[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
써모피셔사이언티픽
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioLab 박소정 교수
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체 > Microbiology > Fungi
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
Q. Aspergillus 포자 DNA 추출방법이 궁금합니다
Aspergillus 포자의 DNA를 추출하여 간단한 전기영동을 하려고하는데요, Takara사에서 곰팡이 DNA 전용 키트는 따로 없고 식물세포 extraction 키트를 추천한다고 하여 구매하여 사용해봤습니다. 하지만 전기영동상의 DNA 가 확인되지 않아서요 다른 방법을 알고계신 분들 공유 부탁드립니다.
회원작성글 규규갸갸  |  2019.03.27
Q. 푸른곰팡이 배양
안녕하세요, 과학고등학교에 다니는 학생입니다. 며칠전에 귤 먹다가 귤에 푸른곰팡이가 생겼길래 페니실린 합성(?)실험을 해보고 싶은데요, 곰팡이는 배양해본적이 없어서 뭘 어떻게 해야되는지 모르겠네요. 잘못하다가 클린벤치 오염될거 같기도 하고요. 곰팡이가 포자(?)로 있는데 바로 pda플레이트에 streaking하면 되는건가요? 그리고 페니실린 합성 확인하려면 그람 양성균 쓰면 되는건가요? 페니실린 추출까지는 힘들겠죠? 등등 곰팡이 배양 꿀팁 좀 알려주세요ㅠㅠ
회원작성글 유자 차  |  2019.02.21
Q. 진균 동정_마운팅액
안녕하세요. 진균 동정시, 슬라이드 글라스 표본 작업에서 사용 하는 마운팅액 어떤 제품이 좋은지 자세한 제품명, 회사, 카탈로그 넘버 추천 받고 싶습니다. (반영구적 보존)감사드립니다.
회원작성글 QIAFungi18  |  2019.02.12
Q. 포자 접종이 어려운 고등학생입니다.
안녕하세요 미생물을 배양하여 포자 접종 후 기주 식물 및 주변 흙의 변화에 대한 연구를 계획하고 있는 고등학교 2 학년 학생입니다.각종 논문들을 참고하며 실험 과정을 세부적으로 설계하고 있는데 제가 경험과 지식이 부족해서 포자 접종을 정확히 어떻게 하는건지 잘 모르겠네요...한 논문에 따르면 "뿌리는 배양토에서 잘 분리하여 0.5 cm 이하의 길이로 잘게 잘라서 물에 적신 후 핀셋을 이용하여 식물의 뿌리에 접종하였다"고 하는데 이해가 잘 안되네요. 뿌리를 아예 기주 식물로부터 절단한 후 다시 포트에 집어 넣는다는 얘긴가요? 아니면 뿌리에 홈을 만든다는 얘긴가요?지나가시는 분들 도움 주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 망고스틴  |  2019.01.01
Q. 여드름균 배양 오염에 관해 여쭙고 싶습니다
천연추출물의 여드름균 항균 효과를 실험하려고 합니다. 여드름 균을 배양하려고 하는데요, 세균 배양을 하면 그 균만 자라는 것이 아니라 다른 균도 생기고 오염도 되기 쉽다고 들었습니다. 찾아보다가 gram 염색법도 많이 나왔는데(확인방법으로) 양성인지 음성인지를 판별하는 것이지 이게 여드름균인지 아니면 다른균인지는 확인이 안되는 방법같다고 생각이 들었습니다. 제가 배양한 균이 여드름균이 맞는지 아니면 다른 균인지(혹은 오염된건지) 어떻게 확인할 수 있죠?무슨무슨 기준으로 봤을때 이것은 여드름균이 맞다고 판단을 내릴 수 있는 그런 기준이 필요합니다(저희고등학교에 세균배양기가 있긴합니다만 선생님께서 아주 기본적인? 거라고 하셔서 장비가 그다지 좋은 것 같진 않습니다. 참고해주세요!)
