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웹진 Vol.24, No.10 (2022년 10월) 발간
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 카테고리: 전체 > Cell Biology > Cell Culture
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
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Q. 라이브데드세포형광염색후처리
배양중인 부유세포군을 단계별로 꺼내어 라이브데드 형광염색을 하여 증식발달별 데이터를 모으려하고 있습니다. 단계가 많아지면 염색검체도 많아지게 되는데 콘포칼로 매번 처리하지않고 외부의뢰처에서 한꺼번에 처리하려면 형광염색후 어떤 처리가 좋은지 고수님들 의견을 듣고싶습니다. 2주정도 시료를 모으면 좋겠는데요 형광염색후 고정하여 저온암상자에 보관하면 가능하지 않을까요? 프로토콜 공유가능하신분 부탁드립니다. (dr-dskim@hanmail.net)  
회원작성글 안드로  |  09.02
Q. cetrifuse후 펠렛의 cell외의 medium이나 cell debris를 없애는 방법이 있을까요
안녕하세요.. 실험 초보자입니다. Bacillius stearothermophilus를 spoulation 배지에서 진탕배양 하여 centrifuse합니다. 상층액은 버리고 pellet을 다시 pbs를 부어 wasing하는데 cell과 같이 붙어 있는  cell외의 medium찌꺼기나 cell debris의 끈적거리는 찌꺼기들이 잘 제거되지않습니다. cell외의 것들을 효과적으로 제거하고 cell만 추출하는  방법이 있을까요?    
회원작성글 stanley  |  09.01
Q. 혈액 응고 정량적 비교
고등학교 과제연구에서 천연물을 이용한 지혈제 효능 비교를 하려고 하는데요  혈액이 응고되는 정도를 측정해서 비교하려고 하는데 어떻게 정량적으로 측정할 수 있을지 모르겠습니다 ㅠㅠ  
회원작성글 졸리다  |  09.01
Q. 배지 만들 때 osm, pH 측정하는 순서 아시는 분 계실까요?
세포 키울 배지 만들어서 사용하는 랩실에 계시는 분들, 오스몰농도랑 pH 측정할 때 어떤 것부터 맞추시나요? 제 생각엔 둘이 서로 크게 영향을 안 줄 거 같아서 상관 없을거같긴 한데 루틴하게 하시는 분들 주로 뭐 먼저 맞추시는 지 알고 싶습니다!  참고로 저희는 난자 전처리 배지를 만들어쓰고 있고, 현재는 pH 먼저 측정하고 있습니다 :)  
회원작성글 차다빈  |  08.31
Q. [스케일업/다운] plate의 표면적, 미디어 볼륨 등 무엇을 기준으로 잡아야 되나요?
96well과 6well에서 동일한 실험을 진행하고 싶은데 treat 하는 물질의 양을 어떻게 해야할지 모르겠습니다. 실험은 간단하고 아래와 같습니다. - 세포는 100% confluent 상태에서 진행할 예정 - 물질 treat 후 cytotoxic envrionment에 넣어줍니다 - 이때 물질이 cell death로부터 보호 효과가 있는지 결과를 봅니다   제 생각에는 treat물질이 세포에게 작용하는 비율이 같아야하니까, 표면적을 기준으로 비례한 양으로 96,6well에 treat을 해주어야 합니다. 그런데 미디어의 볼륨도 변수로 작용할 수 있으므로, treat물질/미디어, 즉 농도가 같을 수 있도록 미디어의 볼륨도 맞춰준다.  제가 생각지 못한 부분이 있을까요? 이제 막 입학한 학생이라 잘모르는데 조언 부탁드립니다.   
