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Q. western blot antibody 구매 관련
안녕하세요   Human cell로 western blot 실험을 하려고 항체를 찾고있습니다. 궁금한 점이. human cell이면  항체 정보를 보게 되면 species에는 human 이 포함된 것으로 하고  host species는 rabbit 이나 mouse 로 된 항체를 구매하면 되나요?   답변 주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 분자생물왕  |  04.01
Q. 증류수 장비 구입할까요?
증류수를 하루에 1000~ 1500L정도 사용할 예정인데요    이런경우는 그냥 증류수 구입하는게 나을까요??  아니면 장비를 구입해서 제조사용을 하는게 나을까요?
회원작성글 슾하클링  |  04.01
Q. PBMC 파는 회사 있나요?
안녕하세요 PBMC 사용한 실험을 해야하는데 직접 피에서 추출 하지 않고 미리 추출 된 PBMC를 파는 회사 없나요?  알고 계신 것 있으면 추천 좀 부탁 드립니다...
회원작성글 bluebird  |  03.30
Q. western blot과 immunohistochemistry
안녕하세요 western blot과 immunohistochemistry에 관해 자료 조사하다 궁금한 점이 생겨 여쭙니다 제가 조사한 바로는 둘 다 단백질 검출에 쓰이며 주로 항원항체 반응을 이용하는 것 같더라구요 이 두 방법은 자주 비교되는 방법들인가요? 이를테면 이런 경우엔 western blot이, 다른 경우엔 immunohistochemistry가.. 이런 식으로요.  또 수업에서 model은 traumatic brain을 가진 동물을 이용하셨는데.. 특별한 이유가 있어서인지도 알고 싶습니다.  
회원작성글 멜로디엠  |  03.29
Q. pbmc facs population 어떤 부분인지 알려주세요
PBMC를 가지고 FACS 를 찍고 lymphocyte를 게이팅 해야되는데  일반적인  PBMC facs population과 달라서 어떤게 lymphocyte 의문입니다.  일반적인 pbmc  population  제가 찍은 PMBC population 1번과 2번중에 어떤게 lymphocyte 인가요? 혹시 1번은  debris인가요?? 아님 1번과 2번을 다 같이 잡아야 할까요? 왜 population이 저렇게 나오는 걸까요? FACS 고수님들 알려주세요 ㅠㅠ  
회원작성글 힛  |  03.29
Q. SARS-CoV-2 (코로나 바이러스)
SARS-CoV-2(코로나 바이러스) 가 우리 몸 숙주인 ACE2 수용체와 결합될 때, 몸에서 열이 나는 이유가 시토카인(이터류킨, 인터페론) 때문이 맞나요? 혹시나 다른 이유를 찾고싶어도 도저히 못찾겠네요 .... 
회원작성글 natta ca  |  03.28
Q. Flow cytometry; Fixation/Permeabilization 시, Live cell이 너무 많이 감소합니다,,
안녕하세요. 약 1년 간, flow cytometry 조건을 잡고 있는 대학원생입니다.. 주변에 조언을 구할 곳이 없어, 계속 구글링하다가 질문 드리게 되었습니다.   저는 마우스에서 primary cell을 분리한 후, flow cytometry로 분석하고 있습니다. 세포를 분리한 후에는 총 두 개의 그룹으로 나눠 staining을 진행합니다. 1. 2개의 surface staining. 2. 1개의 surface staining -> Fixation/Permeabilization -> 1개의 intracellular (nucelar) staining. Staining을 하기 전까지의 모든 과정은 동일하게 진행합니다. Fixation/permeabilization 단계에서는 'eBioscience™ Foxp3 / Transcription Factor Staining Buffer Set' 제품을 사용하여 4℃에서 O/N 한 후, 다음날 intarcellular staining을 진행합니다.   제가 질문 드리고 싶은 부분은 surface staining만 한 후, 7aaD를 이용하여 live cell을 gating하면 약 90 ~ 95% 정도가 live cell인 반면, fix/perm 과정을 거친 후, live cell을 gating하면 50~70%만이 live cell이라는 점입니다. (Fix/perm하는 sample의 경우 live/dead Ab를 이용하여 staining합니다.) 이렇게 까지 live cell이 감소하는건 제 실험방법에 문제가 있는 것 같아서요.. 다양한 조언을 부탁드리고 싶습니다..   또한 Fix/perm을 하면 cell debris가 많아진다고 들었는데 약 1X10^6개의 cell을 염색할 경우, flow cytometry에서 모든 샘플을 다 읽혀봐도 total events 수가 1X10^6개에 가깝게 나타나는데, stainging 과정에서 저도 모르게 loss를 많이 내고 있는 것일까요..   읽어주셔서 감사합니다:)
회원작성글 타타  |  03.27
Q. Cytokine array 위탁해주는 곳 있나요?
  Tumor lysis sample에서 cytokine screening을 하려고 하는데 빠르게 결과를 얻고 싶어서 array 위탁하려고 합니다.    혹시 추천해주시는 곳 등 있을까요?
