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BioLab 정래동 교수
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Q. 근피로 시 휴지기 변화가 나타나나요?
근육이 피로해짐에 따라 근육세포의 재분극 과정이 지연돼서 휴지기가 길어진다는 정도로만 간단하게 알고 있었는데, 논문마다 sp가 증가한다는 것도 있고 변화가 없다고 하는 논문도 있길래 정확히 어떻게 되는지 궁금해서 질문 남깁니다.
회원작성글 크레아  |  08.09
Q. CRISPR/Cas12a 반응을 위한 시약 조성비에 관한 질문입니다. 첨부파일
한 논문에서 본 실험의 시약 조성비입니다   해당 논문에선 200nM Lba Cas12a, 1uM crRNA, NEBuffer 2.5 ul, 20U RRI, RPA product9(dsDNA) 2ul, 800 nM fluorophore quencher labeled ssDNA probe로 reaction volume은 25 ul 이라고 하였습니다.    실험 초보여서 이렇게 쓰여있어 어떻게 넣어야 할 지 의문입니다.   동일한 Lba Cas12a을 찾아보니 stock의 concentration이 1uM인데 그렇다면 Lba Cas12a를 5ul 넣어 200nM 을 넣으면 되는 것 인가요? total volume은 25 ul 이기에 1/5인 5ul를 넣어서요.    RRI의 양과 논문과 같은 Probe를 사용한다면 고정적인 수치일것이고  그렇다면 만약 다른 crRNA를 사용하고자 한다면 그 crRNA의 농도에 따라 reaction volume 도 달라지는 것 아닌가요?    사진은 논문 원문입니다.    감사합니다. 
회원작성글 자가격리  |  08.09
Q. 단백질 아미노산서열에서 염기서열로 변환하는 방법 아시는분,,?
염기서열을 아미노산 서열로 변환하는건 아는데 반대는 어떻게 해야하는지 몰라서요ㅜ 혹시 아는분들 답변 부탁드립니다!
회원작성글 롤로야놀자  |  08.09
Q. RNA Isolation 하고 nano drop을 찍으면 항상 농도가 적게나와요
안녕하세요! 현재 RT-PCR을 배우고 있는 학생입니다. 다름이 아니라 RNA를 추출하고, Nano drop을 찍으면 항상 Nucleic acid conc가 적게 나와서 고민입니다.. 평균적으로 50ng/ul이 나오는 것 같은데 혹시 이런 상황일 때 RNA 추출에서 주의해야할 점이 있을까요? 프로토콜 그대로 하고있다고 생각하는데 항상 이 값이 적게나와 다음 cDNA 합성 단계를 진행하지 못하고 있습니다 ㅜㅜ.. 마지막 단계에서 원심분리를 하면 펠렛이 Ep tube에 확실히 보이긴 하는데 나노드롭만 찍으면 값이 낮게 나오더라구요 Trizol에서 세포를 강하게 피펫팅 하는 과정에서 기포가 많이 생겨서 그런건지 아니면 Trizol에서 너무 오래 처리를 해서 그러는지 ㅜㅜ 혹시 조언좀 구할 수 있을까요? 
회원작성글 공공펄  |  08.09
Q. western blot 1차 antibody incubation 시간
웨스턴할때 1차 안티를 저희 실험실은 4도에서 16시간을 인큐베이션합니다. 만약 20시간을 인큐베이션을 하게 되면 어떻게되나요? 결과에 많은 영향을 주게되나요? 
회원작성글 oneday  |  08.09
Q. 실험실에서 바이오시밀러 구매 가능한가요??
안녕하세요,   면역관련 테마로 실험을 하고 있는데, 가설을 세우기 위해서 TNF알파 저해제 약물들을 써봐야할 것 같은데 찾아보니까 해당 약물들이 전부 항체 혹은 바이오시밀러입니다.   뭐 일반적인 파우더나 타블렛에 쓰이는 약물들이야 시그마나 Cayman chemical 등에서 구매해봤는데 바이오시밀러같은건 한번도 주문해본 적이 없는데 보통 어떻게 다들 주문하시나요?   약에 대해 조금 더 찾아보니 전문의약품이라 쉽게 구할 수 있을 것 같진않은데..   필요한 서류등이 있나요?
회원작성글 토라  |  08.09
Q. cell culture시 cell 쏠림
안녕하세요 cell culture를 하는데 매번 cell이 한 쪽으로 쏠리는 경향이 자꾸 생기네요.. 이걸 differentiation 해도 되는건지 싶습니다. 한쪽은 60% 정도인데 한 쪽은 80~90% 정도 되어보이고.. 그냥 기다려야할지 고민이네요..
회원작성글 별헤는밥  |  08.09
Q. Protease 효소단백질을 정제했는데 어떻게 보관해야할까요?
Protease라서 자기들끼리도 분해할 수도 있다고 해서 냉동보관해보려고 하는데 어떤 방법이 제일 좋을까요?? 지금은 4도씨 냉장고에 보관하고 있습니다. 
