Cell Biology
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Q. U87MG cell morphology
안녕하세요. U87MG cell과 관련하여 문의드립니다. 96well에 옮긴 후 20시간 정도 지나면 cell들이 여러군데에서 서로 뭉쳐서 자라는데 안뭉치게 할 방법이 있는지 아니면 96well에서는 원래 뭉쳐서 자라는지 궁금합니다. cell을 키우고 있는 플라스크에서는 뭉치지 않고 잘 자라고 있습니다.
회원작성글 cswone2  |  07.28
Q. 암세포 배양을 co2배양기에서만 해야하나요? 일반 향온 배양기에서는 배양이 안되나요?
co2배양기 사용이 암세포 배양에 필수인가요?
회원작성글 단치  |  07.28
Q. transformation 후 spreading
transformation 후 spreading을 진행했습니다. spreading 후 overnight 지난 후에 plate를 빼야되는걸로 아는데 22시간이 지난 후에 꺼낸 plate로 seed하여 mini prep을 진행해도 괜찮은 걸까요? 제가 알기로는 30시간 까지는 괜찮다고 알고있는데 아시는분 계실까요?
회원작성글 인턴임다  |  07.28
Q. 현미경 접안렌즈에 10x/20 이라고 쓰여졌는데, 이건 10x 배율을 뜻하는건가요?
이번에 cell culture를 시작해서 cell 사진에 배율을 적어야 하는데, 대물렌즈는 정확하게 써있는 반면, 접안렌즈는 10x/20 이렇게 써있더라고요. 좀 더 정확히 표현하자면 아래 사이트의 이미지와 같이 10x/20 옆에 안경 모양 그림도 있습니다. https://ko.aliexpress.com/i/32911915228.html 대충 인터넷 사진들이랑 세포 사이즈 사진 비교해보니 10x 배율이 맞는거 같긴 한데, 10x/20 과 같이 이런 단위들을 읽는 법에 대해 정확히 알고 싶어서 질문드립니다. 감사합니다.
회원작성글 Foxcatcher  |  07.28
Q. LIVE/DEAD™ Cell Imaging Kit 염색 문제 첨부파일
LIVE/DEAD™ Cell Imaging Kit 이용하여 셀 염색 진행하고 있습니다.   petri dish에 cell suspension (DMEM) + 염색약  -- 1:1 15분 염색 후 관찰하는데, live/dead 색이 동시에 보이는 세포가 존재해서요.   dead cell 같은 경우에, raw data에서 너무 보이지 않아 형광 이미지가 잘 보이도록 스케일을 조절해준 결과입니다. 그 스케일을 live cell의 이미지에도 적용했습니다! (HaCaT cell 입니다!)
회원작성글 motherscof..  |  07.28
Q. cell culture amp 첨가
LB 배지 이용해서 cell culture하는데요, seed culture 20mL 할 때는 항생제 (amp) 첨가를 했는데 main culture 로 1L 키우는데, 깜빡하고 amp를 넣지않은 것이 생각나서 main culture에서 cell 키우다가 3시간 뒤에 amp를 넣어버렸습니다ㅜㅡㅜ 아직 초보라서 이것저것 하다보니 이런 말도 안 되는 실수를 한 것 같습니다.. 혹시 다시 키워야할까요? ㅜㅜ
회원작성글 1954열정  |  07.28
Q. FACS 분석 의뢰 할 수 있는 외부 업체 소개 좀 해주실 수 있으신가요?
제목 그대로 입니다 ^^ FACS 장비가 없어서 외부 업체에 의뢰를 맡기려고 하는데 업체 소개 해주실 선생님 계신가요~?
회원작성글 데롱이  |  07.28
Q. 처음들어보는 용어? 4 lg, tj 99%
안녕하세요.  외국 바이어분과 메일을 주고 받던중 처음 보는 약어가 나타나서 문의 드립니다.  생화학을 하기는 해보았으나, 살짝 맞만 본 상태이라 제가 모르는 약어 같습니다.  혹시 아래의 내용이 무엇일까요?    "effect of the disinfection to get 4 lg, tj 99,99% for virus and 5 lg, tj. 99,999% bacterium and mould"   4 lg, tj 99,99%   << 이부분을 모르겠네요..;; 대략 4 얼마를 쓰면 99.99% 살균된다는 내용같은데요..;; lg 와 tj 를 처음 봅니다.;;  
회원작성글 KDragon  |  07.28
Q. b-catenin ubiqutination
normal breast cell인 MCF10A에 human APC를 mutation 시켜  b-catenin이 증가되는 것을 확인하여서 ubiqutination을 억제하는지를  확인하고 싶은데 좋은 방법이 있으시면 추천부탁드립니다.  
회원작성글 새슬  |  07.28
Q. H2O2 세포 보호능 볼때 CTL 의 생존률이 계속 달라지는 이유
현재 SW1353 세포에 H2O2 와 샘플을 처리해서 샘플의 H2O2에 대한 보호능을 보고 있습니다. 그런데 문제가, 같은 농도의 H2O2를 같은 시간 처리해도 CTL 군에서 어떨땐 20% 정도의 생존률이 나오다가 어떨땐 40% 대의 생존률이 나오는 등 재현성이 잘 안나타나네요. 이런식이면 샘플의 효능 측정도 일정하지 않을텐데 말이죠. 이런경우를 겪어보신 분이나 원인을 알고 계신 분이 계실까요?
