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BioLab 장재봉 교수
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 카테고리: 전체 > Immunology > Immunocytochemistry
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. brdu double staining
안녕하세요 저희실험실에서 brdu double staining을 진행하려고 하는데,BrdU랑 NeuN double staining으로 갈 것같습니다.저희가 받은 프로토콜에는 Primary rat anti-BrdU antibodyCy3-conjugated goat anti-rat antibodyblockingNeuNFITC conjugated donkey anti-mouse antibody이 순서로 붙이던데 Cy3-conjugated나 FITC대신 alexa를 사용해도 되나요?
회원작성글 빌루  |  2018.12.17
Q. 폐실험에서 masson stain이나 goldner masson stain 염색 대행업체를 찾습니다.
폐섬유화 조직관련 masson stain이나 goldner masson stain 해주실 대행업체 찾습니다.저희가 웨이거 헤마톡실린이 없어서 부득이하게 제가 못하게 되었어요..참고로 지역은 서울입니다. 폐와관련해서 조직염색해주실 업체를 찾습니다.밑에 답변 부탁드려요 실시간 확인하겠습니다. 
회원작성글 이겐  |  2018.10.15
Q. 외부인 confocal현미경 사용할 수 있는 기관 있을까요?
Immnunocytochemistry를 종종 하고있는데요소속되어있는 곳이 대학병원이긴하나 따로 confocal도 없고 약대, 바이오캠퍼스에 있긴한데 세팅이 안되어 있다고 해서요ㅜㅠ매번 졸업했던 대학원가서 이용하기도 너무 멀고 힘들기도 해서요ㅠ경기도, 서울쪽에 외부인이 confocal 이용할 수 있는 곳 아시면 알려주세요!!ㅜ
회원작성글 튜지니  |  2018.09.19
Q. ICC를 이제 처음 시작하게 되었습니다
안녕하세요 이번에 ICC 실험을 처음하게 되었습니다.인터넷에서 프로토콜을 많이 찾아보고 시도하고 있는데,,, 제대로 찾아서 하고 있는지,,, 혹시 직접 선생님들이 하고 계시는 프로토콜들을 알수가 있을까해서 질문올립니다,,
회원작성글 이은지222  |  2018.09.07
Q. ICC(Immunocycochemistry) 결과 사진입니다. paticle 문제 문의드립니다. 첨부파일
ICC 결과 현미경 사진 첨부드립니다.DAPI는 이런일이 발생되지 않는데Alexa488만 이러한 Paticle이 발생됩니다.원인 분석을 위해 실험 조건을 적어드립니다.protocol - cell seeding / remove media  / fixation(Methanol+Acetone, 4'C 20분) / blocking 1hr / sample infection (4'C o/n) -  sampel remove / 1st Ab 1hr, 1:1000, RT / 2nd Ab 1hr 1:2000, RT, Dark / DAPI 1min // mounting1. 각 과정 사이의 "/"에는 1X PBS로 10분씩 3번 washing 하였습니다. (shaker rpm 90)2. Fixation solution이 methanol이라 따로 detergent는 추가하지 않았습니다.3. 1st Ab ab9225, 2nd Ab ab150113 DAPI 1:10000(1ul/10ml) in PBS4, mounting sol -Dako S3023
회원작성글 scientic  |  2018.08.09
Q. vector사에 ABC kit재활용 가능한가요?
제목 그대로인데요 한번썼던 키트를 다음번에 다시 사용해도되나요? 샘플이많아서 키트가 훅훅 나가네요 가격도 한개당 36만원이구... 설명서엔 별다른말은없네요 pk6100쓰고있습니다
회원작성글 luvsoul  |  2018.05.30
Q. IHC 염색
안녕하세요!! 제가 IHC 염색을 더블로 하려고 하는데, 2개의 항체의 host가 같아요ㅠㅠ2개의 항체를 더블 염색 할 수 있을까요??? 혹시 할 수 있다면 어떤 방법으로 하면 될까요??ㅠㅠㅠ석사로 들어온지 두 달 정도 밖에 안되서 모르는게 너무 많아요ㅜㅜㅜㅠ 도와주세요ㅠㅜㅜㅜㅜㅜ 부탁드립니다ㅠㅠ
회원작성글 ㅋㅋ123  |  2018.05.10
Q. if(immunofluorescence)염색 질문입니다.
뇌조직에서 IF(immunofluorescence)를 진행할려고합니다. 질문 : 1차붙이기전 PROTOCOL 을 구하고싶습니다. 정말 전문적으로 하시는분들 프로토콜 부탁드립니다. 공개안하겠습니다. ymxki@naver.com 으로 보내주시면 감사하겠습니다.ㅠㅠ 꾸벅 질문 2 : 저희가 손상된조직에도 if 를 염색하는데 그 손상된 조직에도 형광이 너무 심하게 먹어             같은 섹션 비손상 조직이 대조적으로 시그널이 약하게 찍힙니다. 그 손상부위 부분을 좀 약하게 하는 방법이 없을련지요..   질문3 : 프로토콜중에 셀이 아닌데 전 조직에서 하거든요.. FBS로 블럭킹하는데 이렇게 해도될까요? 존경하는 선생님들.. 세가지중 하나라도 답변해주시면 정말로 감사하겠습니다. 부탁드립니다.  
