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BioLab 최수진 교수
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 카테고리: 전체 > Molecular Biology-Protein > etc.
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Q. antibody datasheet를 참고할 때 농도 잡기?
보통 antibody datasheet를 보면 application과 sample type, dilution rate이 표시돼있는 경우가 많잖아요~   예를 들어 kidney, paraffin embbeded, IHC, 1/2,000 HeLa, formalin fixed, ICC-IF, 1:800 이런 식으로 돼있는 것들이 많습니다.   그러면 이런 정보들을 보고 내 실험에 적용하는 요령? 같은 게 있을까요   예를 들면 파라핀/크라이오의 차이나, cell/tissue의 차이, IF/IHC의 차이처럼 cell은 tissue에 비해서 높게 써야한다 or 낮게 써야한다 같은 것들...   저는 cell에다 형광염색을 하려고 하는데 (5% acetic acid/EtOH fixed), datasheet에서 예시로 든 건 파라핀 동물조직에서 IHC한 것들이더군요.. 아직 염색에는 경험치가 많지 않아서... 아시는 부분이 있다면 조언 좀 부탁드립니다.
회원작성글 Crufus  |  06.09
Q. Circular Dichroism 데이터 정리 프로그램 다운로드경로
Circular Dichroism 기기 사후 데이터정리 프로그램이 따로있다고 하던데 다운로드 경로는 안나와있고 다들 그 프로그램 사용 프로토콜만 나와서요,,, 혹시 추천해주실 프로그램있나요?
회원작성글 곽말식  |  06.08
Q. mRNA로부터 단백질 합성할 때 에너지 사용되는 과정이 궁금합니다
mRNA로부터 150개의 아미노산으로 이루어진 단백질을 합성할 때 필요한 최소한의 에너지를 계산하는 중인데 단백질 합성할 때 에너지가 사용되는 과정이 어떤것이 있는지 궁금합니다.
회원작성글 윤선우  |  05.23
Q. tdtomato가 붉은색
스스로 붉은색 빛을 내는 단백질인 건가요 아니면 빨간색으로 염색되는 단백질인가요?  반대로 c-fos는 초록색으로 염색되는 immediate early gene인건가요?
회원작성글 haniy  |  05.23
Q. fibrinogen과 thrombin
fibrinogen과 thrombin을 섞어서 혈액 응고 실험을 진행 해도 될까요? 만약 실험을 진행할때 비율은 임의로 수정해도 될까요?
회원작성글 하느을  |  05.20
Q. EU/mL에 대하여...
안녕하세요, 제가 구매하고자 하는 연구용 HA에 대해서 분자량을 알아보고자 하는데, 해당 제품 설명에 이와 같이 적혀있더라고요. The HA has a molecular weight of about I million and a protein load of <0.5 EU/mL.   뒤에 EU/mL이 뭔지를 몰라서... 부끄럽지만 질문 좀 드립니다.   해당 제품의 분자량이 1,000kDA 이고, 단백질 로딩량이 0.5EU/mL 이하란 얘기인가요?  단백질 로딩양은 왜 나오고 저 단위가 뭘 가리키는지를 모르겠네요. 알려주실 선배님들 답글 좀 부탁드립니다.     분 minute      
회원작성글 시작임님  |  05.19
Q. 효소 활성 질문입니다.
안녕하세요. 실험 중에 궁금한 것이 있어서 질문드립니다. 제가 효모를 이용하여 A라는 enzyme을 발현하고자 하는데, 이는 modify된 enzyme입니다. 이 A라는 효소는 물질을 oxidation시키는 역할을 하고 대장균 유래입니다. 근데 효모안에 B라는 유전자가 있는데 이는 A와 흡사하고(효소이름이 동일합니다) ER 표면에서 Disulfide bond를 형성하는 역할을 합니다. 혹시 효모안의 B효소가 A효소 활성에 영향을 미칠 가능성이 있을까요?
회원작성글 호르르  |  05.18
Q. 히스티딘의 내독소 제거 반응을 자세히 알고 싶습니다
내독소 관련해서 과제연구 하고 있는 고등학생입니다. 히스티딘이 내독소 제거에 사용되고 있다고 하는데, 내독소의 lipidA에 작용하는 건가요?  구체적으로 내독소와 어떻게 반응해서 내독소가 제거되는지 알고 싶습니다.
회원작성글 dlba  |  05.15
Q. 나트륨이온 통로랑 칼륨이온통로
 안녕하세요, 현재 고등학교 2학년 입니다. 학교에서 막전위 파트를 배우다가 궁금한게 있어서 질문을 올립니다. 나트륨이온 통로랑 칼륨이온 통로 에서 나트륨이온이랑 칼륨이온이 각각의 통로에서 확산 될때, 칼륨통로에 나트륨 이온이, 나트륨통로에 칼륨이온이 유실되는 경우가 전혀 없는 건가요? 아님 그런 경우가 존재하긴 하나 미미한 양이기 때문에 고려를 하지 않는 건가요? 그리고 혹시 이러한 경우가 몸속에서 일어나서 발생하는 질병이 있을 까요?
