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BioLab 장재봉 교수
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 카테고리: 전체 > Molecular Biology-DNA > etc.
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
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Q. 5X->1X로 희석..질문 드립니다.
안녕하세요. 실험 초짜인데요.. 5x loading buffer를 1x로 희석해야 하는데 1:5비율로 하는것이 맞는지 여쭈어봅니다ㅠㅠ
회원작성글 김민지1  |  2022.06.27
Q. 농도 계산 도와주세요
안녕하세요 생화학 실험실 학부생입니다...   DNA를 주문을 했는데 4 nmol의 상태로 왔습니다. 이것을 10 ng/uL로 희석하려면 water를 얼마나 넣어야 하나요?   계산하는 법도 같이 알려주시면 감사하겠습니다 !
회원작성글 뭘하지  |  2022.06.26
Q. InDel marker를 이용한 PCR product인데 밴드가 안나와요... 첨부파일
안녕하세요 많은 분들의 의견을 듣고 싶어 이렇게 글을 남깁니다..  제가 이번에 한 식물의 indel marker의 염기서열을 보고 oligo primer를 주문하였으며,  pcr 조건으로는  아래와 같이 진행하였습니다. 95℃- 5min  1cycle -------------- 94℃-30sec 55.2, 49.3, 44.8, 41.8, 40.0 ℃-30sec 72℃-40sec  32cycle -------------------------- 72 ℃-10min  1cycle  ----------------------- 4℃-∞  1cycle 100V, 55min 전기영동, gel 농도 1.5% 처음  45℃ 동일 조건으로 진행하였을 때는 밴드가 희미하게 여러개 보였으나. 이번에 gradient로 진행하니 저번에 나왔었던 45℃대의 여러 밴드들도 안보이고 단일밴드로 나왔습니다.. ladder의 경우 잘 나왔으며, loading dye도 찍혀 있어 겔 밖으로 pcr product가 빠져나가진 않은거 같은데  왜 band가 안나왔을까요,, 이럴 때 해결은 어떻게 하시는지 많은 조언 감사드립니다. 부디 많은 의견 남겨 주시면 감사드리겠습니다.. 추가로 band가 많이 구불 거리는데 이부분,,어찌 해결하는게 좋을까요?  전기영동 v를 낮추고, 시간을 늘리면 될까요?    
회원작성글 해조칼슘풍덩  |  2022.06.24
Q. PAGE 에서 두 ladder가 너무 다른 위치에 나옵니다.
안녕하세요, 바이오 전공자는 아니지만 요즘 DNA 를 이용한 여러 실험을 진행하고 있는 유기합성 전공자입니다. 최근에 PAGE 로 oligonucleotide 의 ligation 진행정도를 monitoring 하다가 이상한 현상을 발견했습니다.  사진에 보이는 첫번째 lane 2와 lane 7은 서로 다른 ladder 입니다. lane 2 는 bioneer 의 10 bp ladder이고 lane 7 은 Thermo 의 ultra low range ladder입니다. 근데 얘네들의 basepair 위치 차이가 상당합니다.  저는 기존에 Bioneer 제품을 쓰고 있었는데 보시는 것 처럼 윗 부분에  smearing 하는 현상이 있어서 이를 개선해보고자 thermo 제품을 구매하였습니다. 근데 bp 위치가 기존과 크게 차이가 나며 이를 바탕으로 해석했을 때 제 샘플들이 이론적인 길이보다 훨씬 길어보인다는 문제가 있습니다.  ladder에서 왜 이런 차이가 나는 걸까요?  홈페이지에는 둘다 Agarose gel 용이라고 되어 있는데 제가 page 에서 사용해서 그럴까요?  그렇다면 둘 중에 더 정확한 ladder는 무엇일까요? 이럴경우 standard oligo  샘플 (이미 길이를 정확히 알고 있는) 을 같이 run 해봐야 될까요? 잘 아시는 선생님들의 도움 부탁드립니다. 감사합니다.  
회원작성글 서박  |  2022.06.24
Q. DNA 를 chloroform 으로 뽑는 방법에 pellet이 찌꺼기가 섞인건가 색이 있습니다.
저희 실험실에서 DNA 를 chlroform 으로 뽑는 방법은 다음과 같습니다.    DNA extraction buffer 700uL + 샘플링 넣은 2ml 튜브를 넣기( 구슬 2개+ sample)  Tissue Lyser 에 buffer 넣은 2ml 튜브를 넣어 갈기- 1분 30초 4. 갈아진 2ml tube 는 후드에서 β-Meracaptoethanol 13ul 와 PVP(polyvinylpyrro lidone) 작은 수저 1/2 정도 넣기   2ml tube는 Incubation에서 10분 70°C ,   centrifuge (원심분리) 로 13000rpm 10분 ,   이후 갈아진 2ml tube 600uL 상층액 + Chloroform 600uL (C tube에 넣기) 이후 13000rpm 10분   (C) 상층액 500uL + Isopropylalcohol 500uL   냉동실 30분이 지난 후 13000rpm 10분 원심분리 70%(실험용) 에탄올 700uL에서 2~3반복 washing           여기 까지 진행하는데 DNA pellet 색깔이 노란색, 주황색으로 보이며 찌꺼기가 남아있습니다. 찌꺼기가 안생기도록 최대한 주의하면서 상층액을 땄습니다.  사진은 washing 하기 전 입니다. 이토록 색이 나는데 이유가 무엇일까요?  실험 방법에 오류가 있거나 잘못된점이 있으면 알려주세요.                           
