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Q. 조직염색 커버글라스 씌운후에
현미경 확인을 했는데 염색이 많이 씻긴건지 시간이 충분하지 않았는지 확신할 순 없지만 염색이 제대로 되지않았습니다.. 자일렌에 담궈서 마운팅 미디엄 녹여서 커버글라스 제거하고 다시 염색이 가능할까요? 콩고레드염색을 진행했고, 카운터스테이닝은 헤마톡실린으로 진행했습니다ㅠ
회원작성글 오제이  |  05.03
Q. 아토피 실험 β-hexosaminidase에서 BSA-DNP. DNP IgE를 사용하는 이유가 뭔가요??
RBL-2H3 cell로 아토피 실험 β-hexosaminidase 실험을 진행하려고 하는데요 논문을 찾아봐도 다 DNP가 붙어있는 BSA-DNP. DNP IgE를 사용하더라구요,,  BSA-DNP. DNP IgE를 사용하는 이유가 뭔가요??
회원작성글 디비아쥐  |  05.01
Q. ELISA 실험결과 standard를 이용해 샘플의 농도를 어떻게 구하나요?
안녕하세요. competitive ELISA kit(progesterone)를 이용하여 standard와 chicken serum으로 실험하였습니다.   그러나 standard의 농도를 잘못 표기하여 chicken serum의 농도가 부정확하여 다시 구하고자 합니다.   standard의 경우 농도 0일 때 흡광도 평균 1.050 농도 0.15일 때 흡광도 평균 0.825 농도 1일 때 흡광도 평균 0.598 농도 5일 때 흡광도 평균 0.336 농도 20일 때 흡광도 평균 0.219 농도 70일 때 흡광도 평균 0.130   이었습니다.(농도와 흡광도가 반비례하여 competitive elisa라고 생각했습니다)   이 때, 만약 chicken serum의 흡광도 평균이 0.759인 경우 농도는 어떻게 구할 수 있나요?
회원작성글 notorious..  |  04.28
Q. ELISA(chicken serum) 결과 해석 좀 도와주세요.. 첨부파일
안녕하세요.  CUSABIO사의 kit를 이용하여 standard와 측정하고자 하는 chicken serum(Male, 1/10dilution Male, Female, 1/10dilution Female)을 이용하여 ELISA를 진행하였습니다.   참고로 sheet에 competitive enzyme immunoassay technique이라고 써있는 걸 보아 competitive ELISA로 유추하였습니다.    MPM6.exe 프로그램을 이용하여 흡광도를 측정하였으나, 실험결과를 해석하는 데 어려움이 있어 도움을 구하고자 합니다. 첨부파일 확인 부탁드립니다. 1. report 상단에 4-parameters Fit이라고 하여 나온 식은 어떻게 나오게 된 것이며, X, Y, A, B, C, D 값은 어떻게 구해진 것인지 궁금합니다.   2. chi2와 RMS는 무슨 의미인가요?   3. standard report에서 말하는 Std#, Conc, SD, %CV은 무엇인가요? 만약 %CV가 변동계수를 뜻하는 것이라면 샘플 결과에는 왜 안 나오나요?   4. data analysis report의 Conc, SD(Conc)의 의미와 구하는 방법을 알고 싶습니다.   5. 또한 앞에 (1/10)이라고 표기된 것은 1X 혈청 원액을 증류수9혈청1로 희석한 것인데 왜 dilution 한 것과 원액의 흡광도가 크게 차이나지 않는 건가요?   6. Conc에 (+)라고 뜨는 이유와 SD(Conc)에 (*)이라고 뜨는 이유가 궁금합니다.   마지막으로 원래 그래프는 샘플을 제외한 standard만 그려지는 건가요? 질문이 많아 죄송합니다. 
회원작성글 notorious..  |  04.28
Q. ELISA kit
안녕하세요 ELISA kit 를 찾고있습니다.   요새 코팅이 되어서 심플하게 되어 있는 kit들도 많은데  가격이 96test 기준으로 너무 비싸더라구요   직접 코팅해서 사용하는 괜찮은 ELISA kit 제품 있으면 추천 부탁드려요!
회원작성글 민소리  |  04.27
Q. Anti-body 안티바디 형광 붙은 것 형광현미경으로 확인 가능할까요?
형광이 붙어 있는 항체를 용액에 살짝 풀어서 슬라이드 글라스에 올려서 형광현미경으로 관찰 시 형광이 보일까요?     제가 알기로는 확인이 불가능한 것으로 알고 있는데, 이걸 확인하라고 하네요.   확인이 가능한지, 용액에 포함된 항체를 확인할 수 있는 방법이 뭐가 있을까요?   하려는 실험이 용액에 항체를 섞어서 한쪽은 특수한 처리가 없이, 한쪽은 특수한 처리를 하여서  1. 항체의 존재여부와 2. 양의 변화 차이등을 비교하려고 합니다.   어떤 방법이 좋을까요?  형광달린 2차 항체를 쓸 계획인데... 혹시 아이디어가 있으신 분들 공유 부탁드립니다.