회원작성글 이다은  |  2018.12.22
Q. 전기영동 실패 원인 첨부파일
4조처럼 결과가 나와야하는데 저희 조는 한 줄의 전기영동 결과가 다르게 나왔습니다. ㅠ 혹시 실패 원인에 뭐가 있을까요..? pcr된 DNA가 문제가 된건가요..? 다른 버퍼나 그런 용액 때문에 그럴 수도 있나요??? 문제의 원인이 무엇인지 모르겠습니다ㅠㅠ-> 실험 방법은 아래와 같았습니다.이번 실습에서는, 형질전환(Transformation)된 E. coli의 Plasmid에 PCR Product가 Insertion되어 있는지 확인하고자 한다. 이를 위해, ▪ Recombinant E. coli의 배양액에서 Plasmid DNA를 추출하고, ▪ EcoRI Enzyme을 이용하여 Plasmid DNA의 특정영역을 자르고, ▪ 전기영동으로 T Vector와 Insert의 길이를 확인한다. ▣ 생각 넓히기▪ EcoRI Enzyme을 이용하면 플라스미드의 어떤 영역이 잘릴 것인가?▪ EcoRI Enzyme을 이용하면 정말로 우리가 원하는 플라스미드 영역만 잘릴 것인가?▣ 재료 및 기구▪ 형질전환(Transformaton)된 E. coli 배양액 10 ml, Centrifuge, Plasmid 추출 Kit(Wizard Plus SV Minipreps DNA Purification Systems, Promega), EcoRI Restriction Enzyme (Promega), Heat block or PCR Machine▪ <참고> 제한효소 1 unit : 1 μg의 DNA를 최적 온도에서 1시간에 절단할 수 있는 양▣ 실습 방법 – Plasmid 추출01. Promega사의 Wizard Plus SV Minipreps DNA Purification Systems Quick Protocol을 토대로 작성하였음.3)02. 형질전환(Transformation)된 E. coli 배양액10ml을 Centrifuge(Max rpm, 10분)하여 Pellet만 회수한다. (1.5 ml tube로 10,000 rpm에서 15 sec씩 Spin-Down 여러번 해도 됨)03. 배양액 성분을 없애주기 위하여 DNA-Free 증류수(D.W) 1ml을 Pellet이 들어있는 Tube에 넣고 Pipetting하여, Cell을 Washing한다.04. Washing된 Cell을 1.7-ml Microtube에 옮긴 뒤 다시 Table-Top Centrifuge(Max rpm, 15 Sec 정도) 실시 후, 상층액(Supernatant)을 걷어낸다. 05. 250ul Cell Resuspension Solution(CRA)을 Pellet이 들어있는 1.7-ml Microtube에 넣은뒤 Pipette으로 잘 섞어준다.06. 250ul의 Cell Lysis Solution(CLA)을 Pellet이 들어있는 1.7-ml Microtube에 넣은뒤 3~4번 Pipetting 해준다. 또는 Tube를 Interting(Bottom Up and Down) 4회 한다. 1-5분 기다리면서 액체가 맑아지면, 다음 단계로 간다. 5분이상 하면, DNA는 손상됨. 07. 10ul Alkaline Protease Solution을 Pellet이 들어있는 1.7-ml Microtube에 넣은뒤 3~4번 Inverting해준 뒤, 5분 동안 RT(Room Temperature; 22~27 ℃)에서 Incubate한다. 08. 10분 동안 Centrifuge(Max rpm, 14000 rpm)한다. * Cell wall, 용해된 DNA찌꺼기 등이 바닥에 가라앉는다. (흰색 부유물)09. Spin Column(필터가 장착된 작은 튜브)를 Collection Tube에 넣어준다. 10. Centrifuge한 Tube에서 상층액 750ul를 Spin Column으로 옮겨준다. (이 때, 흰색 부유물이 섞여 옮겨지지 않도록 유의한다.)11. 1분 동안 Centrifuge(Max rpm, 14000 rpm)한다. 12. Collection Tube에 모여진 용액들을 버리고 Spin Column에 750ul의 Column Wash Solution(CWA)4)을 넣고 1분 동안 기다린다. 13. 1분 동안 Centrifuge(Max rpm, 14000 rpm)한다. 14. Collection Tube에 모여진 용액들을 버리고 Spin Column에 250ul의 Column Wash Solution(CWA)을 넣고 1분 동안 기다린다.15. 