회원작성글 하느을  |  05.12
Q. Tricine SDS buffer
안녕하세요 SDS PAGE를 하다가 이번에 처음으로 Tricine SDS PAGE를 해보려고합니다. 찾아보았을 때 anode (+)와 cathod (-)의 buffer를 따로 만들어서  upper tank와 lower tank?에 분리해서 부어주는 것으로 아는데 1. 저희 랩실에 갖고 있는 전기영동 장치는 위 사진의 biorad제품인데, 그러면 gel 끼운 cassette안에 들어가는 버퍼랑 cassette바깥에 통에 들어가는 버퍼를 다르게 채워주면 되는것인가요? 2. 저희 랩실에는 30% Acrylamide/Bis Soltuion 29:1 밖에 없는데, 보통 49.5% T, 3% & 49.5% T, 6%를 사용하는 것 같던데 혹시 29:1를 이용하여 할 수 있는 Tricine sds page 프로토콜이 있을까요 ㅠㅠ
회원작성글 와디와디  |  05.12
Q. 단백질들의 binding 순서
안녕하세요 저는 chromatin에 recruit하는 단백질들이 어떤 순서로? 누가 먼저 binding하는지 확인하는 실험을 하고싶은데 어떤 테크닉을 이용해야할지 궁금해서 문의드립니다.
회원작성글 tresf1588  |  05.11
Q. ubiquitination 26S proteasome
ubiquitination에 K48이 proteasome에 관련이 있잖아요,   혹시 이 때 26S Proteasome에서 26S가 정확히 뭘 의미하는 건가요? 그리고 DUB로 Ub 분자를 떼어주는데, 왜 떼어주는 건지 원리가 있나요?
회원작성글 코로롱  |  05.04
Q. Chloroquine (CQ) 를 처리하면 lysosome 이 증가하는게 맞나요?
lysosome 쪽 지식이 짧아서 제가 정확히 이해한게 맞는지 여쭈려고 질문 올려봅니다. Chloroquine 이 lysosome 과 autophagosome 이 결합하는걸 억제하는 물질이라고 알고 있는데요, 그러면 lysosome 이 세포 내부에 쌓이니, 세포 안의 lysosome 이 증가 하는 것이 맞나요?  
회원작성글 아이고야  |  04.26
Q. 쿠마시블루 스테이닝 디스테이닝 하는 목적
쿠마시 브릴리언트 블루 G-250입니다 인터넷으로 찾아보니 6개의 group들과 2개의 sulfonic acid group들을 통해서 단백질과 결합하는데 소수성 결합(hydrophobic interaction with Try, Tyr, His, Phen)과 반데르 발스 결합(electrostatic force with Arg and Lys)을 통해 결합을 한다. 라고 확인해봤는데요 , sds page후 쿠마시블루 염색을 스테이닝 후 디스테인 하고 이 쿠마시 블루 실험 목적이 음전하를 띄는 염색 분자의 구조가 안정화 되면서 파란색을 띄게 된다라고 알고있고, 이것을 통해 저희가 원하는 목표 단백질 사이즈를 알수있어서 쿠마시블루로 스테이닝 디스테인 실험하는걸로 알고있는데 여기서 제가 질문드릴것은 sds page에서 마커로 단백질 사이즈 확인할수있는거아닌가요? 굳이왜 마커로 sds page로 확인하는데 쿠마시 블루로 굳이 하는실험 목적이 궁금합니다. 
회원작성글 choheec  |  04.21
Q. DTT 농도 관련 질문
안녕하세요    단백질을 disulfide 결합을 방지하기 위해 DTT를 처리하여  보관하고자 합니다.    단백질의 활성에 영향을 주지 않으면서 disulfide 결합을 방지하려면  DTT 농도는 얼마정도 하면 될까요?   SDS-PAGE 할때처럼 1mM은 너무 높은거 같아서요   답변 주시면 감사합니다. 
회원작성글 미야l  |  04.21
Q. bl21에서 colony딴후 단백질 발현 방법?
단백질 발현으로  처음으로 실험 시작하려고 합니다 bl21에서 TF하여  colony딴후 카나마이신,lb,콜로니 이렇게 해서 seedculture하면 될까요? 저혼자 실험하게되어 혹시나 틀렸을까 싶어 이렇게 확인차 질문합니다!
회원작성글 choheec  |  04.18
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