선생님들 안녕하세요. 날씨 더운데 불철주야 연구 하시느라 다들 고생이 많으십니다.    PBMC 관련 연구 하는 사람 인데요, 이번에 NK cell 을 배양 해보고 싶어서 여러 논문 및 연구자료를 보고, 필요 시약 구매 를 하는 과정에 궁금증이 있어 글을 올리게 되었습니다.     IL-2 와 IL-12 를 병용처리 하였을때 NKp30의 발현이 증가 했다는 내용을 보고 해당 물질을 병용처리 하려고 합니다.  IL-2 는 보통 lyophilized 하여 powder form 으로 되어 있다고 알고 있는데. 프로토콜 대로 사용을 하려 할때 이 powder 형태로 되어 있는 IL-2 를 어디에 어떻게 녹여서 사용을 해야 하나요??  IL-2 관련 물질 사용 하시는 선생님들  많은 답변으로 도움을 부탁드립니다. 감사합니다.  

cryosection 한 절편을 culture dish 위에 녹인후 4% PFA로 mild 하게 fix 한 후 그 위에서 세포를 배양하려고 합니다.   Reference가 있기는 하지만, toxicity 등이 궁금해서 혹시 경험있으신분의 코멘트를 듣고자 합니다

혹시 CHANG liver cell을 배양해보신 분 계신가요? 89% DMEM(high-glucose), 1% 항생제, 10% FBS의 조성으로 키워보려는데 혹시 해보신 분 계신가요? 잘 자라던가요? 다른 조성으로 하셨다면 어떻게 하셨는지 궁금합니다!

cell stock을 제조하고 isopropanol이 들어있는 용기에 -20도씨 보관하고있었는데 다른 사람이 모르고 4도씨 냉장실에 용기를 통째로 옮겨놨습니다 제가 발견한건 1시간 뒤였고 언제 냉장실로 옮겼는지는 모르겠지만 몇개는 얼어있고 몇개는 녹아있었습니다 일단 황급하게 전부 액체질소로 옮겼는데 액체질소에 바로 넣어버리는게 맞나요..? 다시 1도씩 천천히 얼리는게 맞았을까요? stock solution은 DMSO 들어가있은 상태로 판매되고 있는 제품을 사서 씁니다

안녕하세요 저는 대학원 석사 2학년 과정 중인 학생입니다.  제가 HCT-116 cell을 24 well plate에 50x10^4cells/ml로 깔아주었는데 다음날 확인해보니  사진과 같은 이상한 게 현미경에서 관찰되었습니다.  혹시 이게 뭘까요..?ㅠㅠ

Bacillus coagulans 포자 발아 조건 및 실험 방법 아시는분 있다요 … 도와주세요 ㅠㅠㅠㅠㅠ

현재 pUE (pig uterine cell) cell을 배양하고 있습니다. 많은 cell들이 passage를 최대 30이하까지만 계대배양을 한다고 알고 있습니다. 근데 저희 실험실에는  pUE cell의 passage가 30이상인 것들만 있어서 의문입니다.  검색을 하여도 pUE cell에 대한 정보를 많이 찾지 못하여서 질문드립니다. pUE cell의 최대 passage를 아시는 분은 알려주세요ㅜㅜ 

최근 breast cancer cell 을 이용하여 실험을 진행중인 대학원생입니다. 실험을 하다가 문득 궁금해진 부분이 있어서 질문을 남기게 되었습니다..! 현재 4T1 cell을 키우고 있는 중인데, 찾아보니 MTV/TM-011 라는 세포도 mouse breast cancer cell 인 것을 알게되었습니다. 그런데 논문에 사용되는 세포는 4T1이 훨씬 많다고 느껴져서요 4T1과 MTV/TM-011, 이 두가지 세포라인을 구분해야하는 이유가 있을까요???? 너무 궁금해서 찾아보긴했는데 시원하게 답이 안내려집니다ㅜㅜ 큰 문제가 없다면 세포주은행을 통해서 구매를 해보고싶은데 (4T1은 ATCC에서만 판매 중인 것으로 알고있습니다..... 혹시 국내에서는 판매하는 곳 없겠죠...???) 혹시라도 아시는 분은 답변해주시면 감사하겠습니다. 모르시더라도 이러한 이유때문은 아닐지 디스커션해주신다면 감사하겠습니다!!! 