2분 동안 Centrifuge(Max rpm, 14000 rpm)한다. 16. Collection Tube에 모여진 용액들을 버리고 다시 2분 동안 Centrifuge(Max rpm, 14000 rpm)한다. 17. Collection Tube를 버리고 Spin Column을 빈 1.7-ml Microtube에 꽂은 뒤 Spin Column의 필터위에 50 ul의 Nuclease-Free Water를 넣고 Column에 흡수되게 하여 DNA가 녹을 수 있도록 1분간 기다린다. 18. 1분 30초 동안 Centrifuge(Max rpm, 14000 rpm)한다. 19. Spin Column을 버리고 Plasmid DNA가 포함된 50ul 용액 1.7-ml Microtube를 보관한다. 20. 다음 실험을 위해 Nanodrop등을 이용하여 농도를 측정한다.▣ 실습 방법 – Enzyme Cut with EcoRI01. Promega사의 Assembly of Restriction Enzyme Digestions Protocol을 토대로 작성하였음.5)02. 아래와 같이 Enzyme Cut을 위한 Mixture를 1.7-ml Microtube에 넣어 준비한다. ※ 본 Mixture는 20ul의 Reaction Volume 중 DNA 1 ug에 대하여 최적화 되어있으나, Mini-Prep을 통해 추출한 Plasmid DNA의 농도에 맞춰, DNA의 양을 조절한다. Working DNA Range = 0.2 ug ~ 1.5 ugReaction Component Reaction (ul)Nuclease-Free Water 17.3-XRestriction Enzyme 10X Buffer 2Acetylated BSA, 10ug/ul 0.2DNA, 0.4ug XTotal 19.5*Performed in a volume of 20ul with 0.2-1.5ug of Plasmid DNA03. 02번에서 1.7-ml Microtube에 만들어진 19.5 ul 용액에 0.5 ulRestriction Enzyme (EcoRI, 10u/ul)을 넣어준다. 04. Vortexing(또는 Pipetting)으로 용액을 잘 섞어준 뒤, 1.7-ml Microtube 뚜껑을 닫고 몇 초간 Microcentrifuge를 이용하여 Spin Down해준다. 05. Enzyme의 최적 활성 온도에 맞추어 1-4시간 배양한다. * Note: Overnight 배양은 DNA의 분해(Degradation)을 유발할 수 있음.06. 전기영동을 이용하여 정상적으로 Enzyme cut이 실행되었는지 확인한다.
회원작성글 요이  |  2018.12.10
Q. T. rubrum 분양해주실수 있나요?
안녕하세요.급 손/발톱 무좀균인 Trichophyton rubrum로 실험한 건이 생겼는데,KCTC서 분양이 안된다네요 ㅜ혹시 연구원님들 중에 분양해 주실 분 계신지요.
회원작성글 미스미즈bio  |  2018.11.12
Q. 디스크 확산법 질문
이번에 고등학교에서 디스크 확산법을 이용한 천연향균물질에 대한 실험을 푸른곰팡이를 대상으로 해보려고 하는데 디스크 확산법을 처음 해보는 것이라 질문이 많네요 ㅠ1.디스크속의 내용물을 조작은 그냥 뚜껑 열고 거기에 원하는 물질을 넣는다 뭐 이런식으로 하는 건가요?2. 고등학생 신분이다 보니 곰팡이를 배양받을 수  없어 시중에 실험용으로 파는 곰팡이를 이미 도말까지 완료된 상태로 구입하려고 하는데 디스크 확산법은 도말과 함꼐 15분이내로 같이 해야 효과가 있다고 알고 있어서 그냥 해도 큰 문제는 없겠죠??
회원작성글 ilike0410  |  2018.11.11
Q. 콜크 보러 대체
균주를 일정한 크기로 배지에 치상하고 싶은데요 콜크 보러가 없어서.. 대체할만한 방법 없을까요? 원래는 배양할 배지에 콜크보러로 구멍을 뚫고, 배양되어있는 균도 같은 크기로 뚫어서 구멍 안에 넣으려고 했습니다
회원작성글 슬슬  |  2018.11.08
Q. PDA배지 디스크확산법
플레이트에 배양되어있는 식물병원균을 사용할건데요. PDA 배지 중앙에 균주를 콜크 보러로 채취해서 치상하려고 합니다. 근데 균을 콜크 보러로 뚫으면 밑에 고체배지까지 다 딸려오는데... 그걸 어떻게 치상해야될까요? 위에 균이 있는 부분으로 뒤집어서 올려놓으면 배양이 될까요?
