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 카테고리: 전체 > Microbiology > Yeast
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Q. Pda배지,YM배지
 요즘 미생물배양을 하고 있는데,효모를 배양할때 YM배지를 이용해서 배양실험을 진행했습니다.그런데 바실러스나 유산균이 동시에 배양이되서 효모가 정확하게 잘 자라지 못하는 경우가종종 발생하여 여러군데 문의를 하니PDA배지로 바꿔보면 좋을 것 같다는 조언을 들었는데효모를 배양할때는 어느것이 더 효과적일까요?
회원작성글 HONGCA  |  2017.07.10
Q. 계대배양할때요
 YNB(U-,H-) 배지에서 계대 배양하고 있는데, 2차 계대 배양까지 할 예정인데, 계대 배양을 O.D. 몇 정도까지 진행하면 될까요? 너무 오래 배양하면 균에 mutation이나 contamination될 가능성이 큰가요??혹은 1차 계대 배양을 너무 조금 하면 2차 계대 배양할 때 문제가 생기나요 아니면 그냥 2차 계대 배양 시간이 늘어나는 것 뿐인가요?
회원작성글 umg  |  2017.03.09
Q. 효모수 표시
안녕하세요! 시중에서 파는 효모를 보니까 포장지에 효모수 : 10X108/g으로 되어있던데,혹시 어떤의미인지 알 수있을까요?ㅠㅠ부탁드립니당
회원작성글 알미잉  |  2017.02.28
Q. 순수배양상태를 확인하기위한 평판도말법
안녕하세요! 파우더로 된 효모를 동정하기위해 플레이트를 만들려고합니다.먼저 액체배지에 진탕배양 후 agar를 추가한 고체배지에 평판도말법으로 접종하려고 하는데요, 찾아보니까 평판도말법은 순수배양상태를 확인하기에는 많은 집락이 형성되서 확인하기가 힘들다고 합니다. 그렇다면 평판도말전에 미생물배양액을 (액체배지에 진탕배양한) 희석시키려면 어떻게 해야하나요? 그리고 궁극적으로는 파우더로 된 효모를 동정하기 위해 플레이트를 만들려고 하는데, 저 방법이 맞을까요? 답변해주시면 정말정말 감사하겠습니다!!
회원작성글 알미잉  |  2017.02.23
Q. 파우더형식의 효모배양
안녕하세요!질문이 있어서 이렇게 글을 남깁니다!파우더로 된 효모가 있는데요, 이걸 배양하려고하는데 처음에 어떻게 접종시키면 되는지 궁금합니다.답변 부탁드리겠습니다! 감사합니다^^
회원작성글 알미잉  |  2017.02.16
Q. Yeast transformation하고 있는데 Colony가 자라지 않습니다...ㅠㅠ
Yeast인 JK373 균주에E.coli plasmid인 PRS315의 특정부분를 deletion시킨 cassette를 Transformation시키는 실험을 진행하고 있습니다.지금 3일 째 배양중인데 Reaction은 물론이고, (+)Control도 Colony가 안뜹니다ㅜㅜ두 번째 시도인데ㅜㅜ뭔가 다른 문제가 있는 것 같아서 여쭤봅니다........제가 생각하는 문제점은Transformation하기 전에 계대한지 2주 이상 지난 colony를 따서Cell을 키우려고 seeding을 했고, overnight한 뒤에 main culture했고O.D값이 0.6쯤일 때 transformation을 시작했습니다.cell이 너무 건강하지 않았을까요ㅜㅜ?혹시 JK시리즈 균주에 대해서 아시는 정보가 있는 분들은정보 좀 부탁해도 괜찮을까요ㅜㅜ?
회원작성글 웅이  |  2017.01.06
Q. BioTek Gen5 2.00 (microplate reader) 사용법..
저 기기를 사용해야 하는데 제 주위에 사용할 수 있는 사람이 없어서 인터넷을 찾고 또 찾고 하다가 여기에 질문을 남깁니다....맨 처음 프로그램에서 세팅하는 것을 알고 싶은데 혹시 알고 계신 분 있으신가요..제가 저 기기로 하려는 것은 yeast growth curve입니다..
회원작성글 안녕안녕  |  2017.01.02
Q. silencing assay에 대한 질문이요.
yeast를 대상으로 silencing assay를 진행한 실험결과들이 많이 있어서 저도 한번 해보려고 하는데요...이쪽 분야가 아니라서 다른 선행연구들을 살펴봤음에도 불구하고 silencing assay에 대한 전체적인 실험 프로토콜을 잘 모르겠어서요..혹시 yeast뿐만 아니라 다른 cell을 대상으로 silencing assay을 진행해보신 분들 계시면이 실험에 대한 설명 좀 부탁드립니다.. (전체적인 프로토콜을 알고 싶어요..)