회원작성글 치자나무  |  08.31
Q. Microfluidics device 질문 드립니다.
 안녕하세요? 제가 최근에 Microfluidics를 이용한 organoid on a chip 에 관심이 좀 생겼습니다. 그래서 셋업 견적을 한번 알아보고 저희 교수님께 건의를 좀 드리고싶은데.. 어떤 회사 장비가 괜찮은지 잘모르겠더라고요.. 혹시 microfluidics를 사용한 cell culture를 하시는 선배님들 중 추천해주실 만한 브랜드가 있을까요 ?? 
회원작성글 Anchovy  |  08.30
Q. 물질 treat 시간이 길어질 때 cell work (media change)는 어떻게 해야할까요?
6-OHDA를 cell에 treat하여 western blot을 진행하려 합니다. 다른 논문들을 보니 12,24,48h time point 외에 1~5week treat을 진행한 data가 있었는데, 이렇게 오랜시간 물질을 treat하게 되면 그 기간동안 media change 등의 cell work은 어떻게 진행하는지 궁금합니다!
회원작성글 석사석사  |  08.29
Q. 콜라젠 위 세포배양 뭉침현상
안녕하세요. 이번에 석사 2차학기에 들어가는 대학원생입니다. 현재 콜라젠 gel 위에 keratinocyte를 배양하여 피부를 모사하는 실험을 진행중입니다. 세포배양을 시작한지는 약 3개월 정도 되었습니다. 실험을 진행하다 계속해서 콜라젠 중심쪽에 무언가가 뭉치는 현상이 보입니다. 제 생각에는 세포가 가운데에서 뭉쳐 자라는 듯한 느낌을 받습니다. 이 상태가 되면 육안으로도 보일정도로 커다란 베이지 색깔의 무언가가 보입니다.이 문제로 현재 한달간 검색 결과와 논문을 찾아보고 있으나 마땅한 해결책을 찾지 못하였습니다.    혹시 이 문제가 왜 발생하는지에 대하여 알고 계시거나 해결방법을 알고 계신 분이 계시다면 도움을 받고자 질문드립니다.  감사합니다!!  
회원작성글 마이신  |  08.29
Q. 세포배양 Media 제조 관련 질문 드려요 !!!!
안녕하세요, 세포 배양을 위한 Media를 제조 하다가 궁금한 것이 생겨 질문 올려요 !!!   현재 CGM을 만들어서 사용 중인데, DMEM + FBS + Penicillin/Streptomycine/L-glutamine 으로 제조 하고 있습니다. 찾아보니 페니실린 종류에도 L-glutamine이 들어가지 않은 것, 0.9% NaCl이 들어 간 것 등 다양하더라구요..! 지금은 페니실린 자체에 streptomycine과 L-glutamine이 들어간 제품을 사용하고 있는데   *DMEM+FBS+Penicillin/Streptomycine +L-glutamine  위 처럼 L-glutamine이 함유되지 않은 페니실린에 제가 따로 글루타민을 넣어도 일반 CGM과 같은 것 인가요..?! CGM 자체가 DMEM+FBS+Penicillin/Streptomycine 인 것으로 알고 있는데 굳이 글루타민이 포함된 페니실린을 사용해야 하나 궁금증이 생겨 질문 드립니다 !!   도와주세요 !!!
회원작성글 솜리  |  08.29
Q. 토양균의 배양 및 확인..
토양균을 채취해서 도말평판법으로 접종한 뒤에 자라난 미생물들을 순수 분리했습니다. 이 중 방선균이 있는 지 확인하고 싶은데 그람염색 후 광학현미경으로 관찰하는 것만으로 방선균인지 확인이 가능한가요?