회원작성글 슬슬  |  2018.10.23
Q. MIC test 농도 질문드려요 첨부파일
128,64,32,......적혀있는게 1/2로 희석하고 있는건가요??
회원작성글 빰비  |  2018.09.27
Q. well diffusion 실험할때 질문드려요
항균 능력 실험을 할 천연 추출물을 구입하였습니다. 그런데 이 추출물 30%가 글리세롤인데 이걸로 well diffusion 할수 있을까요? 점성이 있어서 질문드려요..ㅜ그리고 천연 추출물을 희석할때 증류수에 하나요 생리식염수에 하나요?
회원작성글 빰비  |  2018.09.23
Q. 균배양액,항균시료 희석 질문드려요
well 디퓨전으로 항균 실험을 하려는 학생입니다액체배지 10ml에 균 콜로니 하나 따서 넣고 배양시켰습니다균 배양액을 희석하려고 하는데 1/1000배로 1ml 만드려면 순차적 희석법을 어떻게 해야하나요? 액체배지에  희석하면 되는건가요?항균 시료 샘플은 대조군과 고,중,저농도로 실험하려 하는데 1/2로 순차적 희석법 하면 될까요??
회원작성글 빰비  |  2018.09.22
Q. PDA배지 제조 첨부파일
천연감자한천배지를 제조했는데요 감자랑 설탕 등등 이용해서 만들었습니다 사용기한이 어느정도 되나요? 균을 접종하고 하루가 지났는데 주변에 사진처럼 흰색 무언가가 나있습니다. 이개 대체 뭘까요? 사용기한이 원래 이렇게 짧은가요..?
회원작성글 슬슬  |  2018.09.20
Q. 식물병원균 디스크확산법
오이덩굴쪼김병, 역병 같은 식물병원균에 식물추출물을 처리해서 항균력을 알아보려고 하는데요. 디스크확산법을 이용하려 합니다. 균주를 분양 받았는데, PDA배지에 배양할 계획입니다. 그런데 추출물을 어떻게 처리해야 할지... 구글에 디스크확산법 사진을 보면 균액을 처리해서 매끈?하고 고른 상태던데요. 진균처럼 균사가 다 살아있는 상태의 경우 어떻게 항균력을 측정할 수 있을까요? 어수선한 질문 죄송합니다 ㅠㅠ
회원작성글 슬슬  |  2018.09.17
Q. 질산칼슘이 첨가된 PDA배지 조제 관련 질문입니다
안녕하세요 연구실에 들어와 대학원을 준비하고 있는 학부 4학년입니다. 질산칼슘을 1mM을 첨가한 PDA 배지를 조제하고 싶은데요 실험실에는 Calcium nitrate tetrahydrate밖에 없습니다. 수화물 상태일때 1mM계산할때는 Calcium nitrate tetrahydrate의 분자량에서 물분자의 분자량을 제외한 값을 구해서 몰농도를 맞추면 되는지요? 그리고 혹시 질산칼슘을 무수물로 판매하기도 하나요? 왜 수화물로 파는지도 궁금합니다. 추가로 PDA를 증류수와 함께 bottle에 마그네틱바와 함께 넣고 오토클레이브를 돌리는데요, 혹시 질산칼슘을 이 단계에서 함께 넣고 돌려도 되나요? 아니면 오토클레이브를 돌린 후에 질산칼슘을 넣어줘야 하는건가요? 오토클레이브를 돌린 후에는 sp.를 300ppm이  되어주도록 넣어줍니다. 염치불구하고 답변 기다리겠습니다 도움부탁드려요
회원작성글 곰팡이야  |  2018.09.13
이전  01 02 03 04 05 06 07 08 9 10  다음
실험 회원 등급이란?
실험Q&A 회원등급안내
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
필코리아테크놀로지 광고