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 카테고리: 전체 > Immunology > Antibody
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Q. des-Arg
안녕하세요. Antibody를 정하는데, Immunogen 설명 부분에 C3a des-arg 라고 적혀있던데,  des-arg 부분이 뭔지 알 수 있을까요..?
회원작성글 인문에서이학살아남기  |  2021.04.18
Q. Lentivirus transfection 과 antibody transfection
Lentivirus transfection은 알고있는데 antibody transfection은 lv transfection이랑 차이점이 무엇인가요?? Antibody는 transfection후 처리를 하는걸로 알고있는데 차이점이 있나요?.
회원작성글 민토링  |  2021.04.05
Q. AB- Double staining 시 Isotype이 다른게 좋은가요?
마커를 두가지 형광으로 보려고 하는데..   둘다 파지티브인 경우에  isotype 이 같아서 덜 붙거나  반반씩 붙거나 해서 감도가 달라지는 상황이 생기는지요?   이미 가지고 있는 ab와 새로 추가로 구매하려는데 고민이 되어 여쭤봅니다.
회원작성글 비타민B  |  2021.04.05
Q. 단일클론항체 HIV 진단
안녕하세요 실험에 관한 궁금한 점이 있습니다. monoclonal antibody를 배양해서 dot blot 이후 western blot으로 HIV를 진단하는 실험의 큰 방향이 이해가 잘 안되는것 같습니다... dot blot은 단순히 HIV 유뮤만 진단하는 rapid test 이고 western blot은 어떤 단백질을 가지고 있는지 정확히 진단하는 것이고 그러면 단일클론항체는 HIV specific 항체인가요?? 보통 HIV 진단할때 단일클론항체를 만들어서 dot blot으로 screening 한 후 western blot으로 antigen-antibody mapping을 하나요?? 이렇게 과정이 이어지는 이유 설명해 주실 수 있으신가요??
회원작성글 ghsk00  |  2021.03.20
Q. 항원-항체 Affinity 측정 위탁업체 질문드립니다.
안녕하세요~~~   항체개발 연구 중에  항원-항체 Binding affinity값을 구하려는데요 직접 실험하기에는 제약이 있어서 위탁으로 진행하려고 합니다. ELISA나 SPR 같은 Affinity 측정시험 대행하는 곳을 찾고 있는데,  해당 실험을 수행하는 업체나 기관 아는 곳이 있으면 추천 부탁드립니다.    감사합니다. 
회원작성글 ct1229  |  2021.03.17
Q. 항체 티올화 후 안정성 문의
안녕하세요?   저희 랩에서 항체를 티올화시켜서 (traut's reagent 사용) 금 나노파티클에 고정시키려고 합니다. Traut's reagent 프로토콜에 보니까 솔루션 제조 후 바로 사용하라고 하더라고요. 시간이 지날수록 활성도가 떨어진다고요.  궁금한 점이 그러면 티올화된 항체는 시간이 지나도 그 티올기가 유지되는 건가요? 솔루션 상태의 티올기는 시간이 지나면 금방 아민기와 반응성이 없는 disulfide 로 바뀐다는데 이미 티올화된 항체는 상관이 없나요?   감사합니다ㅜㅠ       참조: https://www.thermofisher.com/document-connect/document-connect.html?id=man0011238&version=a.0&pdfurl=https%3A%2F%2Fassets.thermofisher.com%2FTFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011238_Trauts_Reag_UG.pdf&title=VXNlciBHdWlkZTogIFRyYXV0JnJzcXVvO3MgUmVhZ2VudA== 
회원작성글 Ginger Bak..  |  2021.03.05
Q. 백혈구 식균작용 관측실험을 설계중인데 관련 질문드립니다.
제목대로 백혈구의 식균작용을 관측하는 실험을 하고 있습니다. 이중 저희가 생각하고 있는 점에 대해 문제점이 없는지, 그리고 혹시 실험과정중 문제가 될만한 과정이 있다면 알려주시면 감사하겠습니다. 목적 : 몸의 면역 체계의 기초인 백혈구(호중구)의 식균작용 관측 과정 : 1. 미리 세균 샘플을 만들어두어, 1일 배양한다. 2. 배양이 완료되면, 간이 채혈기와 스포이트로 피를 채혈한 이후 샘플에 투하한다.  3. 샘플을 현미경으로 관측한다. (dic 현미경을 가지고 있어 추가 염색을 하지 않고도 볼 수 있습니다.)   저희가 걱정하는 점은 혈액을 채혈할 때 전문기관에서 꽤 다량으로 채혈하는 것이 아닌 저 방식으로 채혈해도 되는지에 관한 것과, 이 활동을 관측할 수 있고 크게 위험하지 않은 균을 찾는 것입니다.