회원작성글 jyun1009  |  08.09
Q. real-time pcr할때 전기영동을 하지 않는 이유가 궁금합니다.
안녕하세요, real-time pcr을 배우고있는 석사학부생입니다. 이번에 conventional pcr과 real-time pcr의 차이를 찾아보고 있는 도중 real-time pcr 과정에서 Ct값을 확인해서 증폭값을 확인할 수 있는데, 내가 원하는 target template만 증폭됐는지 알기는 전기영동을 하지 않는이상 어렵지 않나요..? 그런데 다른 선배님들은 전기영동을 따로 하지 않으시더라구요.. 아직 배우고있는 과정이라 궁금한게 많습니다. 도움 부탁드립니다.
회원작성글 jleep  |  08.09
Q. viralRNA qPCR RFU값 관해 질문드립니다.
안녕하세요.  실험 중 궁금한 점이 있어 질문올립니다. viralRNA를 qPCR로 검출하는 실험 중 plateau의 RFU값이 낮게 나오는데, 원인을 모르겠습니다.   실험 과정은 1) 백신에서 추출한 viral RNA를 onestep qRT-PCR로 검출시 그래프가 잘 그려졌습니다. 2) 문제는, 실제 바이러스와 백신에서 각각 추출한 viral RNA를 twostep qRT-PCR로 검출 시 바이러스에서 추출한 cDNA의 최종 RFU값이 낮게 그려집니다. 백신에서 추출한 cDNA의 경우 최종 RFU값이 이전처럼 높게 나오구요. ct값은 오히려 바이러스에서 추출한 샘플이 높게 나옵니다. - 2번 실험에서 qPCR은 qiagen의 quantitect onestep mix에서 RT만 빼고 사용했습니다. 혹시 이게 문제가 될 수 있을까요? 의견 부탁드리겠습니다!
회원작성글 harnster  |  08.08
Q. 좋은 primer를 선택하는 방법 첨부파일
안녕하세요. PCR primer를 디자인할때 어떻게 고르면 잘 고를 수 있을지 질문하고 싶어서 글 남깁니다.   제가 primer-blast를 여러 조건을 넣고 돌렸는데, 사진처럼 여러 프라이머가 나옵니다.   원래 여러 프라이머가 나오는건 알지만 문제는 프라이머끼리 겹치는 부분 때문에 어떤 것을 선택하면 좋을지 잘 모르겠다는겁니다...   혹시 기준 같은 것이 있을까요? 알려주시면 감사하겠습니다ㅠㅠㅠ
회원작성글 미니썬  |  08.08
Q. 학부생 QTL Analysis 공부
안녕하세요! 농업을 전공하고 있는 3학년 학부생입니다. 현재 IRRI에서 인턴을 진행중에 있는데 QTL mapping을 이용한 연구를 보조하는 업무를 맡을 것같습니다. 그래서 QTL에 대해 기초부터 고급까지 자세히 알고 싶은데 아직 제대로 찾아보지는 않았지만 자료가 많이 없는 것같아서요.. 그래서 다들 QTL을 처음 공부할 때 어떤 경로를 통해 공부를 하셨나요..? 관련 서적이나 사이트, 유튜브 등등 어떤 것이든 추천해주면 감사할 것같습니다...!
회원작성글 kwonbio  |  08.08
Q. mrs 배지 유산균 배양 질문드립니다.
안녕하세요 실험을 준비하고 있는 학생입니다. 아는것이 많이 없어 최대한 조사하면서 공부하고 있는데 많이 막막해서 의견을 여쭤봅니다.. 저희가 시중에 판매하고 있는 유산균(분말, 캡슐 형태)을 활용해서 실제 썩힌 음식에서 채취한 식중독균을 억제할 수 있는지를 실험하고 싶습니다. 원래는 김치와 같은 식품을 쓰려 했는데 그 속에 유산균 말고도 다른 세균이나 등등이 영향을 줄 수 있다고 해서 시중의 최대한 순수한 유산균 가루를 쓰려고 합니다. (음식으로 해도 가능할까요?)   1. mrs 배지에 판매하고 있는 유산균 가루를 멸균수에 희석해서 도말해서 배양 2. 실제로 썩힌 음식을 멸균수에 넣어서 상등액을 일반 배지에 도말해서 배양 그리고 나서 디스크 확산법을 활용해 배양시킨 유산균이 일반 배지의 균을 억제하는지 확인을 하고 싶은데요...방법을 아무리 찾아봐도 정확히 모르겠습니다 ㅠㅠ Q. 1)여기저기 찾아보니까 mrs 배지에 유산균을 배양시키고 원심분리기 를 이용해서 상등액만 사용해라..는 말이 나오는데 액체 mrs 배지를 사용하는건가요..?? 배양액이 액체 상태의 mrs 배지인가요..? 2)배양시킨 유산균을 어떻게 액상으로 해서 식중독균에 실험하는지 잘 모르겠습니다. 3) 무균 상태 대신 알코올 램프로 대신해도 가능한가요? 4) 원심분리기가 없으면 가만히 오랜 시간동안 두고 상등액만 쓰는 건.. 너무 비과학적인 거겠죠?ㅠㅠ 5) 디스크 확산법에서 한 배지에 여러 유산균을 한 번에 여러 디스크로 테스트해도 되나요? 성장 억제 지대가 서로 막 겹치고 그렇진 않죠..?  너무나 기본적인 내용이라 죄송합니다...! 
