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BioLab 장재봉 교수
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. T벡터 질문드립니당
유전자 클로닝을 할때 벡터에 삽입하기 위해서 EcoRi로 제한효소 처리를 하잖아용   처리하고나면   5'-G         AATTC-3' 3-CTTAA          G-5'   이렇게 약간 좀 복잡하게 되잖아용?     근데 T-벡터라는 녀석은 ..... 벌어진 부분에 T만 한 개 달랑 추가된건데,   점착성 말단보다 모양이 훨씬 더 간단해보이는데....    T-벡터만 쓰면 되는거 아닌가요?   실전에선 다들 T벡터만 쓰게되나요??
회원작성글 GMCSF  |  01.17
Q. Deep freezer
Ln2에 있던 cell stock들을 바로 deep freezer로 옮겨도 되나요?
회원작성글 ㅁㅅㅇㅇ  |  01.17
Q. C.glutamicum competent cell transformation
안녕하세요! C.glutamicum으로 실험 진행중입니다! 그러나 몇 개월째 cp cell 및 transformation이 제대로 되지않아서 조언을 얻어보고자 질문 남깁니다.. ㅠㅠ Competent cell 및 transformation 프로토콜이 있다면 공유해주시면 감사하겠습니다 ㅜㅜ.. 실패 원인에 대해 여러가지 생각해보고 모두 반영하여 시행해봤지만 아직도 지지부진 하네요 ㅠ..ㅠ 그래서 다른 분의 프로토콜과 비교해보고 진행해보고 싶습니다 Transformation이 되지않아서 실험이 전혀 진행이 되질 않습니다 .. 실험이 전혀 되질 않아서 저의 적성에 맞지않는건가 싶기까지합니다 ,, 잘 아시는 분이 계시다면 한번만 도와주세요 ! ㅠㅠ Corynebacterium glutamicum C.glutamicum Cp cell competent cell transformation plasmid vector protocol
회원작성글 미생무울  |  01.17
Q. LN2 탱크수위
LN2탱크 수위체크를 잊고있다가 오늘 확인해보니 13cm여서 바로 주문해서 내일 온다는데 안에 있는 cell들이 불안해서요ㅠㅠ혹시 13cm면 위험한가요..?
회원작성글 ㅁㅅㅇㅇ  |  01.17
Q. limit of detection(LOD) 구하는 방법 중 blank+3SD
항원 농도 별 반응성을 구할때, LOD를 구해야하는데.. 구하는 방법 중에서 blank+3SD 라는 방법이 있다고 들었습니다. 우선 X축(농도)는 0ng/ml, 1ng/ml, 10ng/ml, 100ng/ml, 1ug/ml, 10ug/ml가 있다고 한다면 blank의 값을 0ng/ml에서 1ng/ml로 바꼈을 때로 잡는 건가요? 또, SD(표준 편차)는 1ng/ml~10ug/ml까지 범위에서 SD를 말하는 건가요? blank+3SD 방법은 있다고 하는데 이거 계산과정을 설명한 논문을 아직 못찾아서 도움을 요청드리게 되었습니다
회원작성글 ㅠㅡㅊ  |  01.17
Q. 희석 질문 드립니다. 첨부파일
저희는 bsa를 직접 만들어서 쓰고 있습니다. media 30ml을 만들경우 bsa를 10mg/ml이라고 첨가 해야하는데 연구실에서 bsa 직접 만들면 액체상태인데 .. 어떻게 계산해야 하나요 ?... 참고로 제가 찾은 프로토콜에서는 bsa가 가루 형태입니다. 애초에 할 수 없는 걸까요? 관련 제품을 사야 만들 수 있는 걸까요 ??
회원작성글 yalliyam  |  01.17
Q. blocking 이후 TBST wash 2시간
blocking 1시간 이후에 TBST 워시를 잠깐 한다는 것을 잊어버려서 2시간동안 워시를 했네요.. 그래서 다시 blocking을 30분 정도 하고 간단히 워시 후 항체 붙였는데 혹시 문제가 있을까요..?
회원작성글 별헤는밥  |  01.17
Q. 폴리옥시에틸렌경화피마자유 40, 60 질문
안녕하세요. 제약업계에 종사하고있는 사람입니다. 현재 타겟중인 제품에 폴리옥시에틸렌60경화피마자유가 들어갔는데 이를 폴리옥시에틸렌40경화피마자유로 대체하고 싶습니다. 혹시 가능할까요? 40과 60의 차이가 무엇인지도 궁금합니다!