회원작성글 오후라긔  |  03.25
Q. ELISA시 standard에 detection을 넣나요?
ELISA시 standard에 detection을 넣나요? Sample에만 넣는건가요?
회원작성글 dhfldl  |  03.24
Q. NK92MI 세포 분양
안녕하세요. 면역학 관련 실험을 진행하기 위하여 nk92MI 세포가 필요해서 그런데 혹시 NK92MI 세포를 가지신 분 분양 가능할까요?  genome365@gmail.com 으로 연락주시면 감사드리겠습니다.
회원작성글 acne  |  03.23
Q. IHC 문의드립니다
안녕하세요 IHC 문의 드릴점이 있어서 글을 씁니다. 제가 double staining을 하려고 합니다. primary antibody들은 mouse, goat 입니다. secondary antobody들을 goat anti-mouse 와 donkey anti-goat를 사용하였습니다. 염색을 확인해봤을때는 염색이 잘 되었는데 2차 항체를 이렇게 사용하면 문제가 되는걸까요? 꼭 알려주세요ㅠㅠ
회원작성글 퐁퐁퐁듀  |  03.23
Q. 엘라이자 항원 유효기간
안녕하세요. 궁금한게 있어서 도움을 받고자 질문 남깁니다. 제가 엘라이자 시험을 하는데, 첫번째 항원을 코팅하여 실험했을때 A와 B 중 B의 항체가 농도만 높게 측정되었습니다. A와 B는 같은 제품으로 제조시기만 다른 제품입니다. 이때  A는 큰 차이로 기준치를 충족하지 못 했었습니다. 근데 새로 재 생산한 항원을 코팅해서 같은 방식, 조건으로 실험을 진행하였을 때, A와 B 모두 높은 항체가로 나타났습니다. 첫번째 항원에 문제가 있었다면, B의 항체가 역시 낮게 나왔어야 하는데, B는 두 실험에서 비슷하거나 처음보다 살짝 낮게 나오고, A에서만 큰 변화를 나타낸게 이해가 가지 않습니다. 실험은 큰 비특이 현상 없이 진행되었고,  다른실험자와도 반복실험을 했기 때문에 시험 방법에는 큰 문제가 없다고 생각합니다. 왜 그런걸까요?ㅠㅠ
회원작성글 으쌰으쌰  |  03.23
Q. 신속항원검사
고등학생인데요 신속항원검사, 면역크로마토그래피와 관련된 기초지식을 얻을수 있는 논문이나 전문서적을 찾고 있습니다 도움주시면 정말 감사할것 같아요
회원작성글 zione  |  03.22
Q. 도와주세요!!!! ELISA real-time PCR 결과 차이,,,제발 도와주세요!!!!!!
Raw264.7 cell을 이용하여 TNF-a, IL-1b, IL-6 발현량을 측정하고 있는데요, 세포는 LPS감작 및 물질처리를 진행했습니다.   PCR의 경우, Cell only보다 물질처리한 cell pellet에서 발현량이 더 낮아질만큼 슈퍼물질로 나왔습니다.(물질 모든 농도에서)  LPS감작(물질처리X)은 잘 됐습니다.   그래서 맞는 데이터인지 비교하기 위해, ELISA를 통해서 발현량을 측정했는데, IL-1b의 경우, PCR만큼 크게 낮아지지 않았고 높은 농도에서만 발현량이 줄어들었고 TNF-a와 IL-6같은경우에는 발현량이 너무 높아 흡광도값이 측정되지 않습니다. ELISA 역시, LPS 감작은 잘되었구요,,,   이런 경우, 어떻게 데이터를 봐야할까요?,,, 두 실험이 이렇게 차이가 나는 이유는 무엇일까요?? 제발 도와주세요,,,,ㅠㅠㅠ
회원작성글 sjsj3636  |  03.22
Q. 샘플 희석 계산 하는법
이제 막 입학한 대학원생인데 샘플 희석해서 마우스에 투여하는 실험을 할 예정입니다. 하지만 샘플 희석 계산하는게 아직 어려워서 난항을 겪고 있는데요.. 20mg/ml의 항원A를 10ug이 포함되게끔 pbs로 희석하고,  0.5mg/ml 의 물질B를 100ug이 되게 pbs로 희석한 것을 혼합했을 때 최종부피 30ul를 하나의 마우스에 투여해야할 때 어떻게 희석해야하는 것일까요...? 답변 부탁드리겠습니다.  