회원작성글 안녕안녕  |  2016.12.22
Q. 저온배양기에서 SDA배지 진균배양을 하는데 배지가 마릅니다.
안녕하세요.제약회사에서 환경모니터링을 진행중하고있는 사원입니다.진균 - 사부로 포도당 한천배지 (SDA) 부유균. 낙하균등을 측정후에 랩하우스 저온배양기에서5~7일동안 20~25도에서 배양하라고 적혀있습니다.온도 측정에는 23도, 습도 18 ~ 20도로 유지되어왔습니다12일에 넣어 오늘(19일)에 꺼내었는데 배지가 말라있고 갈라지고 말라서 배지가 떠버렸습니다.SDA배지를 넣을때 뒤집어서 넣어서 배지부분이 위를 향해여 놓았는데 혹시 이게 문제인지,아니면 습도의 문제인건가요?진균 배양을 너무 오래해서 그런건가요?
김지훈  |  2016.12.19
Q. S. cerevisiae 균을 구합니다.
S. cerevisiae균주를 구합니다.벡터는 pESC-Leu 벡터를 사용하려 합니다.벡터는 구했는데 균주를 구하지 못했습니다.혹시 가지고 계신 분 있으면 분양 좀 해주세요.부탁입니다.메일은 bioprobe@gmail.com입니다.
김승영  |  2016.11.09
Q. Y2H할때 SD배지와 SC배지의 차이점이 궁금합니다.
Y2H를 해서 transformant를 selection하려고 하는데, SC-leu-trp-his배지에서 하라고 하더라구요. 그런데, 제가 가지고 있는 base는 SD base라서.... 둘의 차이점이 뭔지.. SC대신에 SD를 쓰면안되는 것인지가 궁금합니다.
회원작성글 ggongrang  |  2016.10.26
Q. yeast sporulation관련 실험 질문입니다.
yeast의 특정 유전자가 deletion된 strain을 받은 뒤 wildtype과의 sporulation차이를 확인하여고 실험하고 있습니다.구글에서 protocol을 검색하여 GUthrie and Fink recipe라고 되어있는 protocol을 따라하였습니다.오늘 sporulation을 확인하는 날이라.. 현미경으로 봤는데.. 어떤 것을 봐야할지 모르겠습니다. 예를 들어 어떤 차이가 나야하는지도 모르겠구요... yeast spore수를 맞춘뒤 배양했는데, 그 spore 수를 세어야 하는지... 처음 해보는 것이고, 실험실에도 yeast를 주로 하고 있지 않아서 이렇게 질문을 올립니다.
회원작성글 ggongrang  |  2016.10.14
Q. S.cerevisiae를 YNB배지에다가 키우려고합니다.
제가 이번에 YNB 배지에 yeast를 키우려고하는데, 배지 매뉴얼에 테크닉으로 밑에 글처럼 적혀있더라구요, 그래서 일단 만든 배지에 접종시키고 6-7일정도 incubation시키라고 적혀있습니다.그런데 제가 빨간색으로 표시한 저 부분이 이해가 안가서 여쭤봅니다. 저 말이 incubation시키고 난 다음에 흔들어서 성장을 멈추라는 말인가요? 그러면 incubation시킬때 고정시켜서 배양시켜도 S.cerevisiae가 잘 자라나요?? 보통 shaking해서 배양하던데 고정해서 배양을하면 자라나는지도 궁금합니다. TECHNIQUE Prepare the medium per label directions with and without the supplements indicated above. Add 1 mL of the filter-sterilized solution to 9 mL of sterile water, inoculate and incubate at 25-30°C for 6-7 days. After incubation (6-7 days and, if necessary, 20-24 days), shake the tubes to suspend growth. Read for growth.
회원작성글 jy_  |  2016.08.29
Q. 효소제 단위 질문 드리려고 합니다.
같은 효소제들의 농도를 비교하려고 하는데요총 4개의 시료가 있는데 다들 단위가 달라서 어떻해야될지 모르겠습니다.A = 8,000 u/gB = 14,000 MNU/gC = 30,000,000 unit/kgD = 1,200,000 IU/kg 이렇게 있는데 실제적으로 제일 많이 쓰이는 단위는 무엇인지요?그리고 이 단위들을 대표적인 단위로 환산이 가능한건지 궁금합니다!