회원작성글 지이  |  01.17
Q. 왜 다른 비커에서 섞어서 용액을 만든 후, 큰 비커에 합치나요?
제가 연구를 시작한지 얼마 안되서 검색해 볼 키워드라도 알려주시면 정말 감사하겠습니다. mT6배지(쥐)를 만드는 프로토콜을 받아서 따라해보며 익히는 중입니다.   mT6배지를 만드는 과정 중 하나인데, CaCl2를 다른 비커에서 소량의 HPLC grade의 물과 섞어서 원래 만들던 용액에 합치는 과정이 있습니다. 이때 원래 시료를 첨가하던 큰 비커에 바로 넣지 않고, 다른 작은 비커에 용액 CaCl2수용액을 만들어서 큰 비커에 합치는 이유를 모르겠습니다.   phenol RED를 첨가했기 때문에 pH를 알 수 있어서 안의 용액이 산성인건 알 수 있고, CaCl2 또한 산성이라서 중화반응을 작게 하려는 용도도 아니어보입니다. 뭔지 감이 안잡히네요..ㅠ
회원작성글 중동생  |  01.17
Q. GOPOD format 시약 변색
Glucose 측정 방법인 GOPOD에서 시약 중 몇 개가 조금 진한 노란빛을 띠는데 괜찮은건가요?? 색에 영향 줄 정도로 띠어서 OD값도 조금 적게 나와요 왜 그런건지 아시는 분 있나요??
회원작성글 지니0000  |  01.17
Q. 개/고양이 혈액 구매처 문의
안녕하세요 동물용 진단키트만드는 회사에 재직중인 직장인입니다. 다름이 아니라 연구용으로 사용할 개/고양이 혈액이 필요합니다. 원래 거래하던 한국동물혈액은행에서 동물병원에 수혈용으로만 판매하고, 기업에 판매하지 않는다고 답변이 와서 급하게 거래처를 구하는 상황입니다. 지금 해외 거래처로는 Equitech bio 검토중에 있는데, 국내에서 구할 수 있으면 좋겠습니다. 진단 자체는 자체 연구소 내에서 확진검사 후 연구용으로 사용 예정이라 질병에 대한 양성이든, 음성이든 관계없이 구하고 싶습니다. 최소용량은 100ml정도 생각중입니다. 거래처 정보 아시는 분은 공유 브탁드립니다.
회원작성글 ICS  |  01.17
Q. qPCR에서 ct값은 비슷하지만 rfu값 차이가 나는건 왜 일까요?
1. 위은 사진처럼 ct값은 비슷하나 rfu값이 차이가 나서 문의 드립니다. 같은 튜브에서 반복시험한것인데 저런차이가 왜 발생했을까요? 사용해도 되는 결과일까요? 2. 그래프가 눕는?현상이 발생하였는데 이유가 궁금합니다.   
회원작성글 vanana  |  01.17
Q. 70% 에탄올이 피부에 안좋나요?
실험실에서 매일 사용하는 70%에탄올이 있잖아요. 소독원리가 궁금해서 찾아보니깐 비극성의 에탄올분자가 세포막을 통과하고, 에탄올의 OH기와 세포안의 단백질들이 상호작용해서 단백질들이 변성되어 세균들을 죽인다고 하는데.. 저는 장갑안끼고도 손에 많이 뿌리고 그러는데 이러면 피부에 안좋을까요? 표피세포는 좀 더 강해서 괜찮은 건가요? 궁금해서 질문드립니다.
회원작성글 대학원생(진)  |  01.17
Q. hepg2 세포가 너무 뭉칩니다. 첨부파일
안녕하세요! hepg2 세포를 분양받아 키우고 있는데요.. thawing할 때도 피펫팅을 여러 번 해주었음에도 (블루팁, 옐로우팁 둘다) 계속 뭉쳐서 자라서 난감합니다... 원래 이렇게 잘 뭉치는 세포인건 알았지만.. 난감하네요~ 배지 조성이나 다른 요인들이 문제가 될까 싶기도 합니다.. DMEM high glucose를 사용하는데 이게 문제인가 싶기도 하고요    노하우 있으시다면 답변 부탁드리겠습니다 ㅜㅜ
회원작성글 cheer up c..  |  01.17
Q. DEPC-DW 오랜된 것 사용해도되나요?
저희 실험실에 DEPC-DW가 있는데 20년도에 open을 했고  DEPC-DW을 소분해서 parafilm으로 동봉해서 냉장보관을 하고 있습니다. 그래서 소분해둔 것들 사용하고 있는데  오픈한지 오래됬고 이렇게 소분하지도 2년정도 되었는데 사용해도될까요? 시약통에  유통기한이 없어서 질문드립니다. 새로 구매하는게 나을까요?
회원작성글 oneday  |  01.17
Q. 약물 넣는 농도계산 어려워요 ㅠㅠ
stock 농도: 10µg/ml 최종 농도: 25ng/ml    25ng/ml이 되도록 cell에 약물을 처리해야하는데요 ㅠㅠ well 당 700µl 씩 media를 넣어줍니다.  그러면 약물 stock에서 얼마를 따서 넣어줘야 하는걸까요? ㅠㅠ
회원작성글 아랑아랑  |  01.17
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