회원작성글 생과공부  |  08.08
Q. live imaging
APC gene mutation 된 MACF10를 ctl 10A와 비교하여  b-catenin 의 nuclear translocation을 confocal로 live image 찍으려고 합니다. cell이 살아 있는 상태여야해서 fix는 안될 것 같은데 Ab가 nucleus안까지 들어갈까요? cell에는 damage 주지않으면서  Ab를 넣는 방법 뭐가 있을까요?   의견 부탁드립니다.
회원작성글 새슬  |  08.08
Q. HPLC retention time 및 wavelength 관련 질문
HPLC 관련 실험을 진행하고 있는 연구원 입니다. 관련 공부를 할려고 논문을 보다보니 식물 추출물 관련해서 두가지 다른 물질이 같은 retention time 을 가지고 다른 wavelength를 가집니다. 논문에서는 retention time과 wavelength를 기반으로 분류하였다고 되어 있는데 같은 부서의 연구원 분이 이 부분이 이상하다고 합니다. wavelength의 차이는 피크의 크기 차이만 생길 뿐이지 wavelength차이로는 다른 물질의 구분이 안되고 다른 물질의 구분은 retention time 만으로 한다고 합니다.  그리고 연구원 분의 말씀이 맞다면 retention time이 같은데 어떻게 다른 물질로 판단하는 기준이 뭔지 궁금합니다.  앞선 실험을 하셨던 여러 선배님들의 조언을 구합니다. 
회원작성글 막5  |  08.08
Q. 형광현미경
  96well plate 에 염색한 세포 깔아주고 여러 조건으로 실험 진행 후  형광 형미경 촬영시 한 샘플 당 대표이미지 4~5장 (10x 배율로) 촬영 후 형광 정도 정량하여 분석 진행하고 있는데요,  아무래도 전체 well 을 다 촬영하는 것이 아니라 분석이 주관적인 부분이 있는것 같습니다.    혹시 96well plate -1well 전체를 다 스캔하여 촬영하고 이미지를 얻을 수 있는 형광 현미경이 있을까요??    
회원작성글 jhd2800  |  08.08
Q. 어떤 protein의 E3 ligase가 밝혀져 있지 않았을 때 이를 찾아내기 위해 보통 어떤 step을 거치나요?
어떤 protein의 E3 ligase가 밝혀져 있지 않았을 때 이를 찾아내기 위해 어떤 step을 거쳐서 밝혀낼 수 있을까요?
회원작성글 Dozmal  |  08.08
Q. 유통기한에 따른 성분 변화
식품 일반 성분 분석 실험을 진행중인데요 유통기한이 짧은 식품의 경우 유통기한에 따라서 식품 일반 성분(조지방, 조단백, 회분, 수분, 탄수화물 등)의 변화가 있나요?
회원작성글 mgil48977  |  08.08
Q. 고등학교에서 바이러스와 균 관련 실험을 하려 합니다만 관련 분야의 지식이 부족합니다. 도와주세요
안녕하십니다. 혼자서 실험을 설계해보다 막히는 부분이 있어 도움을 청합니다. 제가 할 실험은 세균에서의 단백분해효소 억제제의 작용을 살펴보는 것 인데요, 여러가지 질문들이 있습니다. 1. 일반적인 고등학교에서 대장균을 배양하는 것이 가능할까요? 배양기 등 장비는 어느정도 갖춰져 있습니다. 혹 대장균이 불가능하다면 어떤 세균들로 대체할 수 있을까요? 2. 단백질분해효소억제제는 시중에서 전문 의약품 형태로만 판매하고 있는 것으로 알고 있습니다. 혹시 따로 추출하거나 구입하는 방법을 아시는지요? 3. 혹시 이와 관련된 선행 연구를 본 적 있으십니까? 실험 설계 과정에서 참고하려고 해도 없는 것 같아서요... 처음으로 실험을 구상해보는 거라 만만치가 않네요.. 많은 도움 부탁드립니다. 
회원작성글 아싸리고등학생  |  08.08
Q. muscle primary cell 분화 실험이 진행이 안됩니다.
chicken 다리 근육에서 얻은 primary cell입니다. sorting은 percoll로 진행하고 있는데요   differentation 실험중에 있는데 Hores serum를 10%, 5%, 2% 로 각각 처리하면서 최적화중에 있습니다. 다른 논문들을 찾아보니 재각각으로 처리하는 논문들이 많고 해서 다양한 농도로 진행하고 있었습니다.   그런데 문제는 P0 즉 바로 얻은 cell에서는 따로 HS를 안쓰고 FBS에서 분화가 자연적으로 발생하는데 P1에서 HS 및 FBS로 분화 유도를 하면 myotube가 형성되기 전에 cell들이 막이 생기면서 바닥에서 떠오르면서 공처럼 뭉치고 있는데 왜 그럴까요?  
회원작성글 정오  |  08.08
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