회원작성글 일하는핑핑이  |  2021.03.02
Q. ELISA HRP conjugate Antibody에 관해 궁금한점이 있습니다!
안녕하세요! ELISA 실험을 하기위해 계획 및 디자인을 세우는중에 궁금한 점이 생겨 질문 올리게 되었습니다. ELISA 실험에 사용할 Secondary Antibody로 HRP가 tagging된 제품을 찾아보고 있는데, 제품이름에 H+L, F(ab')2, Fc 이런식으로 표기가 되어있더라구요. 이 의미가 보통 1.HRP가 tagging된 위치를 의미하는건가요? 아니면 2.항체를 만들때 사용된 Immunogen으로 그곳에 Specific하다는 의미인가요? 아니면 3.둘다일 가능성이 있고 표기법에 따라 해석해야하는건가요? 예를들어 Goat Anti-Mouse IgG Antibody, (H+L) HRP conjugate -> 이렇게 표기되어 있으면 H+L(whole)에 HRP가 tagging되어있는것 Goat Anti-Mouse IgG Antibody, Fc, HRP conjugate -> Fc에 특이적이고 HRP가 (어딘가에) tagging  이런식으로..   그리고 HRP가 Antibody에 1:1로 하나씩 붙어있는지 아니면 여러개가 무작위한 위치에 붙어 있는것인지 궁금합니다. 한개씩 붙어있는데  H+L이 tagging된 위치를 말하는 경우에는 의미가 맞질 않아서요..   질문을 정리해보면 1.제품명에 적힌 H+L, Fc의 의미 2.HRP가 Antibody에 1:1로 결합해있는지 입니다.   구글링과 브릭을 열심히 뒤져봤지만 시원하게 풀리질 않아 직접 질문글 올리게 되었습니다. 터무니없는 질문같긴하지만... 실험 고수분들의 지식과 경험을 쪼끔만 공유해주시면 정말 너무 감사드릴것같습니다ㅠㅜ
회원작성글 힝구  |  2021.02.24
Q. 면역 지표(CTLA-4, PD-L1) 측정 관련 실험 문의
면역 관련 문헌을 서칭중입니다. CTLA-4와 PD-L1 측정 실험들은 in vitro test 뿐이던데, in vivo 혹은 human 실험에서 측정이 불가한건가요? 아니면 제가 찾지 못하는 것인지.... 실험 방법에 대한 이해가 부족해서 아시는 분의 조언을 구합니다.
회원작성글 rael  |  2021.02.22
Q. SDS-PAGE, western blot
안녕하세요.. 제가 공부하다가 헷갈리는 내용이 있어서 질문드립니다.. SDS-PAGE와 western blot은 정성분석인가요 정량분석인가요..? 그리고 ELISA랑 PCR의 특징은 알지만 만약 이 둘을 진단에 있어 비교한다면 어떤 차이가 있는건가요? 혹시 항체항원 반응시 그 양을 검사하는 방법은 어떤게 있을까요..? 혹시 아시는분 알려주시면 감사하겠습니다..  
회원작성글 ghsk00  |  2021.02.07
Q. 환자유래 항체 및 항원 구입 방법
안녕하세요. COVID-19 환자유래 IgG 나 IgM 항체 및 항원(nucleocapsid protein) 제품 리스트 찾고 있습니다. 환자유래는 외국에서 밖에 못판다고 해서? 외국 회사에서 찾고 있습니다. 궁금한 점은 원래 환자유래 단백질들은 홈페이지에 정보가 원래 안나오고 다 CONTACT 직접해서 정보 얻는 건가요?? 몇 군데 회사홈페이지 들어가서 제품 리스트를 볼 때 (제가 잘 못찾는 것 같아요) 이게 recombinant인지 환자유래 샘플인지, 샘플 타입은 어떤지? 하는 정보들은 안나오기도 하고... 또 어떤 곳들은 제가 찾는 질병관련 제품이 있는지 없는지도 잘 몰라가지고 무작정 물어보고 있씁니다.. 저는 '너네 회사에 이 질병에 관한 항체, 항원 팔고있어? 있으면 제품 카탈로그좀 보내줘'이런내용으로 보내고 있는데 보통 처음에 어떤 식으로 물어보시는지도..알려주시면 감사하겠습니다.      
회원작성글 thedoggy  |  2021.01.20
Q. antibody library에서 B cell 구매관련 질문입니다
antibody library 프로토콜 공부를 하고 있는 학부연구생입니다. 아직 antibody library에 대해 공부한지 얼마 안된 초짜인데요 ㅠㅠ 저희 랩실에서 library를 구축하려고 계획중에 있어 library를 만드는 프로토콜에 대해 조사하고 있습니다.  library를 구축할 때 먼저 사람에게서 B cell를 추출하고 이어 mRNA 추출 cDNA를 합성하여 VH와 VL library를 만들게 되는데요 이때 제가 찾아본 모든 논문에서는 B cell을 인간에게서 채취했다고 하였습니다. 랩실에서 사람에게서 B cell을 추출하기가 현실적으로 어려운데 B cell을 구매하여 사용하여도 되나요? 된다면 어떤 종류의 B cell을 사용해야 하나요? 혹시 이와 관련된 논문에 대해 알고계신게 있다면 추천해주시면 감사하겠습니다