회원작성글 깡아징  |  2016.08.04
Q. Yeast MIC 측정 도와주세요ㅠ
C. albicans MIC를 측정하려고 하는데요MTT assay를 이용하여 측정해도 되나요?아니면 일반적으로 OD를 읽는 방법과 MTT assay 간에 차이가 있다면 알려주세요 ㅠㅠ
회원작성글 빈둥빈둥  |  2016.06.06
Q. 특정 유전자가 knock out 된 S. cerevisiae 분양
특정 유전자가 knock out 된 S. cerevisiae 분양받으려면 어떻게 해야 하나요  ?제가 미생물전공이 아니라 knock out된 strain은 어디서 검색해야 될지 잘 몰라서요 ..(kctc 등 들어가봤는데 없는건지 제가 못찾은건지....)의견 부탁드립니다.
회원작성글 안녕안녕  |  2016.04.29
Q. S. cerevisiae를 대상으로 OD를 이용한 growth curve
현재 대학원에 진학중인 학생입니다.저는 S. cerevisiae를 대상으로 OD를 이용하여 growth curve를 그리고 있는데요..대수기까지가 아닌 사멸기까지 그려보고 있습니다.. 문득 궁금한 것이 생겨서요 ..1. 죽어있는 세포는 흡수를 못하고 살아있는 S. cerevisiae 세포의 경우에만 600nm의 파장을    흡수에서 OD값이 도출되나요  ? - 이 질문의 의도는 다음과 같습니다. 제 생각으로는 배양이 진행될 수록 탁해지는데    이러면 흡광도는 OD값은 계속 증가하여야 하지 않나요  ?2. OD보다 더욱 정확하게 growth curve를 그릴 수 있는 방법이 무엇이 있나요 ? -  저는 미생물 전공이 아니라 지금 기초부터 공부하고 있어서 이쪽 분야에 대해선 거의 백지에 가깝습니다.. 그래서 나름대로 미생물 또는 yeast에 관한 기초 내용부터 논문까지 두루 공부하고 있는 상태입니다.전문가들의 고견을 부탁드립니다..
회원작성글 안녕안녕  |  2016.03.23
Q. Competent cell 보관온도
제가 실수로 competent cell을 -20도에서 1주일정도 보관했는데 쓸수있나요?
회원작성글 승승이이  |  2016.02.18
Q. 미생물 실험중, 배지
미생물 실험을 하고 있는 학생입니다.진균을 측정하기위해 pda배지에 시료를 도말하였습니다.그런데 yeast와 mold를 각각 측정하고 싶은데,효모만 자라게 하는 배지, 곰팡이만 자라게 하는 배지가 따로 있는지 궁금합니다.
elen  |  2016.02.17
Q. Protease 활성 측정
이제 석사 한학기를 끝낸 대학원생입니다.청국장관련하여 분석실험을 하고 있는데 Protease 활성을 측정하는 중에단위에 대해 궁금한 점이 많아서 질문드립니다.실험 내용은시험관에 0.6% casein 기질 용액 0.1ml에 조효소액(B.subtilis 배양액) 1ml를 가하고37도에서 10분간 반응시킨 다음 0.4M TCA 용액 0.2ml를 넣고 37도에서 25분간 방치하여 ㅊ미전시킨 후 원심분리하였다. 원심분리 후 상층액 1ml을 0.4M 탄산나트륨 0.5ml 와 3배 희석한 Folin 시액 0.1ml을 첨가하여 37도에서 20분간 반응하였다. 반응액은 Spectrophotometer를 이용하여 66nm에서 흡광도를 측정. 입니다.Standard curve로 2000ppm Tyrosine을 희석하여 500,400,300,200,100,50,25,12.5 ppm으로 흡광도 측정 후 그래프를 만들어 보니 y = 0.0012x + 0.832 , R^2=0.988 이 나왔습니다.여기에 제가 가진 청국장 시료로 위의 실험내용을 바탕으로 흡광도를 찍어 나온 값을 이용하여 standard 로 만든 식에 대입하여 값을 구하였는데, 그렇게 해서 나온 값이 396.111 , 444.7222, 507.7778, 552.5 로 나왔습니다.이 것을 U/g 단위로 환산해서 그래프로 그릴려고 하는데, 일단은 뭔가 계산할 것이 필요한지 모르겠습니다. 제가 효소에 대한 실험실이 아니라 U/g 단위에 대한 이해도가 부족하고, 이 수치에 U/g 단위만 붙혀서 그래프를 그려도 되는지가 궁금합니다. 제가 한 실험 뒤에 또 무엇인가를 해야 하는 건가요?? 가르쳐주세요..
회원작성글 경대이동  |  2016.02.13
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