Genomic DNA 실험을 하던중에 DNA보관용액에는 Tris, TE, D.W가 있다고 들었는데 다른 용액들은 이해가 가겠는데 D.W에 보관하는 이유는 뭔가요??

현재 가지고 있는 stock은 500U/ml으로 700ul 정도인데, 사용 시약의 농도는 20U/ul로 사용해야 합니다. 단순계산으로 25배하면 되는지 아니면 다른 계산방법이 있을까요? stock 1ul + dilution buffer 24ul로 계산하여서 여태 사용중이었는데 요 근래 실험 결과가 잘 나오지 않아서 질문 드립니다.

CRISPR CAS9  KO 을 ESC 에서 시키기 위해서 guide RNA 을 제작했는데요 지금와서 생각해보니 guide RNA 가 intron 부분을 target 하고 있더라고요 .......intron 부분을 target 해도 exon splicing 될때 이상이 생겨서 ptn 발현이 안될까요?? KO 이 제대로 되지 않을까봐 걱정됩니다...    

안녕하세요! 현재 클로닝을 위해 plasmid 추출을 하고 있는 학생입니다. 현재 사용하고 있는 plasmid extraction kit 로 2월 말부터 지금까지 실험을 하고 있는데요, 저번주까지만해도 잘 나오던 순도가 갑자기 확 떨어집니다 ㅜ A260/A280은 1.7-1.8정도 나오는데, A260/A230은 0.9-1.0의 값이 반복해서 나옵니다. 어제는 8개, 오늘은 6개의 시료를 추출해보았는데 이러한 현상이 계속해서 반복됩니다. ㅜ 2,3월달에는 A260/A230의 값이 1.8-1.9정도를 보여 제 실험 프로토콜에는 문제가 없다고 생각되어집니다... 같은 프로토콜로 실험을 진행하였는데 결과값이 안 좋은 이유가 뭘까요.... 키트는 2월 11일에 개봉해서 사용하고 있습니다  제 손이 문제인걸까요...답답해요 ㅜㅜ

안녕하세요 ChIP assay를 이제 하려고 하는 학생입니다. 다름이 아니라 ChIP assay 시 negative control로 rabbit IgG를 사용하는데요 rabbit IgG는 항체를 넣을 때 negative control에 넣으면 되나요? 아니면 언제 rabbit IgG를 넣어야 하나요? 기초적인 질문 해서 죄송합니다ㅜㅜㅜ  

nano drop찍을때 킴테크로 먼저 닦고 사용하는데 킴테크를사용하는이유가 혹시 먼지랑 화학적인요소가 줄여져서 쓰는건가요? 킴테크를 사용하는이유가 뭘까요 ㅠㅠㅠㅠ

DNA 추출실험에서 TE대신 멸균증류수를 사용하는 이유가 무엇인가요? 멸균증류수를 사용하는 이유와 원리가 궁금해요! 그리고 NaCl과 CTAB/NaCl 시약도 궁금합니다 사용하는 원리와 사용 이유좀 알려주세요

안녕하세요. 용액만드는 과정중에 질문이있어 글남깁니다.   0.1몰로 만들어져있는 NaCl용액을 갖고 총 100ml에 NaCl이 0.02%가 들어가게 만들고 싶다면 0.1몰의 NaCl은 얼마나 넣어야 하는걸까요? 이런 계산은 첨이라ㅠㅠ 도움주시면 감사하겠습니다! 

안녕하세요? 마이크로 어레이 customizing이 가능한 업체를 추천 받고자 글을 남깁니다. 이쪽으론 전공자가 아니어서 잘 모르는 분야기도 한데, 연구를 하다가 마이크로 어레이 칩을 제작해야 하는 일이 생겨서요. (mutation을 찾기 위해서 여러가지 wide type sequence를 microarray에 배열하고 싶습니다)   마크로젠의 경우 최소 수량이 너무 많아서 접근이 어려울것 같아요. 간단히 100-200개 정도만 제작이 가능한 업체도 있을지요?    

gene knockout mice를 WT과 교배시켜서 hetero를 만들면 knockdown된 것 같은 gene expression이 있나요?

제목과 같이, luciferase assay를 위한 vector를 제작 서비스해주는 국내업체가 있을까요? 예전에 비슷한 질문에 (주)왓슨알앤디에서 연락을 달라는 답변을 보긴했는데, 전화연결이 되지 않아서요. 국내 업체에 대해 아시는 분 있으시면, 답글 부탁드립니다.

agarose gel이나 PAGE gel에 DNA나 RNA sample을 loading할 때 선생님들께서는 어떤 기준으로 sample양을 loading 하시는지 궁금합니다!   DNA나 RNA의 sample 양을 mole수(pmole~nmole)로 기준을 잡고 하시는지, 질량(ng~ug)으로 기준을 두시는지, 뭐 다른 기준으로 sample양을 정하시는지 궁금합니다. 저는 100ng 수준으로 맞춰서 gel을 내리기는 하는데 실험할 때마다 궁금해서 질문 드립니다.(참고로 저는 PCR을 하는 실험실이 아니고 100bp이하의 oligo를 이용합니다.)

안녕하세요 regression curve를 항상 하나의 그래프로만 만들다가 이번에 사진과 같이 여러개의 그래프를 병합하고 싶은데 아무리 시도를 해봐도 병합이 안되네요 ㅠㅠ;;; regression wizard에서 그래프를 병합하는 방법이 있을까용?

실험을 진행할 때 첫번째 샘플을 채취할 때 Baseline이라고 언급이 되는데요. 이게 흔히 주변에 있는 바르는 Baseline인지 아니면 어떠한 의미가 따로 있는지 궁금해서 질문드립니다.

가지고 있는 시약은 pfu polymerase 250U/ul, Pfu DNA polymerase Enzyme Dilution Buffer입니다. 250U/ul의 시약을 2.5U/ul로 10ml 희석을 해야하는데 100배 희석을 하면 맞을까요? 250U 10ul + pfu Dilution buffer 990ul로 희석하면 될까요??

안녕하세요! 선생님들! 전기영동 실험하다 문득 질문이 생겨서 여쭤봅니다!   PAGE gel을 만드는 과정에서는 sybr dye로 staining을 안하는데 agarose gel을 만드는 과정에서는 sybr dye로 staining을 미리 섞어서 굳히던데 특별한 이유가 있나요?? gel을 만드는 과정에서, agarose gel이 PAGE gel에 비해 상대적으로 두꺼워서, gel 내리고나서 sybr dye로 staining을 하면 DNA staining이 잘 안돼서 gel만들 때 미리 섞어서 만드는건가요?