회원작성글 rlatmddus  |  03.22
Q. plasma를 이용하여 활성산소를 측정하는 방법이나 키트
ELISA 방식으로 예상하고 있는데, Plasma를 이용하여 활성산소를 측정하고 연구할 수 있는 키트를 추천해주실 수 있을까요?   활성산소를 측정하는데 주로 DCFDA를 사용한다고 하는데, 구글에 검색해봐도 무엇이 나은지 모르겠고 국내에서 구매할 수 있는지도 모르겠어서 여기에 질문을 올립니다...   구글링하여 찾은 제품으로는 abcam의 DCFDA / H2DCFDA - Cellular ROS Assay Kit 입니다. 먼저 연구해보신 선배님들의 따끈한 조언 부탁드립니다!
회원작성글 Bione  |  03.22
Q. Antibody blocking 과 Knockout 의 차이에 대해 질문드립니다.
안녕하세요 예비 대학원생으로 공부 중인 사람입니다. 논문들을 보면 대게 어떠한 cell의 funtion을 확인하고자 할 때 antibody blocking을 통해 singnaling등을 막아 기존 WT cell의 기능을 막고 cell transfer를 하여 분석을 하거나, 아니면  KO를 시킨 마우스에 funtion을 확인하고픈 cell을 transfer 하는 방법이 있는데요, 이 두 방법을 각각 사용하는 목적이 다른 것인지 궁금합니다. 선배가 저에게 두개의 실험이 다른 목적인 것을 알고있느냐를 질문했는데, 이에 대해 잘 모르겠어서 질문드립니다.  예를 들어 Tcell의 어떤 gene에 대한 연구를 할때, 유전자를 변형한 T cell을 다른 WT 으로 adoptive tranfer를 하는데 이때 원래 T cell funtion을 막기 위해 Tcell KO 를 하는 방법과 T cell function을 막는 Ab를 쓰는 방법 이 있을 텐데, 두 방법의 차이가 존재하나요?  Ab를 inject하면 더 쉬울텐데 굳이 KO mice 제작까지 하여 실험할 이유가 있는지 궁금합니다. 아직 bio에 대한 지식이 부족하여 질문드립니다. 감사합니다. 
회원작성글 며녀칵  |  03.20
Q. 항생제 감수성 테스트
보통 항생제 감수성 실험에 페니실린 암피실린을 쓰던데 같은 계열이지만 더 강한 아목시실린을 사용해도 괜찮을까요?
회원작성글 rlawhddjs4..  |  03.18
Q. ht-29로 IL-8 kit assay를 진행하는데 control 값 관련해서 질문드려요 첨부파일
안녕하세요  실험실에서 HT-29 CELL을 이용해서 IL-8 실험을 진행하고 있는데 CONTROL 값이 너무 높게 나와서 질문드려요. CELL SEEDING은 96WELL에 1*10^5으로 200ul 씩 분주해서 24H 배양하고, SAMPLE 처리후 LPS처리를 진행하고 20H 뒤에 ASSAY를 진행하는데 SAMPLE 값은 잘 나오는데 CONTROL이 높게 나와서 결과가 -값이나옴니다. CELL이 문제가 있어서 CONTROL이 높게 나오는 걸까요?  LPS처리시간이 길어 높게 나오는 걸까요?   CELL이 문제가 있다면 제가 RAW CELL만 하다가 이번에 HT29 를 시작했는데 계대할때 0.25% tripsin을 처리해서 진행하는데 계대 후에 관찰해 보면 바닥에붙어있는 cell도 있고 부유하고 있는 cell도 꽤 관찰이 되는데 cell 이 문제가 있는걸까요? mtt 도 진행해 봤을때 세포가 죽지는 않거든요... 아니면 원래 ht-29를 이용해서 IL-8을 관찰할때 CONTROL이 높게나오는걸까요? LPS랑 어느정도 값 차이가 나면 괜찮은 실험결과를 얻었다고 할 수 있을까요? 그리고 HT-29 CELL상태가 계대후에 부유셀이 있는게 맞을까요? 답변 주시면 감사드려요.^^
회원작성글 cell count..  |  03.16
Q. rota virus plaque assay 진행시 trypsin
안녕하세요. Human Rotavirus A를 cv-1 cell에 접종하여 plaque assay를 진행중입니다. rotavirus의 경우 trypsin을 이용해 외피의 단백질을 변성시켜야 한다고 논문에서 읽었습니다. 여기서 사용하는 trypsin이 acetylated trypsin을 사용하는 논문도있고 그냥 trypsin을 사용하는 논문도 있더라구요. 저는 현재 trypsin from bovine pancrease를 사용하고있는데 CPE확인이 어렵습니다. trypsin acetylated from bovine pancrease를 사용하시는 분 계신가요?? acetylated된것을 쓰면 CPE가 더 잘 나오는지 궁금합니다.
회원작성글 꼬리빗  |  03.16
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