회원작성글 AGCT  |  07.27
Q. 분화된 otsteoclast의 plate 그대로 freezing 한 뒤 나중에 fixation해도 될까요?
급하게 잡힌 일정때문에 osteoclast 분화 예정일과 겹쳐서, 다른 lab에 부탁하고 가려고하는데,   혹시 분화된 osteoclast를 media suction이후 plate 그대로 deepfreezer에 얼려두었다가, 며칠뒤에 fixation하고 TRAP staining해도 큰 문제가 없을까요? cell을 버리는것보다 시도해보는게 나을것같아서.. 일단 그렇게라도 해보는게 좋을까요?   fixation까지 부탁하기에는 실험군이 너무 많고, fixation solution을 넣을 때 cell이 잘 떠서 불안합니다
회원작성글 wnsl1201  |  07.27
Q. Caspase-1 Glo (promega) 실험에 대해 여쭤봅니다.
Caspase-1의 활성을 보기 위해 Promega에서 glo kit를 구입하여 조건 set up중에 있습니다.   사용하는 cell은 Human lung epithelial cell인 H292입니다. white 96-well plate에 5*10^4으로 cell을 100 ul씩 seeding을 하고 caspase-1 활성을 위해 P.aeruginosa (MOI 100)를 이용하여 infection시켰습니다.   이후 Luminometer로 detection하면 +/-의 수준이 크게 차이가 나지 않아 원인을 생각해보고 있는데 기본적인 basal level이 높아 inducing이 되어도 차이가 나지 않는 것인가 생각이 됩니다. ( + : 140,000,  - : 120,000 ) 다른 paper들을 참고했을 때 caspase3/7를 측정할 때 seeding 농도를 낮게 깔아 그것대로 cell seeding 농도를 낮추고자 하는데 혹시 제가 생각해볼만한 부분이 있는지 여쭤보고 싶습니다.
회원작성글 도도형  |  07.27
Q. microplate reader로 흡광도 측정시
CCK-8을 이용한 cell viability 측정에서 microplate reader기로 흡광도를 측정하는데요. 적정 CCK-8 incubation time을 정해야 해서 연달아 찍어봐야 하는데 이럴때 뚜껑을 씌우고 reading 하면 안될까요? 이 실험만 하면 잠깐 열고 찍어도 되겠는데, 불행히도 같은 plate 내에 다른 실험군이 있어서 몇일 더 culture 해야 해서 가급적이면 뚜껑을 안열고 싶네유.. ㅠㅠ    
회원작성글 오구오구  |  07.27
Q. 4T1 cell thawing
4T1 cell을 thawing하고 9시간 뒤에 morphology를 확인하였는데 이상하게 생겼더라구요ㅜㅜ,, 셀이 뭉쳐있고 전체적으로 퍼지면서 바닥에 부착되어야 하는데 뚱글뚱글하게 바닥에 붙어있었습니다 원인이 무엇인지 혹시 알려주실 수 있나요?
회원작성글 Bio린이  |  07.26
Q. volume 10ml dish의 최소용량
dish의 volume이 10ml로 culture을 하고 있습니다. 처리 시약이 양이 적어서 media양을 줄이려고 하는데 처리를 24시간을 할예정입니다. media를 최소 얼마나할 수 있을까요? 5ml을 넣어보니 전체를 덮긴합니다.  
회원작성글 oneday  |  07.26
Q. RPTEC/TERT1 OCT2 cell culture
안녕하세요! 평소에 RPTEC만 배양하다가 RPTEC/TERT1 OCT2 cell을 구매해서 culture 진행중인데요 계대번호 1에서 2로 푼건데 다른 세포들 배양할때랑 다르게 잘 자라지도 않고 뭉쳐서 자랍니다ㅜㅜ 서치해봐도 culture 모양이 어떤지 안나와서요... 원래 이 셀은 이렇게 자라는게 맞나요...? 아니라면 왜그런걸까요??ㅜㅜ cell 푼지 5일 정도 되었는데 셀이 자라긴하는데... 너무 더디고 뭉쳐서 자라서 문제입니다...
회원작성글 두비두밥  |  07.26
Q. Adenovirus transduction 이후 cell을 떼서 다시 seeding이 가능한가요?
adenovirus를 2시간동안 infection 이후 TE로 cell을 떼서 다시 seeding해서 24시간정도 키운다면 cell이 문제없이 붙어 자랄 수 있을까요?
회원작성글 wnsl1201  |  07.26
Q. NK cell activation 실험을 진행시 어떤 nk cell을 사용하는지 궁금합니다.
저는 현재 NK cell을 activation 시키는 추출물을 찾는 실험을 하고 있는 대학원생입니다. 현재 그 추출물이 NK cell을 activation 시키는지 확인하기 위해 recombinant IL-15과 비교하려고 treat하였습니다. 근데 제가 현재 사용하고 있는 NK cell은 IL-2가 들어가지 않는 NK-92MI 입니다. 이미 활성화가 되있는 것인지 recombinant IL-15를 넣어도 control(IL-15를 넣지않은 군)과 차이가 나지 않습니다. NK cell activation 실험에 NK-92MI을 사용하는게 맞는지 궁금합니다.. 
회원작성글 감자돌이33  |  07.26
Q. [논문 요청]
안녕하세요.   논문 요청드리고자 합니다. 기술 이전을 위한 Method Validation에 대해서 공부중입니다. Flow Cytometry Method Validation Protocols - PubMed (nih.gov) Flow Cytometry Method Validation Protocols - Selliah - 2019 - Current Protocols in Cytometry - Wiley Online Library   감사합니다.
회원작성글 남현  |  07.26
Q. MTT assay 실험때
polydopamine (PDA) 와 Indocyanine green(ICG) 약물의 역할은 무엇인가요? 자료를 검색해도 잘 나오지 않아서 질문드립니다.
회원작성글 poiwue  |  07.25
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