회원작성글 하나빈  |  2021.01.09
Q. protein antibody 질문 있습니다!
지금 공부해야 하는게 있는데 헷갈리는 이론이 있는데 논문들을 찾아봐도 어떤 의미로 쓰인지 모르겠어서요,, 만약에 제가 가지고 있는 protein의 이름이 A라고 할 때, anti-A antibody라고 하는건 A를 잡는 antibody가 아니라 'anti'가 붙었으니 A에 대항해서 A를 무력화 시키는 antibody라는 건가요?? 논문마다 전자 같기도 하고, 후자 같기도 해서 헷갈립니다ㅠㅠ 선배님들 도와주세요,,,
회원작성글 jjnli  |  2021.01.08
Q. 항체 (MAb) 티올화 전처리 후 수율 확인에 관한 질문
안녕하세요,   저희 랩에선 금 자성입자에 항체를 고정시키려 합니다. 공정 전에 항체를 티올화시켜서 전처리하고 있는데, 항체량 1ug 당 14 mM Traut's reagent 4.6 uL 를 넣고 1시간 incubation 한 후 zeba spin desalting column으로 탈염시키고 있습니다. 항체가 티올화가 잘 되었는지 확인하려고 DTNB(Ellman's reagent)를 사용해서 cysteine standard curve를 찍어보려 합니다. 궁금한 점이 항체 하나당 3-7개의 sulfhydryl기와 modification이 된다는데,  이걸 항체 농도에 비례한 sulfhydryl 농도로 나타내려면 어떻게 해야 할까요??   예를 들면 항체농도 2mg/ml 샘플을 모두 티올화 시켜서 한 항체당 3-7개의 sulfhydryl기가 붙어있다고 하면 Ellman assay를 했을때 나오는 최소 & 최대 티올농도가 궁금합니다.    참고할만한 문헌이나 자료 공유해주시면 정말 감사하겠습니다.  새해 복 많이 받으세요! 감사합니다.
회원작성글 Ginger Bak..  |  2021.01.02
Q. 10초만 시간 내주시면 됩니다 아주 간단한 질문입니다
고등학생입니다. 직접 찾아봐야 하지만, 시간이 부족해서 염치없이 올렸습니다. 죄송합니다.   최근 코로나 19 치료제로 단클론 항체를 쓴다고 하던데, 이전에 올린 글에서 "hybridoma는 항체 선별 과정에서만 쓴다"고 답변을 달아주셨습니다.  1. 그렇다면 단클론 항체를 무엇에서 만드나요? 재조합 된 e.coli에서 만드는 건가요?  2. phage display에서 phage가 세균을 감염시키면, 그 세균이 특정 항체를 생산하는 것인가요? 아님 display로는 어떤 유전자가 결합력 강한 항체를 만들어내는지 확인하는 것에 불과한가요?   감사합니다 건강하세요
회원작성글 생명과학 새내기  |  2020.12.18
Q. B-hexosaminidase 측정 실험 도움 부탁드립니다.
RBL-2H3 cell을 사용하여 B-hexosaminidase 측정 실험을 하고 있습니다. 실험실에서 아무도 해본 사람도 없고 제가 처음하는건데 오늘 첫 결과를  내보니 결과가 안나왔다고 해야할까요.. 어디 물어 볼 곳도 없고 막막해서 브릭에다 질문 올립니다. 실험 과정은 1. RBL-2H3 cell을 96 well plate에 well당 3만개 seeding하고 24h incubation 2. media suction 후 culture media에 녹인 anti-DNP-IgE를 처리하고 24h incubation: 최종 농도는 200ng/ml이 되게 했고 IgE는 DPBS에 녹여서 사용했습니다. 3. Siraganian buffer로 2회 washing 4. Siraganian buffer에 sample을 원하는 농도만큼 녹여서 cell에 분주하고 30m incubation 5. DPBS에 녹인 DNP-BSA를 cell에 추가로 분주하고 30m incubation -4번을 suction하지 않은 상태에서 추가로 분주했습니다. 6. 상층액을 따서 B-hexosaminidase activity assay kit로 흡광도 측정 -간단하게, cell의 상층액과 kit에서 제공하는 B-hexo positive control을  96 well plate에 분주하고 substrate를 추가로 분주한 다음 15m incubation 합니다. 그 다음 neutralization buffer를 분주하고 405nm에서 흡광도를 측정합니다. 글이 길어졌네요. 결과는 sample은 커녕 positive control도 흡광도 측정 했을 때 아무것도 안 뜹니다... 혹시 과정에서 잘 못된 부분이 있을까요? kit에서는 96 well black plate를 사용하라는데 전 그냥 실험실에 있는 거 사용했거든요... 그 차이일까요? 정말 어디서 잘 못 됐는지 모르겠습니다.. 조언 좀 부탁드립니다.
회원작성글 GOHARD  |  2020.12.17
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