회원작성글 이겐  |  2018.04.27
Q. peritoneal macrophage로 FACS 해보신 분 계신가요~~? 첨부파일
혹시 peritoneal macrophage로 FACS 해보신 분 계신가요~~?mice에 4% thioglycollate를 i.p로 injection 한 후 4일 후 sacrifice했습니다.dish에 cell을 깐 후 1hr동안 incubation 한 후에 바닥에 붙은 cell들을 pMa로 간주하고 실험을 진행했습니다. (위에 떠다니는 cell을 wash-out)복강 내에서 pMa를 collect해서 FACS를 찍어봤는데총 3개의 population이 나왔습니다.이론적으로는 1개의 population이 나와야 할 것 같은데 원인이 무엇일까요?제가 예상하기로는1. cell debris가 제대로 wash되지 않음.2. cell 수가 너무 적음 (30000만개 counting)3. 1hr incubation 한 후 cell morphology를 관찰했을 때, 동글동글한 cell도 있고 간혹 삐죽삐죽한 별모양 cell도 있었는데 거기에서 오는 차이?정도 예상을 해볼 수 있었는데, 혹시 관련 실험 해보신 분 있으면 조언 부탁드립니다.참고로, 중간에 있는 population을 잡았을 때 제가 원하는 대로 결과가 나왔습니다.  
회원작성글 SHL  |  2018.02.09
Q. ICC staining 시 antibody에 대해서요
안녕하세요 실험중에 궁금한 부분이 있어서 질문을 올리게 되었습니다.ICC staining시 IgM type의 1차 antibody를 IgG type의 2차 antibody가 인식할 수 도 있나요? (둘다 mouse antibody입니다.)떠서는 안되는 signal이 보이는데 이런 이유인가 해서요..
회원작성글 최남제  |  2018.02.03
Q. IHC 파라핀슬라이드 항체
IHC 에  사용될 항체를 주문하려고  합니다. 카탈로그에 100ul 부터 7ml 까지 다양한 용량으로 나와있어서 고민입니다파라핀블락 슬라이드 100장에  필요한 항체양은 얼마로 예상할지요 스탁을 100배 dilution 한다면 대략얼마나 필요할까요?
회원작성글 pretty  |  2017.11.21
Q. ICC나 IHC 잘 하신는 분? (BSA 이외의 serum 첨가)
blocking buffer를 만들때bsa를 추가하는 것으로 blocking 역할을 하는 것으로 알고 있습니다.저는 blocking의 목적으로 bsa만 넣으면 되는줄 알았는데다른 연구실의 프로토콜을 보니 blocking buffer에 Horse serum을 넣는 것이었습니다.0.1% BSA에 추가적으로 2%나 horse serum을 넣더라구요...antibody의 host나 species를 확인했을때 겹치는 것이 없어서backgroud issue는 생각을 하지 않아도 되었습니다만이렇게 serum을 두 가지나 넣어야 할 이유가 있나요?
회원작성글 DK51  |  2017.11.20
Q. paraffin block을 section하는데 자꾸 조직부분이 section이 안되네요 ㅠ 첨부파일
안녕하세요 최근에 파라핀 블락을 우리 실험실에서 만들게 되었는데 초보다보니 잘 안되네요 ㅠ고수님들 보시고 뭐가 잘못됐는지 알려주세요파라핀 블락을 자르면 파라핀 부분은 문제없이 잘립니다그런데 조직부분은 자꾸 구멍이 나거나 조직부분이 찢어지네요 ㅠㅠ도대체 뭐가 잘못된걸까요?블락을 만들때 뭔가 실수를 한건지.. 아니면 섹션할때 잘 못하는건지 ㅠ너무 힘이듭니다부디 조언부탁드립니다
회원작성글 dodhr21  |  2017.10.11
Q. H&E staining시 조직이 갈라지는데 문제를 잘 모르겠습니다.
  H&E staining시 조직이 갈라지는데 문제를 잘 모르겠습니다.조직은 비장이며, 파라핀섹션한 샘플입니다. 조금씩 밀린듯한 조직상태입니다.선생님들 답변 부탁드립니다.ㅠ
회원작성글 하모샤  |  2017.09.25
Q. 쥐 혈액에서 CD4, 8 등을 flowcytometry 해야하는데 실험을 담당해주는 외주 업체가 있나요?
 쥐에서 면역 측정 실험을 하려고 하는데, 모든 실험을 처음부터 다 할 수 없을 거 같아서 외주업체가 있는지 알아보고 있습니다. 
회원작성글 오두막  |  2017.09.21
Q. 실험 관련은 아니지만 논문읽다가 LPS-B cell관련해서 궁금한 점이 있어서 질문합니다!
 Lipopolysaccharide activation of murine splenocytes and splenic B cells increased the expression of aryl hydrocarbon receptor and aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator위 논문의 abstract만 읽었는데 splenocyte에 LPS를 분주하면 AhR이랑 ARNT mRNA 크기가 증가했다고 이해했습니다. 근데 크기가 증가한 AhR과 ARNT mRNA가 B cell의 활성화를 증가시키는건가요??
회원작성글 ksj32307  |  2017.07.12
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