회원작성글 비타민B  |  04.27
Q. DAB staining 1차항체 안붙인샘플에서도 발색이 됩니다ㅠ 첨부파일
이전에도 질문했긴한데, 다른 문제로 질문을 또 올립니다ㅠ 1차항체로 ki67을 붙여 hair follicle 관찰이 주 목적이고, 왼쪽 사진은 negative control용으로 1차항체 대신 5%BSA를 붙여 o/n 후, 2차는 동일하게 (2시간30분 반응) 진행하였습니다. dab(vector)시약은 10분 처리하였습니다. 1. 오른쪽 1차붙인 사진 보면 갈색점점이 있는 걸 보아 염색이 안된 건 아닌것 같은데 negative에선 단지 비특이적으로 염색이 된 걸 까요? 혹시 그렇다면 이유가 뭘까요ㅠ 2. 한날한시에 같이 진행한 염색인데 왼쪽오른쪽 사진 발색이 너무 달라서 황당했습니다. 샘플수도 5개 밖에없었어서 염색하면서 delay는 거의 없다고 봐도 되거든요.. 왜그렇죠ㅠ 3. 디지털슬라이드스캐너(image scanner)로 촬영하는데 원래 현미경상으로 볼때 아주아주 연하게 뜨나요? h&e샘플 촬영때는 현미경 auto focus하면 자동인식 아주 잘됫는데 dab샘플들은 너무 연해서 잡히지가 않았습니다. 원래 이런가요..?
회원작성글 12312  |  04.26
Q. light chain (람다/카파)
안녕하세요. 공부하다 궁금한게 있어 질의드립니다.   면역학 책을보면 람다나 카파 체인이 binding면에서 큰 차이가 없다는데   어떤 질환에서는 특정 비율이 높게 발현되고, 항체를 제작할때 람다/카파에 따라 aggregation이 생겨서 바꾸는 것도 있는 것 같은데 이러한 경우는 왜 그런건가요?   관련 지식을 찾고 있는데 잘 나오지 않네요. 
회원작성글 뚜비뚜삐  |  04.26
Q. ELISA에서 TNF-a, IL-6가 다르게 나옵니다...
안녕하세요 :) 읽어주신 모든 분들 좋은 데이터가 나오길 바라며 질문 하나 올립니다 현재 MLE-12라는 cell로 독성물질을 평가 실험을 진행 중입니다 ! 그러던 중 ELISA에서 TNF-a와 IL-6가 너무 다르게 나와서 막혔습니다.ㅜㅜㅜ TNF-a는 정말 꼼짝도 안하고 IL-6는 dose-dependent 하게 검출됩니다. 여러번 해도 이와 계속 같은 결과만 나옵니다. 그런데 TNF-a와 IL-6는 같이 움직이는 것 아닌가요...? 여러 pathway들을 찾아봐도 결국 서로 관여하던데 어떻게 이런 결과가 나올수 있는건가요 ㅠㅠ 고수님들 의견 부탁드립니다...ㅠㅠ
회원작성글 tptptp  |  04.25
Q. 안녕하세요 GSH ELISA KIT 단위
안녕하세요 GSH ELISA KIT를 측정했는데 결과값은 나왔는데 Figure에 나타내기 위한 단위를 어떻게 작성해야 할지 잘 모르겠어서 여쭤보려 합니다. 세포 lysate에서 측정한 GSH kit 단위는 ug/ml인데 제가 세포에서 BCA 측정 후 단백질로 나눠줬습니다. BCA 단위는 ug/ml 입니다. 최종 단위는 ug/ug protein 으로 나타내는게 맞는지 궁금합니다ㅠㅠ 제가 물어 볼 선배도 없어서 일주일동안 이것 때문에 구글검색만 몇번째인지 모르겠습니 다. 부탁드립니다.ㅠㅠ
회원작성글 초코딸긔맛  |  04.25
Q. DAB staining 관련 질문이 있습니다 ! 첨부파일
dab staining을 처음 진행하였는데 이미지 분석하는데에 궁금증이 생겨 질문드립니다. 제가 마우스 skin을 떼서 frozen section하여 hair follicle관찰을 위해 dab stainig을 진행했습니다. 여태 형광염색을 했는데 잘 안나와서 툴을 바꿔보았습니다ㅜ 1ab로 ki67을 붙였는데 이미지를 보니, 빨간색 화살표로 가리킨 갈색침전물은 ki67이 발현된 부분이겟죠? 그럼 이부분 말고 아래쪽에 hair follicle부분도 검은색으로 염색이 되었는데 이 부위는 ki67과는 관련없는 그냥 멜라닌 색소 침착?같은 건가요?? 그리고 전반적으로 background도 색이 연하게 떴는데 dab반응 시간을 늘려야되는건가요? 저는 9분정도 반응시키고 갈색으로 바뀐거 확인하고 마운팅하였습니다. dab 초보라 도움 부탁드립니다ㅠ