회원작성글 원작생실이  |  2022.06.23
Q. 70% 에탄올 만들때 ethanol과 ethyl alcohol anhydrous 중 뭘 써야할까요
70% 에탄올을 만들때 ethanol과 ethyl alcohol anhydorous 두개 중 어느걸 쓰라는 말일까요 두개를 같다고 생각해서 섞어서 썼는데 큰 차이가 있을까요     혼용해서 쓰면 안되는 경우도 있나요
회원작성글 오르골  |  2022.06.19
Q. 변성된 dna는 추출이 불가능한가요?
변성된 dna의 추출 가능 여부와 dna의 변성은 어떤 방식으로 확인할 수 있는지 궁금합니다
회원작성글 ㅡ응  |  2022.06.19
Q. dna 추출 후 전기영동
안녕하세요. 일반고 재학중인 고1입니다. 이번에 과학탐구 주제를 선정했는데 실제로 고등학교에서 가능할지 모르겠어서 질문드립니다. 실험 주제는 고온에서 변성된 dna와 기존의 변성되지 않은 dna를 추출 후 전기영동하는 방식으로 비교해보려고 해요.. 학교 주문처가 11번가로 한정되어있어서 거기서 파는 간이 전기영동기로도 가능할까요?..ㅜㅜ 그리고 전기영동, dna 추출 관련 논문도 괜찮은 게 있으면 한번 읽어보고 싶습니다..
회원작성글 일반고등학생  |  2022.06.18
Q. RNaseA의 정확한 농도가 실험 결과를 크게 좌지우지 할까요
  DNA 추출할때 RNase A 10mg/ml을 사용하고, Flow cytometry 실험할때 RNAse A 1mg/ml을 사용해야 하는데   그런데 혹시 10mg/ml 대신 12.5mg/ml, 1mg/ml 대신 0.86mg/ml을 사용하면 결과가 안나올까요?   저 두 실험하는데, 정확한 농도가 아니어도 괜찮을까요? 저렇게 잘못 만들었는지 확신이 들지않지만,, 분주하고 보니 생각한것보다 양이 적어서 질문합니다
회원작성글 오르골  |  2022.06.17
Q. 실험실 싱크대 정제수 용도
실험실 싱크대 정제수를 보통 언제 쓰시나요? 오래된 증류수가 담긴 통을 정제수로 한번 행군 후에 바로 증류수를 담아도 문제 없을까요? 증류수에 정제수가 조금 들어가도 문제 없을까요?   랩실에서는 보통 락스에 담가 세척하는 경우 락스물을 흘러보낼때 사용합니다.  
회원작성글 오르골  |  2022.06.13
Q. 증류수를 담은 용기 재사용과 실험실 싱크대의 정제수의 용도
 증류수를 담은 용기를 비우고 다시 사용해도 크게 문제가 없는걸까요? 미생물 실험이 아니라면요, 그리고 실험실 싱크대의 정제수는 보통 언제 사용하시나요? 증류수를 담은 용기를 세척하는데 사용해도 문제가 없을까요  
회원작성글 오르골  |  2022.06.13
Q. seed culture시 항생제를
seed culture 시 항생제를 넣어둔 media에서 하는 이유가 있을까요?
회원작성글 아직학부생  |  2022.06.13
Q. TEAA 질문.
TEAA를 사려고 하는데 triethylamin acetate와 triethylammonium actate 를 혼용해서 쓰고 있는 것 같은데.. (아직 제가 잘 몰라서 그런게 아니라면 지적해주시면 감사하겠습니다.)   둘이 완전 다른 물질인가요?
회원작성글 불구경함  |  2022.06.10
Q. CTAB 제작에 대한 질문입니다
풀어보려고 시도했으나 모르겠더라구요..자료가 충분한지도 모르겠고..그래서 질문드립니다. CTAB 제작을 위해 사용한 시약은 다음과 같습니다. 1. 1% CTAB 2. 50mM Tris - HCL 3. 0.7M NaCL 4. 10mM EDTA CTAB 50ml을 제작한다고 할 때 각각의 시약이 몇 g혹은 ml 필요한지 궁금합니다. 
회원작성글 han5463  |  2022.06.09
Q. GMO 식품 실험의 실험군 설정하기 첨부파일
제가 이 실험을 수행한 후 통계를 내서 p값을 얻고 싶은데 실험군을 어떻게 설정해야 할 지 고민됩니다. 총 25회 실험할 수 있는 분량이 준비되어 있습니다. 1. 옥수수 25개 구입 후 각각 검사 > 모집단에서 몇%의 gmo가 함유되어 있는지 알 수 있고 이를 통해 전체 옥수수의 몇%가 gmo일지 추측해볼 수 있음. 2. 하나의 옥수수에서 25번 검사 > 일관성 있는 검사 결과가 나오는지 확인할 수 있음 3. 하나의 옥수수 통조림(=gmo 가공식품)에서 25번 검사 > gmo 식품은 gmo 함유량이 정확히 표기되어 있지 않은데, 그 양을 확인할 수 있음 혹시 모르니 실험 과정 파일 첨부해두겠습니다. 진로가 생명공학쪽이며 확률과 통계를 수강중이라 실험 한번에서 끝내는게 아닌 통계를 내서 결과를 분석해보는 일을 하고 싶은데,,, 아직 고등학생이라 많이 어렵습니다. 도움 부탁드리겠습니다.
회원작성글 복치복치  |  2022.06.07
Q. 구매한 plasmid 보관
안녕하세요. Addgene에서 plasmid를 구매했습니다. 구매하고 받아서 보관 방법을 확인해보니 4℃에 보관이라고 적혀있었습니다. 균주에 형질전환하지 않고 얼마나 보관할 수 있을까요??  
회원작성글 Worker  |  2022.06.07
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