회원작성글 luxxuria  |  08.27
Q. tween 80 사용 방법
안녕하세요 모르는게 있어 질문합니다! whole cell-biotransfromation을 함에 있어서 기질을 유기용매를 사용할건데 tween 80도 같이 넣어서 사용하고싶습니다 처음에는 유기용매와 버퍼, tween 80으로 stock 을 만든다음에 기질로 넣었습니다 넣는 과정에서 tween 80 때문인지 투명한 결정이 생겨 없어질때까지 vortexing 한 다음 진행했습니다 vortexing 하는 과정에서 거품이 생기도 했습니다. gc/ms 로 측정을 하는데  어느 때는 잘 진행되기도 했지만 기질 피크마저 안뜨는 경우도 있었습니다.  비슷한 논문을 최근에 읽어 보았는데 저처럼 기질에 먼저 녹이는 게 아닌 기질과 동시에 반응하는 culture에 넣은거 처럼 묘사가 되어있어서 질문드려요. (the biotransformation was initiated by adding 15mM ricinoleic acid and 0.5g/L tween 80 into culture broth) 라 표현 되있습니다 따로 넣을 때 tween 80  이 완전히 녹을지에 대해 궁금하기도하고 그렇게 해도 되는지 고수님들 알려주시면 감사하겠습니다  
회원작성글 초짜임다  |  08.26
Q. cell culture media
cell culture media (DMEM, RPMI, 등)가 얼어버린 경우나 56℃에서 heating (1hr 정도) 시켜진 경우 쓸수있나요? 아님 그냥 버려야 하나요?  둘중 하나라도 쓸수있는 경우는 없을까요... 
회원작성글 궁그미새싹  |  08.26
Q. Microcystis aeruginosa 배양 방법 아시는 분 있을까요?
제가 이번에 남조류를 이용한 실험을 하려고 하는데, 남조류 중 Microcystis aeruginosa를 사용하려고 합니다. 다만 저희 연구실에서 아무도 조류 배양을 해보신 분이 없어서 어려움이 있어요ㅠㅠ 자원센터로부터 Microcystis aeruginosa 10ml만 우선 신청해둔 상태인데, 이걸 stock으로 만들어 보관할 수 있는 방법 있을까요? 또한 액상의 형태로도 배양하고자 하는데, 배양 방법을 찾으니 다 제각각이라 어떻게 해야할 지 감도 안 오네요ㅠㅠ 배지는 BG-11을 사용하려고 합니다.
회원작성글 눈눈눈  |  08.24
Q. E.coli , yeast plate 보관기간
실험이 밀리게 되어 E.coli, yeast 를 streaking하여 colony 자란 plate들이 있는데요. 밀봉하여 4도에서 보관 한다면 최대 몇일 까지 보관이 가능할까요?
회원작성글 석사해말아  |  08.24
Q. 선생님들..JOVE 동영상 부탁드립니다..
안녕하세요..제가 osteoblast primary culture를 진행하려고 계획중인데, 관련 프로토콜은 있지만, 연구실에서 한번도 해본 사람이 없어서 동영상을 보고 하면 좋을 것 같다는 생각이 들어서요.. 기회가 된다면, 귀인이 있다면 동영상 부탁드립니다. 감사합니다!   JOVE 주소: https://www.jove.com/kr/v/51465/application-retinoic-acid-to-obtain-osteocytes-cultures-from-primary e-mail: vista58@naver.com 감사합니다 !
회원작성글 호기심러  |  08.23
Q. ags cell injection 관련 질문드립니다.
안녕하세요  저는 현재 mouse에 ags 위암세포를 injection해 종양을 만들기 위해 노력하고 있는 초보 대학원생 입니다.  제가 지금 약 3개월 째 ags 종양을 만들기 위해 노력하고 있는데 종양이 생기는 것 같았다가도 다시 사라지기를 반복하고 있습니다..   혹시 injection의 팁을 구할 수 있을 지 여쭤보고 싶습니다..   1. 저는 현재 1*10^7으로 injection 하고 있습니다. 2. 차가운 PBS에 FBS 20%를 넣어 200ul씩 injection하고 있습니다.  3. 3일에 1번씩 같은 자리에 같은 양으로 계속 injection 하고 있습니다.    혹시 제가 하고 있는 실험방법에 문제점이 있는지 도움을 구하고 싶습니다 감사합니다. 
회원작성글 익명09  |  08.23
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