NK cell 연구 하는 사람입니다.  PBMC 작업에 필요한 Ficoll 을 계속 해외 직구로 구매해서 사용 하고 있었는데, 최근들어 배송 기간이 한달 가까이 늘어나고 있어서요.  100ml 이상 대용량 에 재고 가지고 있는 국내 업체 소개해주실 선생님 계시나 해서 글 남겨 봅니다. 혹, 관련 업체 내용을 올리는 것이 게시판 룰에 어긋나는 행위이면 withusgroup1@gmail.com  으로 업체 소개 부탁드립니다. 감사합니다.  

2D와 3D cell에서 추출한 엑소좀을 비교하는데 같은양의 cell을 seeding해도 3D에서 스페로이드를 형성못한 cell들이 있기 때문에 세포수는 차이가 있는것이 아닌가요? 논문을 보면 셀카운트하는것을 볼 수 가 없어서 이렇게 질문드려봅니다.

미생물 초보 자입니다. Geobacillus stearothermophilus를 액체 배양 후 원심분리를 통해  그림과 같은 pellet을 얻었습니다. 사진에서 보듯이  pellet은 두 부분으로 나타나는데요.. 어느 부분이 Geobacillus stearothermophilus 인가요? 아랫 부분 작게 뭉쳐진 부분인가요? 윗 부분의 좀 크게 형성 된 부분인가요?

cell culture할 때 media에 sodium bicarbonate가 있어서 CO2 incubator속에서 pH를 조절해주는데 이 때 중추적인 역할을 하는 건 bicarbonate로 알고있습니다. 그런데 그냥 bicarbonate를 쓰지 않고 sodium bicarbonate를 넣어주는 이유가 있나요? sodium이 어떤 역할을 하는 건지 궁금합니다.

안녕하세요   collagenase 1 과 collagenase D 의 차이점을 문의 드리고 싶어서 쓰게 되었습니다. 두 엔자임이 같은 것으로 제가 배웠는데, 맞는지 여쭤보고 싶습니다.   그리고 1,2,3,4 등등 A,B,C,D 등등 콜라게네이즈가 너무 많던데, 서로 같은 것이라고 보면 될지 여쭤보고 싶습니다. 답변 미리 감사드립니다.  

이번에 처음 co-culture 실험 계획을 짜고있는 석사과정 1학기 학생입니다. A cell을 배양한 배지를 Bcell에 treat하는 방법으로 간접적인 co-culture를 하려고 하는데, A cell에서 secretion된 배지 내 cytokine들의 농도를 확인할 방법이 있는지 궁금합니다.     간단한 키워드라도 주시면 찾아보겠습니다..

안녕하세요.   DC2.4라는 세포를 배양 중인데 관련된 정보가 많이 없어 질문합니다.   DC2.4 세포가 매우 작던데 원심분리는 보통 어느 조건에서 하나요?? 논문을 참고해보니 300xg에서 3~5분 진행하던데 너무 과한게 아닌가 싶어 우려됩니다.   그리고 DC2.4 세포가 adherent 한 세포도 있고 suspension 한 세포도 있는데 이 같은 경우 계대배양시 두 가지 세포 모두 사용하면되는건가요? 아니면 이 둘 중 한가지만 사용하나요?   답변해 주시면 감사합니다.  

안녕하세요 현재 암세포에 물질을 처치해 apoptosis를 확인하는 실험 중인 학생입니다.  다름이 아니라 세포에 물질을 처치했는데, 다음 사진과 같은 오염이 발생했습니다.  현미경을 넘어서 육안으로 flask 안 바닥에 눈송이 처럼 오염된 것이 관찰되었는데, 어떤 오염인지 아직 찾지 못해 질문드립니다.   감사합니다.