회원작성글 12312  |  04.25
Q. scFv랑 peptide는 무슨 차이인가요?
천연물을 했지만 어떨결에 재조합단백질에서 일하고 있습니다.   제가 알기로 scFV가 VH, VL에 single chain달려져 있는것으로 알고 있는데 이게 peptide하고 어떤 차이가 있는지 이해가 잘 가지 않아서요.   예시로, insulin과 insulin을 통해 scFV을 만들었다면 어찌되었든 둘다 insulin receptor을 인식해 signal을 보낼텐데 fully (insulin)하고 particle (scFV)무슨 차이가 있는걸까요..?   사이즈가 작아서 인식이 더 잘된다??
회원작성글 뚜비뚜삐  |  04.22
Q. Antibody 용량계산
안녕하세요 처음으로 Antibody를 구매하게 되었습니다.   1.GSTT1 100µg - ELISA Tested Dilution : 3 ng/mL https://www.thermofisher.com/antibody/product/GSTT1-Antibody-clone-2D12-1C9-Monoclonal/H00002952-M02   2.GSTM2 100µg - ELISA Tested Dilution : 0.03 ng/mL https://www.thermofisher.com/antibody/product/GSTM2-Antibody-clone-1E10-Monoclonal/H00002946-M03?imageId=654252   위 두가지를 구매 할 예정이고 ELISA 160TEST를 진행하려고 합니다. 실험에 필요한 용량은 어떻게 계산하면 되나요? 답변 부탁드립니다~
회원작성글 2112  |  04.21
Q. Antibody 용량계산
안녕하세요 처음으로 Antibody를 구매하게 되었습니다.   1.GSTT1 100µg - ELISA Tested Dilution : 3 ng/mL   2.GSTM2 100µg - ELISA Tested Dilution : 0.03 ng/mL   위 두가지를 구매 할 예정이고 ELISA 160TEST를 진행하려고 합니다. 실험에 필요한 용량은 어떻게 계산하면 되나요? 답변 부탁드립니다~    
회원작성글 2112  |  04.21
Q. 사이토카인의 단백질 분해 촉진 기전이 궁금합니다.
악액질과 관련하여 단백질 분해 억제 실험을 계획하고 있습니다. 자료 수집중 '호염증성 사이토카인'  (IL)-1, IL-2, interferon 및 tumor necrosis factor (TNF) 등이 악액질 발생에 가장 중요한 역할을 한다는 연구결과를 확인했습니다. 사이토카인은 근단백 합성을 감소시키며, 단백분해를 촉진시키는 역할을 해서 근육량을 감소시키게 되는 것인데, 이때 어떤 기전으로 단백분해를 촉진시키는지 알아보려고 하였으나 자료가 많지 않아 어려움을 겪고 있습니다. 관련된 조언해주시면 감사하겠습니다..
회원작성글 ssk8235  |  04.18
Q. CTL에 의한 target cell lysis와 necrosis, apoptosis
안녕하세요. T cell의 tumor killing mechanism을 공부하던 중 의문이 생겨 질문 드립니다. 논문에서는 T cell이 killing하는 과정을 target cell이 lysis되었다고 표현하였는데, lysis라면 일반적으로 cell이 터져서 내부 물질이 외부로 유출되는 necrosis로 볼 수 있나요? 저는 지금까지 perforin과 granzyme B, IFN-gamma 및 TNF-alpha, Fas-FasL 등의 pathway가 모두 target cell의 apoptosis를 일으킨다고 알고 있어서, 혼란이 있어 질문 드립니다. * 그리고 혹시 ICAM-1과 LFA-1의 binding도 Fas-FasL처럼 extrinsic pathway로 apoptosis를 유도하나요? Bystander tumor killing 시 이 binding이 activated T cell에 의한 killing에 대해 susceptible하게 만든다고 하는데, 관련 자료를 찾지 못해 추가 질문 드립니다.
회원작성글 dj_hwn  |  04.17
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